Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования
Пермский государственный национальный исследовательский университет
Биологический факультет
Кафедра физиологии растений
и микроорганизмов
ОТЧЕТ
По лабораторной работе
«Содержание аскорбиновой кислоты у гороха при воздействии свинца»
Группы БИО-3-12НМ
биологического факультета
направление – биология
Научный руководитель:
Кайгородов Р. В.
Пермь, 2012
Оглавление
Введение………………………………………………….…………………………………..3
Глава 1. Аскорбиновая кислота как антиоксидант…………………………………………………………………………..……..4
Глава 2. Принципы высокоэффективной жидкостной хроматографии ………………………………………………………….………………………………...……5
Глава 3. Материалы и методы ……….……………………………………………………..8
Глава 4. Результаты……………………………………………………….………………..10
Выводы…………………………………………………………………………………...…11
Список литературы……………………………………………………………………..…12
Введение
Название лабораторного занятия «Содержание аскорбиновой кислоты у гороха при воздействии свинца».
Лабораторное занятие проходило на кафедре физиологии растений и микроорганизмов. Цель лабораторной работы: измерение и анализ содержания аскорбиновой кислоты в горохе под действием тяжелого металла – свинца.
Для достижения цели были поставлены следующие задачи: изучить основные принципы работы ВЭЖХ; ознакомиться с устройством прибора Ultimate 3000; провести подготовку объектов исследования (опытных образцов гороха) к анализу; получить и обработать результаты измерений.
Объектом данной работы являются водные вытяжки гороха. Определялось содержание витамина C.
Глава 1. Аскорбиновая кислота как антиоксидант
Повреждающему эффекту свободных радикалов и активных форм кислорода противодействует окислительно-восстановительная, или антиоксидантная, система клеток. Антиоксиданты, составляющие основу этой системы, представляют собой соединения, которые способны тормозить, уменьшать интенсивность свободнорадикального окисления, нейтрализовать свободные радикалы путем обмена своего атома водорода (в большинстве случаев) на кислород свободных радикалов. В выведении свободных радикалов и радикальных форм антиоксидантов главную роль играют системы естественной детоксикации. Защита от повреждающего действия АФК, свободных радикалов осуществляется на всех уровнях организации: от клеточных мембран до организма в целом.
Антиоксидантная система тканей представлена:
1) ферментными антиоксидантами: каталазой, пероксидазами,
супероксиддисмутазой, глутатионредуктазой;
2) низкомолекулярными компонентами: аскорбиновой кислотой,
низкомолекулярными SDH соединениями, флавоноидами, витаминами
А, Е, К, убихиноном;
3) макромолекулярными неферментативными компонентами: белкомD
переносчиком железа – трансферрином и др. (Кайгородов, 2010).
Рассмотрим подробнее такой низкомолекулярный компонент системы антиоксидантной защиты растений, как аскорбиновая кислота.
L-Аскорбиновая кислота (аскорбат, витамин С) – необходимое вещество, которое находится в большом количестве в растительных тканях и играет очень важную роль. Она оказывает существенное влияние на некоторые физиологические процессы растений, включая рост, дифференциацию тканей и органов и метаболизм.
Функция аскорбата – восстановление многих свободных радикалов и минимизация разрушений окислительного стресса.
Ее синтез происходит в цитозоле из D-глюкозы в несколько стадий. Сначала происходит окисление 1С атома глюкозы, затем – формирование двойной связи между 2 и 3 атомами С. Как антиоксидант аскорбат реагирует с супероксидом кислорода, перекисью водорода и радикалом токоферола, при этом окисляясь до монодегидроаскорбиновой кислоты (МДГА) или до дегидроаскорбиновой кислоты (ДГА). Окисленные формы превращаются в аскорбат с помощью редуктаз МДГА и ДГА соответственно.
Аскорбиновая кислота может прямо (без апофермента) и в качестве кофактора аскорбатоксидазы инактивировать свободные радикалы, выполняя сходную роль с супероксиддисмутазой,а также косвенно принимать участие в детоксикации, восстанавливая токоферол.
Витамин С найден в хлоропластах, цитозоле, вакуолях и внеклеточных компартментах клетки. В клеточной стенке содержится аскорбатоксидаза, катализирующая реакцию с синглетным кислородом (Растения и стресс, 2008).