Характеристика культуральных свойств различных биоваров Corynebacterium diphtheriae на кровяном теллуритовом агаре

ПРИЗНАК	Биовар gravis	Биовар mitis	Биовар intermedius
Цвет колоний	аспидно-черные	черные	серо-черные
Размер колоний	1 - 1,5 мм	0,5 - 1,5 мм	0,5 - 1 мм
Поверхность колоний	радиально исчерченная, с приподнятым центром	выпуклая, гладкая	конусообразная, зернистая
Край колоний	фестончатый	ровный	неровный

Характеристика биохимической активности различных коринебактерий

вид	расщеп­ление цистина	Расщеп­ление крахмала	Расщеп­ление глюкозы	Расщеп­ление мальто­зы	Расщеп­ление сахарозы	Расщеп­ление мочеви­ны
С diphtheriae gravis	+	+	+	+	-	-
С.diphtheriae mitis	+	-	-*-	+	-	-
С.diphtheriae intermedius	+	-	+	+	-	-
С pseudodiphtheriticum	-	-	-	-	-	+
С. xerosis	-	-	+	+	+	-

3. Серологический метод.

Реакция пассивной гемаггютинации(РПГА), иммуноферментная реакция ( ИФА) с целью определения антимикробных антител (диагностическое значение имеет на­растание титра антител в динамике)

4. Молекулярно-генетический метод ПИР Определение tox+гена в ДНК

С целью определения наличия и напряженности антитоксического иммунитета (антитоксических антител) применяется токсическая проба Шика (внутрикожное вве­дение 1/40 Dim токсина в 0,2 мл) при наличии иммунитета проба отрицательная

Лечение и профилактика

Этиотропная терапия антибиотики (макролиды, цефалоспорины) Экстренная профилактика - антитоксическая противодифтерийная лошадиная сыворотка

Плановая профилактика проводится дифтерийным анатоксином в составе вакцин АКДС, АДС, АДС-М, Тетракок, Инфанрикс.

микобактерии (туберкулез)

Туберкулез - хроническое, антропозоонозное инфекционное заболевание, харак­теризующееся воспалительными и деструктивными изменениями в тканях и органах с формированием специфических очагов продуктивного воспаления (каверны), тен­денцией к генерализации и септическому течению, выраженной интоксикацией и ис­тощени ем организма больного.

Возбудители относятся к семейству Mycobacteriaceae, роду Mycobacterium

Виды, патогенные для человека: М. tuberculosis, М bovis, М atricanum, М tuberculosis microti, М. avium, М kansasii

М tuberculosis - грамположительные, неподвижные палочковидные бактерии, спор не образуют; имеют микрокапсулу; кислотоустойчивы (обусловлено высоким содержанием липидов и миколовых кислот в клеточной стенке)

Эпидемиология

Источник инфекции: больной человек (с открытой формой туберкулеза), больное животное

Пути передачи аэрогенный (воздушно-капельный, воздушно-пылевой), алимен­тарный, контактный

Патогенез

Патогенетические факторы: корд-фактор (липиды поверхностной стенки), жир­ные кислоты, губеркулопротеины. Действие данных факторов на клетки вызывают нарушение метаболизма с мембраноповреждающим эффектом. Эти изменения но­сят при туберкулезе системный характер

В месте входных ворот инфекции формируется первичный аффект. В динамике по ходу регионарных лимфатических путей и узлов формируется первичный комплекс, характеризующийся развитием гранулем в виде бугорков, - клеточная реакция ГЗТ (отсюда бугорчатка, или туберкулез). Наиболее часто первичный очаг формируется в легких (очаг Гона) В большинстве случаев первичные очаги заживают с полной дегра­дацией содержимого, его кальцификацией и фиброзом паренхимы.

При снижении иммунитета возможна активизация очагов (образование полостей - кавернозный туберкулез) и генерализация инфекции бронхо-, лимфо- и гематогенно, с формированием мелких очагов продуктивного воспаления - гранулем во внут­ренних органах (милиарный туберкулез).

Клиника.

