1. Ложная агглютинация

Краевая агглютинация может наблюдаться при подсыхании капель, если определение ведется дольше положенного времени.

Холодовая агглютинация наступает, если определение проводится при t ниже 15⁰С (необходимая температура 15°-25°С). При добавлении подогретого физраствора агглютинация исчезает.

«Монетные столбики» - эритроциты могут склеиваться, если планшеты не покачивали, при добавлении физраствора столбики разрушаются.

Бактериальная агглютинация - скручивание эритроцитов вокруг

бактерий может наблюдаться при работе с недоброкачественными сыворотками (набор сывороток должен храниться в холодильнике не более 1 недели после вскрытия).

Панагглютинация объясняется неспецифической агглютинабельностью эритроцитов при наличии в организме некоторых патологических процессов.

2. Отсутствие агглютинации

1. Неправильное количественное соотношение между испытуемой кровью и стандартной сывороткой (необходимо 1:10);

2. Слабый титр стандартных сывороток (должен быть не ниже 1:32);

3. Гемолиз эритроцитов исследуемой крови;

4. Проведение методики при высокой температуре в помещении выше 25°С;

5. Оценка результатов ранее 5 минут;

6. Недостаточное освещение.

«ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУППОВОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ КРОВИ АВО ПЕРЕКРЕСТНЫМ СПОСОБОМ»

1. В лунки специальной пластины внести по 0,1 мл стандартных сывороток двух серий два ряда. В третий ряд внести по 0,01 мл стандартных эритроцитов О, А, В.

2. Большую каплю сыворотки обследуемого (0,1 мл) внести на каждую каплю стандартных эритроцитов, соотношение эритроцитов и сыворотки 1:10.

3. Со дна исследуемой пробирки пастеровской пипеткой отобрать эритроциты обследуемого. Внести эритроциты по 0,01 мл рядом с каплями стандартных сывороток, соотношение эритроцитов и сыворотки 1:10.

4. Чистой сухой палочкой смешать эритроциты с сывороткой

5. Оставить пластинку для наблюдения в течение 5 минут, периодически покачивая ее.

6. По истечении 3 минут в капли, где наблюдается агглютинация добавить по 1-2 капли физиологического раствора.

Учесть результат согласно схеме.

- агл. отсутствует – I

- агл. в 1 и 3 ячейках – II

- агл. в 1 и 2 ячейках – III

- агл. во всех ячейках - IV

«ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУПП КРОВИ СИСТЕМЫ АВО С МОНОКЛОНАЛЬНЫМИ АНТИТЕЛАМИ (ЦОЛИКЛОНАМИ) АНТИ-А И АНТИ-В»

Цоликлоны анти-А и анти-В предназначены для определения групп крови АВО взамен стандартных гемагглютинирующих сывороток. Определение групп крови может производиться: в нативной крови, стабилизированной с помощью консервантов, в крови, взятой из пальца, в крови, взятой без консерванта из вены.

Для каждого определения группы крови достаточно применять по одной серии реагентов цоликлон.

ХОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ

1. На пластинку нанести цоликлоны анти-А и анти-В по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями «анти-А» и «анти-В».

2. РЯДОМ с каплями антител нанести исследуемую кровь по одной маленькой капле (0,01мл), соотношение крови и сыворотки 1:10.

3. Кровь и антитела смешать стеклянной палочкой, которую необходимо промывать и досуха вытирать перед размешиванием каждой капли.

4. За ходом реакции наблюдать в течение 2,5 минут при легком покачивании

пластинки.

5. Учесть результат.

- агл. отсутствует – I

- агл. в ячейке с анти А – II

- агл. в ячейке с анти В – III

- агл. во всех ячейках - IV

ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ - наблюдается агглютинация (склеивание эритроцитов) ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ - капля остается равномерно окрашенной в красный цвет.

ВНИМАНИЕ! Контрольное исследование: 0,1 мл 0,9% NaCl + 0,01 мл исследуемой крови, при отсутствии агглютинации кровь принадлежит IV (АВо) группе. При наличии агглютинации необходимо повторить исследование с отмытыми эритроцитами данной крови.