«Методы обнаружения кровяного пигмента в моче»

Обнаружение кровяного пигмента в моче проводят по назначению врача, а также в случае, если моча имеет буроватый оттенок, а эритроцитов микроскопически не выявлено.

Унифицированы пробы с бензидином, амидопирином, азопирамом, тест-полоской.

Принцип реакций: гемоглобин, обладая пероксидазным свойством, отнимает водород от органических соединений ( амидопирина, азопирама, бензидина) и передает его перекиси водорода, в результате реакций образуются окрашенные вещества.

Требования при проведении реакций:

1. химичеки чистая посуда

2. свежеприготовленные реактивы

3. учет реакций на позднее 3 минут

4. использование уксусно-эфирной вытяжки из мочи

Приготовление уксусно-эфирной вытяжки:

К 10 –15 мл взболтанной нефильтрованной мочи 1-2мл ледяной уксусной кислоты и 4-5 мл диэтолового эфира, смесь закрывают резиновой пробкой, встряхивают. Через несколько минут эфирный слой используют в реакции.

ПРОБА С 5% АМИДОПИРИНОМ

Реактивы: 1. 5% спиртовой раствор амидопирина (0,5 г амидопирина растворяют в 10 мл спирта 96⁰) 2. 3% раствор перекиси водорода ( 1таблетку =1,5 г гидропирита растворяют в 50 мл воды)

Ход методики:

• в пробирку наливают 4-5 мл уксусно-эфирной вытяжки или 4-5 мл взболтанной нефильтрованной мочи;

• добавляют 10-15 капель 5% раствора амидопирина и 10-15 капель 3% раствора перекиси водорода;

• учитывают результат не позднее 2-3 минут.

Проба считается положительной при наличии серо-фиолетового окрашивания.

Бензидиновая проба

Реактивы: 1. уксуснокислый бензидин ( несколько кристаллов бензидина растворяют в 3-4 мл 50% раствора уксусной кислоты, раствор должен быть бесцветным, готовят перед употреблением

2. 3% раствор перекиси водорода

Перед исследованием необходимо проверить реактивы. Для этого смешать 1 каплю уксуснокислого бензидина и 1 каплю перекиси. Смесь должна быть бесцветной.

Ход методики:

- исследуемую мочу тщательно взболтать;

• профильтровать мочу через бумажный фильтр;

• разложить фильтр на воронке;

• капнуть в центр фильтра 3 капли 3% перекиси водорода и 3 капли уксуснокислого бензидина;

• учесть результат не позднее 2-3 минут.

При наличии кровяного пигмента появляется сине-зеленое окрашивание на фильтре.

: «Методы обнаружения билирубина в моче»

Пробы на билирубин проводят по назначению врача.

Унифицированы пробы: проба Розина, проба Гаррисона-Фуше, тест-полоска.

ПРОБА РОЗИНА

Реактивы: 1) 1% спиртовой раствор йода (1г кристаллического йода растворяют 96⁰ спиртом до 100 мл);

или 2) раствор Люголя (1г йода и 2г йодида калия растворяют в 300 мл дистиллированной воды).

Ход методики:

-в химическую пробирку налить 3-4 мл мочи;

-осторожно наслоить на мочу 2-3 мл любого из реактивов;

-учесть результат.

ЗАПОМНИТЕ: наличие зеленого кольца на границе двух жидкостей указывает на присутствие билирубина.

ПРОБА ГАРРИСОНА – ФУШЕ

Реактивы: 1) 15% раствор хлорида бария

2) реактив Фуше (25г трихлоруксусной кислоты разводят водой до 100 мл и прибавляют 1г хлорида железа).

Ход методики:

-в химическую пробирку налить 8 –10 мл мочи;

-к моче добавить 4 –5 мл хлорида бария;

-смесь отфильтровать в другую пробирку через бумажный фильтр;

-разложить использованный фильтр на воронке или на чашке Петри;

-в центр фильтра на осадок капнуть 1-2 капли реактива Фуше;

-учесть результат;

ЗАПОМНИТЕ: при наличии билирубина на фильтре появляются сине- зеленые пятна.