Клинические проявления инфекции зависят от локализации очагов поражения (легкие, костная ткань, почки). С учетом наиболее частой легочной формой туберку­леза (80-85% случаев заболевания) характерными симптомами являются: кашель, длительный субфебрилитет, потливость в ночное время, слабость, повышенная утом­ляемость, снижение аппетита, потеря массы тела, выделение мокроты, кровохарка­нье, боли в груди, одышка.

Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал зависит от клинических проявлений инфекции и локали­зации процесса (мокрота, промывные воды бронхов, экссудаты и прочее).

1 .Микроскопический метод.

Применяется прямая микроскопия мазков из исследуемого материала и микро­скопия мазков осадка, полученного после специальной обработки и центрифугиро­вания исследуемого материала: иммерсионная микроскопия с применением окраски по Цилю-Нильсену (выявление кислотоустойчивых микобактерий в виде красных па­лочек), люминесцентная микроскопия.

Ускоренный метод микрокультур Прайса: накопление микобактерий на поверх­ности предметного стекла, погруженного в жидкую питательную среду в течение 3- 4 дней с последующей окраской по методу Циля-Нильсена и микроскопией (для М. tuberculosis типично расположение палочек в виде тесно сплетенных жгутов или кос).

М. tuberculosis - медленнорастущие микобактерии (видимый рост на питательных средах через 7 дней и более), требовательны к питательным средам.

Для выделения чистой культуры микобактерий используются плотные среды Левенштейна Йенсена, Финна (рост микробов в виде R формы колоний) Для иденти­фикации культур используются биохимические гесты, а частности - ниациновый тест, выявляющий способность М. tuberculosis, в отличие or других видов микобактерий, продуцировать никотиновую кислоту.

Применение современной автоматизированной системы ВАСТЕС для выращи­вания и идентификации микобактерий позволяет существенно сократить сроки диа­гностики

2. Биологический метоп.

Воспроизведение инфекции на морских свинках (развитие генерализованной ин­фекции при заражении М. tuberculosis)

3. Аллергический метод (туберкулинодиагностика)

Выявление гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ). Внутрикожная проба Манту с туберкулином (очищенный фильтрат убитых нагреванием культур М tuberculosis и М. bovis) применяется с целью выявления первичного инфицирования, а также для определения эффективности вакцинации и сроков ревакцинации;

Результат пробы оценивается по образованию и размерам инфильтрата

4. Серологический метод диагностики большой значимости не имеет.

Молекулярно-генетический метод ПЦР (амплификация специфического участка ДНК возбудителя) позволяет проводить идентификацию микобактерий за 5-6 часов и обладает высокой специфичностью и чувствительностью

Лечение и профилактика

Специфическим этиотропным лечением туберкулеза является химиотерапия с использованием противотуберкулезных препаратов:

1 группа - основные или препараты первого ряда (изониазид, рифампицин, стрептомицин, пиразинамид, этамбутол)

2 группа - резервные, или препараты второго ряда (этионамид, циклосерин, канамицин, хинолоны и фторхинолоны, парааминосалициловая кислота).

Специфическая профилактика: вакцинация и ревакцинация вакциной БЦЖ (BCG) - живая, лиофильно высушенная культура апатогенного штамма М.bovis.

кандиды (кандидоз слизистых)

возбудители дерматомикозов

Дерматомикозы.

Поражение: эпидермис, кожа, волосы, ногти. Регистрируется повсеместно. Ин­фицирующие агенты споры, фрагменты гиф, конидии. Основное условие заражения мацерация кожи. Зоофильные дерматофиты Источник больное животное Возбудители: Microsporum canis (кошки, собаки). Tichophyton verrucosum (крупный рога­тый скот)

Антропофильные дерматофиты Источник - больной человек Возбудители Epidermophyton floccosum. Trichophyton rubrum. Microsporum audoirui, Trichophyton schonleinn.

Клинические проявления на коже появляются эритемы, папулы, трещины, оча­ги шелушения, зуд

Локализация на различных учасгках кожи рук и ног. Проявление дерматомикоза волосистой части головы это участки облысения, шелушения, эритема, ломкость волос. На волосах можно наблюдать хропья, бляшки, Зоофильные дерматомикозы волосистой части головы могут проявляться образованием воспалительных инфиль трагов, приводящих с облысению Может наблюдаться даже дерматомикоз усов и бороды. Возбудитель Trichophyton schonleinn - фавус, или парша, оставляет стойкое облысение.

