Лабораторная диагностика

Материал для диагностического исследования берут в зависимости от формы пневмококковой инфекции: при пневмонии – мокроту, при сепсисе – кровь, при гнойном заболевании – гной, при отите – отделяемое из слухового прохода. Материал важно забрать до начала этиотропного лечения. Для обнаружения антител исследуют сыворотку крови.

1. Экспресс-методы (обнаружение в патологическом материале, ориентировочны):

1.Микроскопическое исследование. Обнаруживаются грамположительные капсульные диплококки.

2.Определение К-АГ в реакции «набухания капсулы» (по Нейсфельду) – феномен увеличения размеров капсулы в присутствии поливалентной противокапсульной сыворотки. Последняя наносится на мазок исследуемого материала, учет производят с помощью фазовоконтрастного микроскопа.

3.Обнаружение АГ в сыворотке крови или ликворе (методы – РСК, латекс-агглютинация, встречный иммуноэлектрофорез).

2. Бактериологический метод. Материал (не позднее 1-2 часов с момента забора) засевают на 5%-й кровяной агар, культивируют в эксикаторе со свечой (источник СО₂) 24 часа при температуре 37°С; далее отбирают подозрительные колонии, дающие a-гемолиз, микроскопируют (окраска по Граму), отсевают в сывороточный бульон; определяют чистоту культуры (окраска по Граму).

3. Серологический метод. Определяют противокапсульные АТ и их динамику в сыворотке крови; используют также РСК и РПГА.

4. Биологический метод. Заражают белых мышей исследуемым материалом (чаще мокротой). Погибших мышей вскрывают, делают мазки-отпечатки, посев крови и органов на кровяной агар с последующей идентификацией возбудителя.

Профилактика и лечение.

- Антибиотикотерапия.

- За детьми, перенесшими повторные ангины, скарлатину устанавливают диспансерное наблюдение.

- Специфическая профилактика пневмококковых заболеваний проводится с помощью вакцин, приготовленных из высокоочищенных К-АГ тех серовариантов, которые чаще вызывают заболевания (1, 2, 3, 4, 6А, 7, 8, 9, 12, 14, 18С, 19, 25).

Нейссерии (менингококки и гонококки)

• Кокки, одиночные или, чаще в парах (соприкасающиеся стороны клеток при этом уплощены – кофейное зерно, боб).

• Грамотрицательны.

• Капсула,

• Фимбрии (пили).

• Спор, жгутиков нет.

• Аэробы.

• Оксидазо- и каталазо(+).

• Для отличия от условно-патогенных и сапрофитических нессерий надо учитывать, что N.meningitidis и N.gonorrhoeae не растут на МПА при 37º С и на сывороточной среде при 22º С и имеют слабую сахаролитическую активность.

Менингококки

Морфология.

- Грамотрицательные парные кокки бобовидной формы,

- Неподвижны,

- Капсула

- Пили.

- Спор нет.

Культуральные свойства.

- Очень требовательны к условиям культивирования.

- Растут на средах с нативным белком (сывороточный, шоколадный или кровяной агары) и повышенной влажностью; среда должна быть свежей и подогретой.

- Для культивирования необходимо наличие 5-10% углекислоты.

- Образуют прозрачные, бесцветные колонии.

Биохимические свойства. Слабая активность.

Антигены:

- группоспецифические АГ – гликопротеиды;

- родовые АГ – белки, полисахариды;

- видовые АГ белковой природы.

По К-АГ и полисахаридным АГ все менингококки подразделены на 13серогрупп. Наиболее вирулентными являются менингококки из группы А, В, С, Х, W135.

По белковому АГ наружной мембраны клеточной стенки они подразделяются на серовары (20).

Факторы патогенности и вирулентности:

– эндотоксин – липополисахарид клеточной стенки, оказывает пирогенный и сенсибилизирующий эффект;

– капсула – защищает от фагоцитов и антител;

– пили, обеспечивающие адгезию возбудителя к эпителию слизистой оболочки носоглотки и мозговых оболочек;

– IgА-протеазы – разрушают секреторный IgА в области шарнирной части, подавляют местный иммунитет;

– гиалуронидаза и нейраминидаза – факторы инвазии;

– факторы, обеспечивающие персистенцию в фагоцитах.

Резистентность. Малоустойчивы во внешней среде..

Характеристика заболевания

Источник инфекции: больные и бактерионосители.

Путь передачи – воздушно-капельный, в меньшей степени контактный, входные ворота – носоглотка.

Патогенез. Менингококки адсорбируются на эпителии, вызывают вначале местный процесс в виде воспаления задней стенки глотки. В дальнейшем возбудитель проникает в кровь, частично гибнет под действием бактерицидных факторов крови, высвобождается эндотоксин, который наряду с другими факторами патогенности вызывает клинические проявления, возможен эндотоксический шок.

Клинические формы:

Менингококковый назофарингит сходен с обычным катаральным воспалением ВДП.

Менингит – гнойное поражение мягких мозговых оболочек. Характерно повышение температуры, головная боль, рвота, менингеальный синдром, поражение ЧМН. Летальность до 3%, особенно при молниеносных формах с выраженным эндотоксическим шоком. Все крупные вспышки были вызваны менингококками серогруппы А и С. После создания эффективных вакцин наибольшую роль играют менингококки серогруппы В.

Менингококцемия (сепсис) – лихорадка, озноб, головная боль, обильная сыпь за счет поражения сосудистой стенки поверхностных сосудов в виде «синеватых паучков», поражаются надпочечники, нарушается свертывающая система крови.

Иммунитет после заболеваний стойкий, гуморальный, осуществляется комплементсвязывающими антителами за счет активации комплемента по классическому пути.

Лабораторная диагностика

Материал: ликвор, кровь, слизь из носоглотки при любой форме заболевания. Материал для исследования берут до начала лечения антибиотиками и предохраняют его от неблагоприятных факторов, особенно колебаний температуры. Ликвор в норме прозрачный и при пункции вытекает каплями, при менингите он мутный и вытекает струей под давлением.

1. Микроскопический метод. Выявляют грамотрицательные парные кокки внутри фагоцитов и вне их.

2. Серологические мотоды. Для выявления АГ в ликворе ставят реакцию преципитации, РПГА с антительным эритроцитарным диагностикумом, а также РИФ.

3. Бактериологический метод. Делают посев на кровяной, сывороточный или шоколадный агар, инкубируют при температуре 37⁰С и доступе СО2 в течение 24 часов, идентифицируют культуру по культуральным, морфологическим и биохимическим свойствам. Дополнительно в реакции агглютинации определяют серогруппу, а в реакции преципитации серовар.

Профилактика: выявление и санация носителей, изоляция и лечение больных. По эпидпоказаниям вводят химическую вакцину из высокоочищенных полисахаридных фракций менингококков группы А, С, V, W135. Химиопрофилактика – рифампицин.

Лечение. Антибиотикотерапия и витамины.