
- •12. Ферменты в генной инжен (рестриктазы, лигазы), мех-м дей-я
- •13. Треб-я сист glp, gcp, gmp к организ-ии и реализ-ии боитех произ-в
- •14. Асептика в биотех произ-ве. Методы стерилиз. Проблемя сохр-я биол ценности.
- •16. Ферм как биол объекты. Класс. Хар-ка. Сферы практич прим-я
- •17. Инженер энзимология. Цели, задачи. Перспек разв-я. Иммобилиз биол объекты, их преим-ва перед неиммобилиз. Сферы примен иммобилиз кл и ферм.
- •18. Сорбенты, применяющиеся для иммобилизации ферментов и целых клеток.
- •22. Иммобилизация целых клеток микроорганизмов и растений. Методы иммобилизации. Преимущества. Ограничения. Примеры практического применения.
- •24, 25. Первич метаболиты, их продуценты
- •29. Микробиологический синтез аминокислот.
- •30. Витамины
- •33. Витамин с: химическая природа, биологическая роль, схема и условия биосинтеза.
- •34. Витамины группы d: химическая природа, биологическая роль. Схема биотехнологического получения эргостерина и витамина d2. Факторы, влияющие на выход витамина d2.
- •35. Вторичные метаболиты. Понятие. Характеристика. Фазы развития микроорганизмов-продуцентов в процессе биосинтеза вторичных метаболитов. Условия биосинтеза вторичных метаболитов.
- •2Ая фаза – медленного роста, когда увеличение биомассы клеток резко замедляется. Для вторичных метаболитов характерны такие фазы как тропофаза и идиофаза.
- •37. Продуценты антибиотиков: классификация, характеристика. Пути и направления создания высокоактивных продуцентов антибиотиков. Причины постоянного поиска новых продуцентов антибиотиков.
- •40. Инсулин
- •43.Биотехнологическое получение интерлейкинов
- •44. Иммунобиотехнология как раздел биотехнологии. Вакцины: понятие, характеристика, классификация, требования. Методы получения вакцин.
14. Асептика в биотех произ-ве. Методы стерилиз. Проблемя сохр-я биол ценности.
Стерилизация технологического воздуха.
Технологический воздух – это воздух, проходящий через ферментер. Через ферментер с объемом 50м³ (кубических метров за час) пропускается 30000 м³/час (кубических метров за час) воздуха. Обычный воздух содержит в 1 м³ (метр кубический)от 1 тысячи до 100 тысяч клеток микроорганизмов. Воздух стерилизуют только фильтрацией, пропуская его через систему фильтров, другие способы (УФ, термические) не подходят, так как нужно стерилизовать очень большие объемы воздуха.
Технологическая схема получения стерильного воздуха:
Воздух с улицы поступает на → Фильтр предварительной очистки от пыли и влаги, затем поступает на → Компрессор (происходит сжатие воздуха, при этом воздух нагревается), затем - на → Холодильник (для охлаждения воздуха, поступившего от компрессора, затем) → Воздух под давлением проходит через головной фильтр и подается на → Индивидуальный фильтр (у каждого ферментера).
Стерилизация и герметизация оборудования.
Ферментер и все трубопроводы стерилизуют насыщенным паром при 130° С 1 час. Для проверки эффективности стерилизации проводят пробную стерилизацию с использованием биологического теста.
4. Стерилизация питательных сред
Водопроводная вода содержит до 100 микробных клеток в 1 миллилитре. Компоненты питательной среды – источники углерода, азота, содержат в 1грамме муки от 10000 до 1 миллиардов клеток микроорганизмов. Питательную среду стерилизуют термическим нагреванием, но при этом могут инактивироваться термолабильные соединения, витамины и др. Поэтому для каждой среды имеются свои условия стерилизации. Стерилизация – процесс вероятностный.
Методы стерил: 1. Термич: воздуш (СЖШ), паровая (автоклав)
2. Хим: газовая (этилендиамин), р-ми (перекись)
3. Фильт-ем (глубин и мембр фил-ры)
4. Излучение: радиац, УФ
15. Методы выдел и очистки целев прод
О
бработка
кул кл для более эффект раздел-я культурал
ж-ти и биомассы
-кислот коангуляция (для антибиот)
-введение электролит
-термич коагул
Методы раздел-я биомасс и кул ж-ти:
-седимент-я
-флотация
-фильтр-е
-центрифугир-е
Разруш кл:
-физ – УЗ, механически, продавлив ч/з узкое отверст под давл, растирание, осмотич шок, замораживанием-оттаив
-хим – обрабока толуолом
-химико-фермент – лизоцим+ЭДТА, зимолаза улитки, ПАВ, антибиот, зараж-е бактериофагами
Отдел экстракта от разруш кл: центрифуг, фильт
Выдел целевого продукта: осажд, экстракция, адсорбция, хроматог, электрофорез, перекристаллиз
16. Ферм как биол объекты. Класс. Хар-ка. Сферы практич прим-я
Ферм – катализатор биол происх. Они высоко активны и специфичны. 1 ферм = 1 реак.
Класс ферм реак: 1. окис и восст. - оксиредуктазы 2. перенос функц групп - трансферазы 3. гидролиз - гидролазы 4. реак с участием двойн связей – лиазы 5. изомеризация - изомеразы 6. синтез слож соед с испол АТФ - лигазы
Ферм – прост (белок), слож (белок+небелк часть = апофермент+простетич группа)
Применение
Некоторые ферменты применяют в качестве лечебных препаратов:
Пепсин – при нарушении синтеза и секреции пепсина в желудке;
Трипсин, химотрипсин используются для лечения гнойных ран;
Фибринолизин, стрептокиназа – для предотвращения тромбообразования при пересадке органов и других операциях;
Гиалуронидаза обеспечивает рассасывание рубцов;
Аспарагиназа применяется при лечении некоторых злокачественных образований и т.д.
При отсутствии или недостатке тех или иных ферментов, связанных с мутацией гена, ответственного за синтез белка – фермента, возникают наследственные энзимопатии.