Паховый дерматомикоз - локализация паховые области, внутренние поверхности бедер Возбудители Trichophyton rubrum, Epidermophyton floccosum.

Эпидермофития стоп - поражена область подошв, кожа межпальцевых промежут­ков ног. Характерны мелкие пузырьки, зудящие трещины, очаги шелушения, эрозии Возбудители: Trichophyton mentagrophytes var rubrum.

Эпидермофития ногтей (онихомикозы). Ногти утолщены, расслаиваются Возбу­дители трихофитоны всех видов.

Лабораторная диагностика

Исследуемый материал кожные чешуки, ногти, волосы, отделяемое слизистых, кровь

Микроскопический метод

Неокрашенные препараты. Используют метод висячей или раздавленной капли без предварительного окрашивания исследуемого материала. Обработка 10% ед­ким калием (КОН) ногтей и волос для визуализации элементов гриба, в которых КОН разрушает кератин волоса.

Окрашенные препараты. Окраска по Граму, по Романовскому - Гимзе, по Леффлеру.

Микробиологический метод.

Посев на агар Сабуро - пептонный агар с мальтозой, дрожжевой агар, МПА, картофельно-декстрозный агар.

Микроскопическая и культуральная характеристика дерматофитов.

Epidermophyton floccosum - имеет один вид. Микроскопически: септированный мицелий, макроконидии как плод банана. Колонии слегка мучнистые, обратная сто­рона желтовато-коричневая.

Microsporum - включает 14 видов. Макроконидии толстостенные, есть микрокони­дии и хламидоспоры. Колонии гриба - пушистые, бархатистые, обратная сторона от светло-розового до коричневого цвета. Поражение волоса: споры мелкие, располо­жены беспорядочно, могут быть по типу эктотрикса и эндотрикса.

Trichophyton - включает 20 видов.Макроконидии толстостенные, многочислен­ные, микроконидии округлые, встречаются непостоянно. Мицелий септированный, ветвистый. Хламидоспоры округлые. Колонии гриба бархатисто-мучнистые, иногда кожистые. Обратная сторона колоний от светло-коричневого до красноватого цвета. Поражение волоса: споры крупные, заполняют волос ровными рядами по типу эк­тотрикса и эндотрикса.

Candida - включает более 10 видов. Микроскопия выявляет дрожжеподобные клетки и гифы. Хламидоспора - основной признак кандид. На питательных средах беловато-розовые колонии, напоминающие капли майонеза.

Рост грибковых колоний регистрируют через 5-10 дней при температуре 28 - 30°С. Идентификация с помощью РИФ Используют метод гибридизации нуклеиновых кислот.

Серологический метод

Иммуноферментная реакция ( ИФА), реакция связывания комплемента (РСК) с це­лью серодиагностики.

Аллергический - метод кожных проб.

В настоящее время чаще используют для изучения иммунной прослойки в популя­ции при эпидемиологических исследованиях.

вирус бешенства

Бешенство - это острое нейроинфекционное заболевание, со слюнно-невральным механизмом передачи инфекции. Вызывается вирусом относящимся к семейс­тву Рабдовирусов, содержит РНК. Зооноз. Абсолютно смертельное.

Эпидемиология

Животные (лисы, собаки, кошки и др.) выделяют вирус во внешнюю среду через слюнные железы во время укуса при нападении.

Патогенез

Вирус распространяется периневрально, до спинного и головного мозга, поражая нервные клетки, затем центробежно попадает в различные органы, в частности, в слюнные железы. Вирус поражает также клетки передних и задних рогов спинного мозга, ствола головного мозга, клетки аммонова рога, в которых посмертно обнару­живается в виде цитоплазматических включений - телец Бабеша- Негри.

Клиника.

Инкубационный период зависит от места укуса (в среднем 30-90 дней). Различают 3 стадии заболевания.

1 стадия. Продромальная (депрессии). Наблюдаются тянущие боли в месте укуса, зуд, общая рефлекторная возбудимость, чувство беспокойства и безысходной тоски.

2 стадия. Возбуждения. Учащение дыхания, сердечной деятель­ности. Появляются симптомы гидрофобии, развиваются болезненные судороги глот­ки, удушье.

