3. Бактериолиз. Реакция бактериолиза.

В первом случае осуществляют вариант бактериолиза in vitro. Для его постановки в стерильных условиях объединяют прогретую при 56°С в течение 30 мин исследуемую сыворотку (0,4 мл), комплемент морской свинки (0,1мл) и стандартную культуру бактерий определенного вида или штамма (0,1 мл суспензии с плотностью 250 млн кл/мл). Параллель­но ставят контроль, где вместо анализируемой сыворотки вносят нор­мальную (сыворотку здорового человека). После инкубирования при 37 °С в течение 2 часов осуществляют высев бактерий из опытной и кон­трольной пробирок на плотные питательные среды с целью определения количества клеток. Учет результатов проводят после инкубирования по­севов в течение 24-48 часов. При наличии в исследуемой сыворотке ан­тител к данным бактериям их количество будет меньшим в опыте, чем в контроле. Таким же методом возможно идентифицировать бактерии, ес­ли по каким-либо причинам реакция агглютинации не дает однозначного ответа. В этом случае в опытной пробирке должны быть смешаны иссле­дуемые бактерии и определенная антисыворотка.

Недостатком этого варианта является его длительность, поэтому существует вариант бактериолиза in vivo. В этом случае смесь испытуемой сыворотки и бактерий вводят внутрибрюшинно морской свинке и через 10, 30 и 60 минут отбирают перитонеальный экссудат, из которого делают фиксированный и окрашенный фуксином препарат и препарат для прижизненного исследования (раздавленная капля). Положительным результатом является обездвиживание подвижных бактерий, набухание бактериальных клеток и уменьшение их количества. Такая реакция носит название пассивный бактериолиз in vivo, поскольку в данном случае морская свинка играет только роль поставщика комплемента и термостата. Активный бактериолиз in vivo требует наличия иммунной по отношению к конкретному возбудителю морской свинки, в этом случае она еще будет играть роль поставщика антител. Естественно, что такой вариант применим только для идентификации бактерий. Контролями в пассивном варианте служит введение животному бактерий и нормальной сыворотки, в активном - введение бактерий неиммунной морской свинке.

БИЛЕТ 10

1. Тимус. Строение

Тимус представляет собой эпителиально-лимфоидный орган, расположенный в грудной клетке за грудиной в том месте, где к грудине, образуя своеобразную вилочку, присоединяются ключицы (отсюда второе название - вилочковая железа). Согласно представлениям классической анатомии и физиологии тимус является железой внутренней секреции, но его роль в функционировании именно иммунной системы в настоящее время признается более значимой. У человека это единый двустороннесимметричный орган, состоящий из двух долей в своей корковой (кортикальной) части и имеющий общую мозговую (медуллярную) часть. У мышей тимус полностью разделен перегородкой из соединительной ткани на две части. Каждая доля, в свою очередь, разделяется в кортикальной части на повторяющиеся дольки более тонкими прослойками соединительной ткани, по которым проходят кровеносные сосуды.

Масса тимуса максимальна у достигшего половой зрелости человека и составляет около 30 граммов, объем тимуса в этот же период - 25 см³. Ранее считалось, что с момента рождения и до полового созревания тимус постепенно увеличивается в размерах и усиливает свою функцию, а затем происходит так называемая инволюция тимуса, выражающаяся в постепенном замещении его эпителиальных тканей на жировую ткань. В последние годы XX века появилось мнение, что максимальная активность тимуса как органа иммунной системы проявляется в возрасте 1 года и инволюция начинается уже на втором году жизни. Условная скорость инволюции оценивается как утрата 3 % его первоначальной активности ежегодно и теоретически к 120 годам его функция должна полностью исчезать. Насколько верны подобные предположения, судить трудно, поскольку достоверных исследований иммунного статуса долгожителей, можно сказать, практически не имеется, однако четко показано, что у большинства людей в возрасте 50-60 лет начинает проявляться в той или иной степени иммунодефицит Т-клеточного характера. Это еще раз подтверждает обязательное участие тимуса в формировании основных субпопуляций Т-лимфоцитов - Т-хелперов и Т- киллеров.

Характеристика тимуса как эпителиально-лимфоидной системы выте­кает из наличия в каждой дольке особых эпителиальных клеток, которые ведут свое происхождение от особых выростов эктодермы и эндодермы, особым образом объединяющихся в ходе развития зародыша. Вторая же цитологическая составляющая тимуса поставляется в эмбрионе разви­вающейся печенью (именно она является кроветворным органом на ран­них стадиях развития), а после рождения - красным костным мозгом. Причем лимфоидная составляющая в уже сформировавшемся тимусе яв­ляется преобладающей в количественном отношении из-за чего, как счи­тают гистологи, собственно эпителиальные клетки уплощены и имеют узкие нитевидные отростки, между которыми располагаются созреваю­щие предшественники Т-клеток. Кроме этого, в тимусе присутствуют и макрофаги костномозгового происхождения, также условно относимые не к эпителиальной, а к лимфоидной составляющей.