- •Ядрышко.
- •1.1.1.Метод серебрения.
- •1.1.4. Электронная микроскопия.
- •1.1.5. Метод молекулярной гибридизации in situ.
- •1.1.6. Выделение ядрышек.
- •1.2. Физические и химические свойства ядрышка.
- •2. Ультраструктурное строение ядрышка.
- •2.1. Фибриллярный центр (фц).
- •2.2. Плотный фибриллярный компонент (пфк).
- •2.3. Гранулярный компонент.
- •2.4. Околоядрышковый хроматин (охр).
- •2.5. Матрикс ядрышка.
- •2.6.Ядрышковая вакуоль («nucleolar vacuole»).
- •3. Функции ядрышка. Связь структуры и функций.
- •3.4. Некоторая роль в биосинтезе srp.
- •3.6. Тельца Кахаля.
- •Связь структуры и функций.
- •Динамичность ядрышка.
- •4. Белки ядрышка.
- •4.1. Аминокислотный состав ядрышка.
- •4.2. Специфические ядрышковые белки.
- •5. Строение и функционирование генов рРнк.
- •Гены класса I. Экспрессия.
- •Процессинг рРнк.
- •Гены 5s-рРнк.
- •6. Классификация ядрышек.
- •6.1. Нуклеолонемные ядрышки.
- •6.2. Ретикулярные ядрышки.
- •6.3. Вакуализированные ядрышки.
- •6.4. Кольцевидные ядрышки.
- •6.5. Ядрышки типа кора-сердцевина.
- •6.6. Компактные ядрышки.
- •6.7. Сегрегированные ядрышки.
- •6.8. Плотные фибрилляторные ядрышки.
- •6.9. Свободные фц.
- •6.10. Промежуточные типы ядрышек.
- •6.10.1. Нуклеолонемно-вакуолизированные (нуклеолонемно-кольцевидные) ядрышки.
- •6.10.2. Псевдонуклеолонемные ядрышки.
- •7. Ядрышко и клеточный цикл.
- •8. Морфогенез ядрышка.
- •8.2. Морфогенез ядрышка вследствие частичной гепатэктомии мышей и крыс.
- •Ядерно-поровый комплекс.
- •Описанные ниже структурная организация япк и транспорт через япк (пункты 1,2,3,6) были взяты из обзора е.В. Кисилевой (Институт цитологии и генетики со ран, Новосибирск).
- •С труктурная организация.
- •2.Транспорт через ядерную пору.
- •3. Регуляция транспорта молекул через ядерную пору.
- •3.1. Первая система.
- •3.2. Вторая система.
- •3.3. Третья система.
- •4. Импорт.
- •4. 1. Рецепторы импорта ядерных белков (импортины).
- •4.2. Ядерные белки: импорт, nls-зависимый механизм.
- •4. 3. Ядерные белки: импорт, nls-независимые механизмы.
- •5. Экспорт.
- •6.Сборка ядерных пор in vitro происходит через интермедиаты.
- •Ядерно-белковый матрикс.
- •Препараты и микрофотографии.
- •1. Препараты.
- •1. Включение 3нт в клетки культуры спэв. Расчет пролиферативного пула.
- •2. Включение 3ну в клетки культуры спэв.
- •3. Ооциты рыб. Амплификация ядрышка.
3. Функции ядрышка. Связь структуры и функций.
3.1. Синтез и процессинг рибосомальной РНК.
Это основная функция ядрышка была открыта Касперссоном в30-ых годах XX века.
Внимание!!! О всех ниже перечисленных функциях можно говорить только, начиная со слова «предполагается…». Участие компонентов ядрышка во всех этих процессах со 100% точностью не доказано (в скобках даны ссылки на статьи авторов, занимающихся соответствующей проблемой).
3.2. Синтез низкомолекулярной или 4-7-РНК.
3.3. Модификация нуклеотидов некоторых мяРНК (Malatesta et al, 2000; Pederson, 2002).
Движение мяРНК часто встречается в клетках, вероятно, это необходимо для взросления мяРНК. мяРНК специфически обнаруживаются в ПФК.
3.4. Некоторая роль в биосинтезе srp.
3.5. Транспорт и/или деградация мРНК (Malatesta et al, 2000).
3.6. Тельца Кахаля.
Прежнее название телец Кахаля - coiled bodies (это название придумали электронные микроскописты). Тельца Кахаля были открыты в 1903г. испанским цитологом Рамон-и-Кахалем. В тельцах Кахаля располагаются домены, которые взаимодействуют с рядом белков, включенных в пре-РНК-процессинг, создание рибосом, пре-мРНК-сплайсинг. транскрипцию. В частности, было выявлено, что тельца Кахаля солокализуются с некоторыми ядрышковыми белками и факторами транскрипции РНК-полимеразы II. При этом тельца Кахаля не содержат ДНК и поэтому не могут быть сайтами транскрипции. Тельца Кахаля существуют как в клетках животных, так и в клетках растений. Тельца Кахаля локализуются по периферии ядрышка и – иногда - внутри него. Они могут разъединяться на 2 дочерних тельца или, наоборот, формировать более крупные тельца. Белок р80 – коилин (coilin) - является маркерным для телец Кахаля.
Связь структуры и функций.
Структурная организация ядрышка тесно связана с его функциональной активностью. Сопоставление структуры и функций ядрышек наиболее детально изучено на примере дифференцирующихся лимфоцитов крови и костного мозга человека, эритробластов млекопитающих и птиц, модели крипты-ворсинка. Данные о различной функциональной активности разных типов ядрышек (см. далее) позволяют выделить следующие группы ядрышек:
— высокоактивные (компактные, нуклеолонемные и ядрышки типа кора-сердцевина; все они характерны для недифференцированных клеток, активно делящихся и быстро растущих),
— умеренноактивные (ретикулярные, вакуолизированные и, может быть, псевдонуклеолонемные),
— малоактивные (кольцевидные ядрышки с центрально расположенным ФЦ и сегрегированные; характерны для клеток с явным признаками дифференцировки и при подавлении синтеза рРНК),
— неактивные (плотные фибриллярные ядрышки и свободные ФЦ).
Динамичность ядрышка.
Ядрышко – это динамичная структура. каждый морфологический тип ядрышек отражает уровни трех основных процессов, связанных с биогенезом рибосом: синтез пре-рРНК, процессинг и миграцию РНП-частиц в нуклеоплазму. При обычной функциональной нагрузке, соответствующей потребностям определенной популяции клеток, скорости протекания этих процессов постоянны, поэтому структура ядрышка остается практически неизменной.