3 стадия. Паралитическая. Развивается парез конечностей, паралич дыха­тельного и сердечно-сосудистого центра. Смерть наступает внезапно.

Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал только посмертно. Клетки аммонова рога, слюнных желез.

1. Вирусоскопический метод:

а) тельца Бабеша-Негри в гистологических срезах мозга и слюнных желез при световой микроскопии.

б) Иммунолюминесцентная микроскопия (ИЛ -прямая).

2. Вирусологический метод. Заражение культуры клеток. Идентификация: реак­ция связывания комплемента(РСК), радиоиммунный метод, тест бляшкообразования на культуре клеток.

3.Серологический метод. Определение антител в сыворотке иммунизированных людей и животных. Иммунолюминесцентный непрямой метод, РСК.

4. Аллергический и 5. биологический методы не используются.

Лечение и профилактика.

Экстренная пассивная профилактика. Пострадавшему вводят специфический антирабический lg или лошадиную сыворотку.

Активная профилактика. Введение антирабической вакцины, полученной из виру­са, выращенного на диплоидных клетках человека W 1 -38. Вакцину вводят в 1,3,7,14 и 28-е сутки.

Решение о проведении вакцинации пострадавшего зависит от природы контакта человека и животного, а также от возможности наблюдения за этим животным и его лабораторного обследования.

Вакцинацию назначают через сутки после введения гаммаглобулина. Историчес­ки использовали вакцины, полученные из нервной ткани взрослых или новорожден­ных млекопитающих (вакцина Ферми и Филипса). Вакцины, приготовленные из не­рвной ткани, обладают высокой реактогенностью в отличие от культуральных вакцин, которые не вызывают тяжелых нейропаралитических осложнений.

вирус полиомиелита

В состав рода Enterovirus входят следующие вирусы: полиомиелита (типы 1 - 3), неполиомиелитные - вирусы Коксаки А (16 серотипов), В (41 серотип, в том числе ECHO - 28 серотипов), С (11 серотипов), Д (2 серотипа) и более 20 некласифицированных энтеровирусов. Механизм распространения энтеровирусных инфекций: фекально-оральный. Характерен клинический полиморфизм: могут проявляться диареей, по­ражением респираторного тракта, пневмонией, менингитом, энцефалитом, миокар­дитом, перикардитом, параличами конечностей и другими явлениями. Большинство заражений все же заканчивается бессимптомным носительством и формированием иммунитета.

Наибольшее медицинское значение имеют вирусы полиомиелита, Коксаки, ECHO.

Полиомиелит - острое вирусное антропонозное заболевание с поражением ЦНС, главным образом нейронов продолговатого мозга и передних рогов спинного мозга. Возбудитель полиомиелита относится к семейству Picornaviridae, роду Enterovirus, виду Poliovirus.Мелкий РНК - содержащий вирус, не имеющий липидной оболочки.

Различают 3 серотипа внутри вида (1,2,3), вызывающих типоспецифический иммунитет, которые обладают выраженными антигенными различиями и вызывают типо-специфический иммунитет.

Эпидемиология.

Источники инфекции - больной человек, носитель. Вирус обладает высокой контагиозностью, преимущественно поражает детей, значительно реже - взрослых. Способен к эпидемическому распространению.

Пути передачи инфекции: фекально-оральный (в том числе водный), контактно-бытовой, воздушно-капельный.

Патогенез.

Входные ворота инфекции: слизистые оболочки носоглотки и желудочно-кишеч­ного тракта.

Вирусы размножаются в лимфоидных образованиях носоглотки и кишечника, проникают в кровь и распространяются по организму. Сравнительно редко, преодо­левая гематоэнцефалитический барьер, проникают в ЦНС, поражая двигательные нейроны передних рогов спинного мозга, ядра продолговатого мозга и другие струк­туры мозга.

В результате данных поражений возникают параличи мышц, преимущественно нижних конечностей.

Клиника.

Инкубационный период 2-35 суток (в среднем 7-14 суток). Различают следу­ющие клинические формы инфекции: бессимптомная; абортивная - протекающая с повышением температуры, симптомами ОРВИ и гастроэнтерита, на фоне которой может развиться менингеальная форма - серозный менингит; паралитическая фор­ма - неврологическая симптоматика, развитие парезов, параличей, мышечных атрофий.

Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал: фекалии, отделяемое носоглотки, ликвор, кровь.

1. метод микроскопический диагностической значимости не имеет.

2. метод вирусологический: чистую культуру вируса выделяют путем заражения первичных и перевиваемых культур ткани; индикация вируса по цитопатическому действию, цветной пробе; идентификация с помощью типоспецифических сыво­роток в реакции нейтрализации (РН), реакции связывания комплимента (РСК), ви­рус не обладает гемагглютинирующими свойствами, поэтому реакция торможения гемагглютинации(РТГА) в диагностике не применяется).

3. метод серологический - определение антител к вирусу полиомиелита в парных сыворотках крови в реакции нейтрализации (РН), реакции связывания комплимента (РСК).

4. Молекулярно-генетический метод ПЦР.

5. Биологический и 6. аллергический методы диагностики не применяются.

Лечение и специфическая профилактика.

Лечение включает симптоматическую и патогенетическую терапию.

Экстренная профилактика осуществляется путем введения нормального

человеческого иммуноглобулина.

Плановая профилактика проводится путем вакцинации детей, начиная с 3-месячного возраста и далее в соответствии с прививочным календарем.

Основной препарат - живая оральная полиомиелитная вакцина, содержащая аттенуированные штаммы Сэбина полиовирусов 1, 2, 3 типов.

Разрешены к применению инактивированные вакцины Имовакс Полио, Тетракок (дифтерийно-столбнячно-коклюшно-полиомиелитная вакцина).

хламидии

Хламидии - мелкие облигатные внутриклеточные грамотрицательные микроор­ганизмы, прокариоты, с характерным циклом развития, включающим две различные по морфологическим и биологическим свойствам формы существования: элемен­тарных и ретикулярных телец.

Не синтезируют энергетические субстраты АТФ и ГТФ, являются энергозависи­мыми паратрофами Размножаются только в живых клетках хозяина. Клинические проявления хламидийной инфекции разнообразны и не обладают патогномоничными критериями, вызывают поражения органов зрения, дыхания, мочеполовой, нервной, сердечно-сосудистой систем, суставов.

Классификация.

На основании уникального цикла их развития эти микроорганизмы согласно юридической комиссии Международной Ассоциации Микробиологических обществ от 1.01 1980 года были выделены в самостоятельный порядок,включающий одно семейство,содержащее два рода, обьединяющее 3 основных вида, дифференциро­ваны на 15сероваров.

Порядок: Chlamydialis

Семейство: Chlamydiaceae

Роды: Chlamydia Chlamydophila (вызывают заболевания у животных)

Виды:	trachomatis	pneumoniae	psittaci
Заболевания:	трахома, коньюнктивит-(серовар А,В,С), урогенитальный хламидиоз и пневмония новорожденных -(D-K), венерическая лимфогранулема (L1 .L2L3) (тропическая болезнь)	пневмония, бронхиты	орнитоз (пситтакоз) (8 сероваров)

Эпидемиология.

Источник Инфекции: больной человек, животное

Пути передачи половой, контактный, воздушно-капельный

Патогенез.

Элементарные тельца (ЭТ) - инфекционная внеклеточная форма (мелкие, сферические,полиморфные, метаболически малоактивные) адсорбируются на по­верхности чувствительных клеток -цилиндрического эпителия, стимулируя активный эндоцитоз. В результате вокруг ЭТ образуется фагоцитарная вакуоль. Хламидии пре­пятствуют слиянию фагосомы с лизосомой, способны подавлять процесс апоптоза клетки, что способствует их внутриклеточному выживанию и длительной персистенции. Внутри клетки из ЭТ развиваются ретикулярные (РТ) - более крупные, метаболи­чески активные, чувтвительные к антибиотикам, при делении образуют хламидийные включения.

В дальнейшем из РТ формируются ЭТ, выходящие из клетки путем экзоцитоза или лизиса клетки.

