
- •Практикум по микробиологии Учебно-практическое издание
- •Содержание
- •Введение
- •Правила работы в микробиологической лаборатории
- •Ведение лабораторных записей
- •Методы микроскопического исследования микроорганизмов
- •Методы микроскопии
- •Морфология бактерий
- •Содержание лабораторной работы Задание 1. Приготовление препаратов для прижизненного исследования микроорганизмов
- •Задание 2. Приготовление фиксированного мазка микроорганизмов и изучение при помощи иммерсионной системы микроскопа
- •Задание 3. Изучение различных морфологических групп микроорганизмов
- •Контрольные вопросы
- •Наиболее часто используемые красители
- •Внутриклеточные включения
- •Клеточные структуры
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •1.3. Морфологические особенности и ультраструктура актиномицетов, спирохет, риккетсий, хламидий и микоплазм Цель занятия
- •Основные сведения
- •Контрольные вопросы
- •1.4 Морфологические особенности и ультраструктура микроскопических грибов и простейших Цель занятия
- •Основные сведения
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Условия культивирования микроорганизмов
- •Пищевые потребности микроорганизмов и требования к питательным средам
- •Классификация питательных сред
- •Этапы приготовления питательных сред
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы посева биологического материала
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы дезинфекции
- •Методы антисептики
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Морфологическая характеристика
- •Культуральные свойства
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.2. Физиолого-биохимические свойства микроорганизмов Цель занятия
- •Основные сведения
- •Физиологические особенности микроорганизмов
- •Биохимические свойства микроорганизмов
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.3. Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам Цель занятия
- •Основные сведения
- •Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам методом дисков (диффузионный тест)
- •Количественное определение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам методом серийных разведений.
- •Микротест–системы для определения чувствительности к антимикробным препаратам
- •Количественное определение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам с помощью е–теста
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.4. Изучение патогенности и вирулентности микроорганизмов. Работа с лабораторными животными Цель занятия
- •Основные сведения
- •Бактериоскопические методы
- •Биохимические методы
- •Биологические методы
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •4.2. Микрофлора воды Цель занятия
- •Основные сведения
- •Микрофлора природных вод
- •Микробиологический анализ образцов воды
- •Гигиенические и санитарно-бактериологические требования к питьевой воде
- •Нормативы питьевой воды по микробиологическим показателям (СанПин 2.1.4.559-96.)*
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •4.4. Микрофлора воздуха Цель занятия
- •Основные сведения
- •Микробиологический анализ воздуха
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Микрофлора лекарственного сырья и готовых лекарств
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы оценки неспецифической защиты организма
- •Дифференцировка лимфоцитов на кластеры дифференциации по поверхностным cd-маркерам
- •Количественное содержание лейкоцитов в циркулирующей крови здоровых людей
- •Анализ функциональной активности т- и в-лимфоцитов
- •Определение концентрации иммуноглобулинов четырех основных изотипов
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •5.2.Методы оценки иммунного ответа Цель занятия
- •Основные сведения
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Библиографический список
- •Состав наиболее часто используемых питательных сред
- •Для выращивания патогенных кокков
- •Для выращивания бактерий кишечной группы (одновременно являются дифференциально-диагностическими)
- •3. Для выращивания патогенных анаэробов
- •4. Для выращивания холерного вибриона
- •5. Для выделения возбудителя дифтерии
- •Для выявления сахаролитических свойств.
- •Среды для выявления протеолитических и гемолитических свойств.
Классификация питательных сред
При культивировании микробов готовят питательные среды такого состава, который наилучшим образом соответствует требованиям той или иной физиологической группы микробов или проявлению их определенных свойств в зависимости от поставленной цели. Поэтому для выделения и изучения свойств микроорганизмов применяется большое количество сред, различающихся по происхождению, консистенции, составу и назначению.
а) В зависимости от происхождения среды подразделяются на:
- натуральные, представляющие собой естественные субстраты (молоко, мясной бульон, сыворотка крови, настой почвы и сена, картофельный отвар, солодовое сусло и др.);
- полусинтетические, состоящие из различных отваров и настоев растительного или животного происхождения с добавлением неорганических солей, углеводов и азотистых веществ (мясо-пептонный бульон, мясо-пептонный агар);
- синтетические, состоящие из химически чистых веществ (солей, углеводов, аминокислот, витаминов и др.), взятых в определенных соотношениях.
б) По консистенции различают:
- жидкие питательные среды (бульоны), состоящие из воды и растворённых в ней веществ;
- плотные питательные среды, готовящиеся путем добавления к жидким среда уплотняющих веществ – желатины (10–15 %) или агар-агара (1–2 %);
- полужидкие питательные среды, содержащие уплотняющие вещества в меньшем количестве (0,2–0,3 % агар-агара).
Примечание: Агар-агар – вещество, получаемое из морских водорослей (в переводе с малайского языка – желе). Отвар агар-агара после остывания застывает в виде плотной желеобразной массы и служит для уплотнения питательных сред и продуктов питания.
в) По назначению питательные среды делятся на:
- универсальные, применяющиеся для культивирования большинства микроорганизмов, содержащие триптические гидролизаты мясных и рыбных продуктов, крови животных или казеина. Из них готовят жидкую среду – питательный бульон и плотную – питательный агар. Такие среды служат основой для приготовления сложных питательных сред – сахарных, кровяных и др.;
- элективные (от латинского electus – избираю) - предназначены для избирательного выделения и накопления микроорганизмов определенного вида (группы) из материалов, содержащих разнообразную постороннюю микрофлору. При их составлении исходят из биологических особенностей, которые отличают данные микроорганизмы от большинства других. Например, избирательный рост стафилококков наблюдается при повышенной концентрации хлорида натрия; холерного вибриона – в щелочной среде и т.д. К ним относятся среды с сывороткой или кровью для патогенных микроорганизмов; среды Кита-Тароцци и Вильсон-Блера для выращивания патогенных анаэробов;
- дифференциально-диагностические, применяющиеся для различения (дифференциации) отдельных видов или групп микроорганизмов. Принцип составления таких сред основан на различиях в биохимических свойствах вследствие неодинакового набора ферментов. Примером является среда Эндо, применяемая для выделения и определения бактерий кишечной группы. В ее состав входит лактоза, насыщенный спиртовой раствор фуксина (обесцвеченного перед добавлением в среду 10 % водным раствором сульфата натрия). Кишечная палочка при росте на такой среде ферментирует лактозу с образованием альдегидов. Вследствие этого бесцветная фуксин-сернистая кислота переходит в альдегид-сернистое соединение с образованием фуксина, который окрашивает колонии кишечной палочки в красный цвет с металлическим блеском.