Количественная обработка результатов анализа

Для количественного определения необходимо выбрать метод градуировки (внешнего стандарта (абсолютной градуировки), внутреннего стандарта, метод добавок) и определить, какую величину отклика детектора  высоту пика или площадь пика  будут использовать. Затем анализируют стандартные растворы с известными концентрациями веществ и для каждого компонента строят градуировочную зависимость отклика детектора от концентрации вещества, после чего анализируют пробу неизвестного состава и по градуировочному графику находят концентрацию определяемых веществ.

Основным методом градуировки является метод внешнего стандарта (абсолютной градуировки), для которого необходимо иметь ГСО или химически чистые стандарты всех определяемых компонентов. Для одноточечной градуировки компонента используется один градуировочный раствор, зависимость носит строго линейный характер и, как правило, выходит из начала координат. Для построения многоточечной градуировки анализируют несколько подобранных по концентрациям градуировочных растворов, после чего с помощью метода наименьших квадратов рассчитывают коэффициенты прямой, наилучшим образом описывающей экспериментальные данные.

Современные программные комплексы позволяют собирать и обрабатывать электрофоретические данные, хранить их, а также формировать и выдавать отчеты. Для систем КЭ «Капель» рекомендуется программа «МультиХром®». Приборы «Капель» модификации «М» снабжаются программой «Эльфоран®», которая позволяет также управлять самой системой капиллярного электрофореза.

Объекты для анализа методом кэ. Подготовка пробы

Первые аналитические приложения КЭ были связаны с разделением заряженных компонентов: наиболее подходящими оказались неорганические катионы и анионы, а также карбоновые кислоты. В биотехнологии КЭ используют для анализа макромолекул: белков, углеводов, нуклеиновых кислот. В фармации оценка чистоты лекарственных препаратов и хиральные разделения до сегодняшнего дня в мире на 90 % выполняются различными вариантами КЭ.

Первым этапом анализа является отбор и подготовка пробы. Отобранная проба должна быть представительной, а процедура отбора пробы  легко воспроизводимой.

Схема анализа пробы, разбавленной буфером с минимальной электропроводностью при известном ионном составе включает этапы:

а) для анализа катионов используют 25мМ фосфатный буфер (рН 2,5);

б) для анализа анионов используют 25мМ боратный буфер (рН 9,3);

в) для анализа нейтральных соединений используют 25мМ боратный буфер (рН 9,3) с 25мМ додецилсульфата натрия.

При наложении пиков проводят оптимизацию разделения.

При отсутствии пиков из-за слишком низкой концентрации компонентов выбирают более чувствительный детектор, концентрируют пробу или используют электрокинетический ввод пробы.

На этапе подготовки пробы к анализу проводят удаление мешающих веществ, выделение и концентрирование определяемых соединений, их превращение в более удобные аналитические формы (при необходимости). Так, КЗЭ с косвенным УФ-детектированием позволяет анализировать неорганические анионы в водных объектах на уровне 0,1 мг/л. Подготовка образца питьевой, природной или сточной воды к анализу заключается в фильтровании пробы через мембранный фильтр (диаметр пор 0,2 мкм) и дегазировании фильтрата путем центрифугирования. Для КЭ характерны высокая скорость анализа и малый расход реактивов. Промежуточные операции пробоподготовки должны быть унифицированными и максимально простыми.