Практические работы

Работа 1. Исследование свойств суммарных ПД изолированного нерва

Цель работы: обнаружить основные свойства суммарных ПД изолированного нерва.

Для работы необходимо: установка для регистрации ПД (катодный осциллограф, усилитель, электростимулятор, раздражающие и отводные электроды), влажная камера, вазелиновое масло, изолированный седалищный нерв лягушки, концентрированный (9,5 %) раствор аммиака.

Ход работы. 1. Подготовительный этап.

Изолированный седалищный нерв лягушки помещают во влажную камеру и помещают на него раздражающие и отводные электроды на расстоянии 2—5 см один от другого. Умерщвляют 9,5 % раствором аммиака участок нерва, на котором расположен отводный электрод, более отдаленный относительно раздражающих электродов, чем обеспечивают униполярное отведения ПД. 3аливают нерв вазелиновым маслом.

Переводят стимулятор на работу в режиме „ритмическая серия”, а осциллограф – «ожидающая разверстка» с запуском от синхронизирующего импульса стимулятора. Включают стимулятор, осциллограф и усилитель в сеть.

Подавая на нерв ритмичную серию электрических импульсов (с частотой 10—30 имп/с), увеличивают их силу до появления на экране осциллографа ПД нерва достаточно большой амплитуды. Подбирают на осциллографе желаемую скорость развертывания, после чего прекращают стимуляцию нерва и возвращают ручку стимулятора, который регулирует амплитуду раздражительных импульсов, в положение 0.

2.0сновной этап.

Стимулировать нерв электрическими импульсами, постепенно увеличивая амплитуду (начиная от 0).

Отметить, как будет изменяться характер регистрируемой кривой суммарного ПД нерва в случае увеличения силы электрического раздражения.

Увеличить силу раздражения к тому моменту, когда амплитуда ПД, которая отводится, достигнув максимальной величины, прекратит изменяться, и измерить ее.

Прекратить стимуляцию нерва и подать на экран осциллографа калибровочное напряжение. Рассчитать предельную амплитуду суммарного ПД нерва, который отводится.

Рекомендации относительно оформления работы. В протоколе исследования изобразить кривые потенциалов действия, которые наблюдаются на экране осциллографа при разной силе электрического раздражения нерва. Указать значение предельной амплитуды суммарного ПД исследуемого нерва.

В выводах ответить на такие вопросы: какому закону подчиняется суммарный ПД нерва, в отличие от одиночного ПД нервного волокна; чем обусловлена зависимость амплитуды суммарного ПД нерва от силы его раздражения; чем объясняется не большое значение предельной амплитуды суммарного ПД исследуемого нерва?

Работа 2. Определение скорости проведения возбуждения нервом

Цель работы: определить скорость проведения возбуждения седалищным нервом лягушки.

Для работы необходимо: установка для регистрации ПД, катодный осциллограф, усилитель, электростимулятор, раздражающие и отводные электроды, влажная камера, вазелиновое масло, изолированный седалищный нерв лягушки.

Ход работы. 1. Подготовительный этап.

Изолированный седалищный нерв лягушки размещают во влажной камере. Помещают на него раздражающие и отводные электроды на расстоянии 2 см один от другого и заливают вазелиновым маслом.

Переводят приборы в нужный режим работы. Подбирают силу раздражения и скорость развертывания так, чтобы на экране осциллографа был четко видный артефакт раздражающего тока и ПД нерва, который отводится.

2.Основной этап.

Циркулем измерять на экране осциллографа расстояние от артефакта раздражающего тока к началу восходящей фазы ПД. 3ная скорость развертывания луча осциллографа, высчитать, какому интервалу времени отвечает это расстояние, то есть определить время (Т) распространения ПД от раздражающих электродов к отводным. Скорость проведения ПД нервом определяют по формуле: , где L — расстояние между раздражающими и отводными электродами, Т — время распространения возбуждения от раздражающих к первому отводному электроду.

Рекомендации относительно оформления результатов работы: указать значение скорости проведения возбуждения нервом лягушки.

В выводах ответить: от каких факторов зависит скорость проведения возбуждения нервными волокнами.

Работа 3. Исследование механизмов проведения возбуждения через нервно-мышечные синапсы

В нервно-мышечных синапсах медиатором является ацетилхолин, а молекулярными циторецепторами постсинаптической мембраны — Н-холинорецепторы.

Химические вещества, которые блокируют передачу импульсов возбуждения с двигательных нервов на мышечные волокна, называют миорелаксантами. Все миорелаксанты — это курареподобные вещества (диплацин, дитилин и тому подобное). Блокирующее действие миорелаксантов на нервно-мышечные синапсы обусловлено их способностью избирательно связываться с Н-холинорецепторами постсинаптической мембраны этих синапсов, в результате чего Н-холинорецепторы уже не могут связываться ацетилхолином.

Цель работы: обнаружить действую миорелаксантов на нервно-мышечные синапсы.

Для работы необходимо: электростимулятор, раздражающие электроды, инструменты, препаровальная дощечка, раствор Рингера, пипетка, шприц, 2 % раствор диплацина, лягушка.

Ход работы. Немного подняв кожу на спине лягушки, ввести ей подкожно 0,3—0,5 мл 2 % раствору диплацина. Через 7—10 мин. декапитировать лягушку и разрушить у нее спинной мозг.

Положив лягушку на препаровальную дощечку, обнажить на одной из задних конечностей седалищный нерв и камбаловидную мышцу.

Поместив раздражающие электроды на камбаловидную мышцу, а затем на седалищный нерв, провести прямое и непрямое раздражение мышцы электрическими импульсами разной амплитуды. Проследить за результатами прямого и непрямого раздражения мышцы.

Рекомендации относительно оформления результатов работы: указать в протоколе эффект прямого и непрямого раздражения исследуемой мышцы лягушки после введения в организм 2 % раствору диплацина.

В выводах ответить на такие вопросы: как действует диплацин на нервно-мышечные синапсы, чем обусловлено это действие.