Клиника

Виды:	Вызываемые поражения:
С. trachomatis	Трахома, урогенитальный хламидиоз (уретрит, эпидидимит, простатит, цервицит, сальпингит), конъюнктивит, реактивный артрит, венерическая лимфогранулема
С pneumoniae	Респираторный хламидиоз (пневмонии, синуситы, бронхиты), сердечно-сосудистые заболевания (атеросклероз)
С psittaci	Орнитозы

Перенесенная инфекция не вызывает стойкого иммунитета, возможны реинфекции.

Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал: мокрота, отделяемое с пораженных слизистых, кровь.

1 Микроскопический метод

Обнаружение цитоплазматических включений хламидий в эпителиальных клет­ках, окрашиванием по Романовскому-Гимзе, реакция иммунофлюоресценции (РИФ) (прямая методика - сероиндикация).

2. Микробиологический метод не используют, они не растут на питательных сре­дах.

Выделение чистой культуры возбудителя осуществляют на живых обьектах зара­жением куриных эмбрионов, культуры клеток.

3. Серологический метод. Выявление антихламидийных антител в реакции иммунофлюоресценции(РИФ) (непрямой метод - серодиагностика), иммуноферментная реакция (ИФА), реакция связывания комплемента (РСК), реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации ( РИГА).

4 Аллергический метод используется в диагностике орнитоза.

5.Биологический метод не применяется.

6. Метод молекулярно-биологический ( ПЦР) выявляет хламидийный антиген в ис­следуемом материале.

Лечение. Профилактика.

Этиотропная терапия • антибиотики по схеме с учетом цикла развития хламидий (макролиды), фторхинолоны

Специфическая плановая и экстренная профилактика не разработана

микоплазмы

Микоплазмы - самые мелкие прокариоты, полиморфные, не имеют ригидную клеточную стенку; являются структурнозависимыми паразитами (используют стерины клетки хозяина). Все микоплазмы - условно-патогенные микроорганизмы, обитающие на поверхностях урогенитального и респираторного тракта. По частоте распространения микоплазмы обнаруживаются у 50% женщин с гинекологическими заболеваниями, их выделяют при атипичной пневмонии, при бесплодии и др.

Классификация.

Класс: Mollicutes

Семейство: Mycoplasmataceae

Роды: Mycoplasma(включает 10 видов) Ureaplasma(включает 5 видов)

Виды: М. pneumoniae U. urealyticum

М. hominis

М. genitalium

Эпидемиология.

Источник инфекции: больной человек, носитель.

Пути передачи: воздушно-капельный, половой

Патогенез.

Микоплазмы паразитируют на мембране клеток эукариот (мембранный парази­тизм), оказывают цитотоксическое действие токсинами, ферментами, продуктами метаболизма. При взаимодействии с лимфоцитами вызывают их структурные и фун­кциональные изменения, ингибируют их пролиферацию, препятствуют фагоцитозу макрофагами. В результате ухода от иммунного надзора хозяина обеспечивают дли­тельную персистенцию возбудителей. Развитие микоплазменной инфекции во мно­гом определяется иммунным статусом заболевшего.

Клиника.

Виды:	Вызываемые поражения:
М. pneumoniae	Респираторный микоплазмоз (назофарингит, трахеит, бронхит, пневмония)
М. hominis М. genitalium U. urealyticum	Урогенитальный микоплазмоз (уретрит, эпидидимит, простатит, цервицит, сальпингит), пиелонефрит

Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал зависит от клинических проявлений (локализации пора­жения).

1 Микроскопический метод - электронная микроскопия, иммунолюминесцентный метод (прямой) для выявления возбудителя в исследуемом материале.

2. Микробиологический метод: выделение чистой культуры возбудителя на специальных по составу средах (колонии микоплазм на плотных средах имеют вид яичницы-глазуньи) Индикация и идентификация микоплазм проводится с учетом биохимической активности и антигенных свойств (РИФ ИФА. РСК)

3. Серологический метод: определение антител и их титров в парных сыворотках крови ( ИФА, РСК, РИГА)

4 и 5 Аллергический и биологический методы не применяются.

Метод молекулярно-биологический ( ПЦР) выявляет антигены микоплазм

Лечение и профилактика.

Этиотропная терапия - использование антибиотиков (микоплазмы резистентны к препаратам, подавляющим синтез клеточной стенки).

Специфическая плановая и экстренная профилактика не разработана.

токсоплазмы

трихомонады.