18. Культивирование микробов на искусственных питательных средах. Свойства и состав искусственных питательных сред. Классификация искусственных питательных сред по назначению.

Питательной средой называют среды, содержащие различные соединения сложного или простого состава, которые применяются для размножения микроорганизмов в лабораторных или промышленных условиях.

Любая питательная среда должна отвечать следующим требованиям:

• содержать все необходимые для размножения определённых микробов вещества в легкоусвояемой форме (источники углерода, азота, кислорода, водорода, неорганические соединения, факторы роста),

• иметь оптимальные влажность, вязкость, pH,

• быть изотоничной и по возможности прозрачной.

По назначению выделяют искусственные питательные среды:

• Элективные (селективные) – на которых лучше растёт какой-то определённый микроорганизм (напр., висмут-сульфитный агар для рода Salmonella)

• Среды обогащения – стимулируют рост какого-то определённого микроорганизма, ингибируя рост других (напр., среда, содержащая селенит натрия, таурохолевокислый натрий и бриллиантовый зелёный, стимулирует рост родаSalmonella и ингибирует рост E. Coli)

• Дифференциально-диагностические - для изучения и идентификации отдельных групп, видов бактерий, биоваров (напр., среды Левина, Плоскирёва – для диагностики дизентерии, род Shigella, от других представителей кишечной группы)

• Консервирующие – для сохранения патогенных микроорганизмов живыми в клиническом материале при их пересылке.

19. Основные принципы выделения чистых культур микробов, культивируемых на искусственных питательных средах. Этапы выделения чистых культур этих микроорганизмов.

Чистой культурой называется популяция микроорганизмов одного вида, выращенная на питательной среде.

Методы получения чистых культур:

1.из колонии (изолированное скопление микроорганизмов одного вида, выросших на питательной среде в результате размножения одной или нескольких клеток) – механическое разобщение бактериальных клеток

• посев петлёй, штрихом по Коху

• посев шпателем, газоном по Дригалю

• посев осаждением по Коху

• посев разбрызгиванием

• посев перемешиванием в расплавленном и остуженном студне

2.путём подавления роста «лишних» микробов

• на избирательных средах

• после прогревания

• после обработки кислотой

• после антибиотиков

• использование фагов

• после проведения через живой организм

Этапы:

1.Исследование материала

забор, регистрация

ориентировочная микроскопия с окраской мазка по 9езофи

посев смеси бактерий на пластинчатый агар

2.Изучение колоний

изучение культуральных свойств (величина, форма, консистенция, поверхность, край, наличие пигмента, цвет, прозрачность)

микроскопия с окраской по 9езофи

посев колонии на скошенный агар.

3.Изучение чистой культуры

микроскопия с окраской по 9езофи – морфологически и тинкториально однородные клетки

идентификация

биохимическая – посев в «пёстрый» ряд

фагоидентификация

сероидентификация

Микробиологический метод включает в себя выделение чистой культуры и её идентификацию.