- •Ядрышко.
- •1.1.1.Метод серебрения.
- •1.1.4. Электронная микроскопия.
- •1.1.5. Метод молекулярной гибридизации in situ.
- •1.1.6. Выделение ядрышек.
- •1.2. Физические и химические свойства ядрышка.
- •2. Ультраструктурное строение ядрышка.
- •2.1. Фибриллярный центр (фц).
- •2.2. Плотный фибриллярный компонент (пфк).
- •2.3. Гранулярный компонент.
- •2.4. Околоядрышковый хроматин (охр).
- •2.5. Матрикс ядрышка.
- •2.6.Ядрышковая вакуоль («nucleolar vacuole»).
- •3. Функции ядрышка. Связь структуры и функций.
- •3.4. Некоторая роль в биосинтезе srp.
- •3.6. Тельца Кахаля.
- •Связь структуры и функций.
- •Динамичность ядрышка.
- •4. Белки ядрышка.
- •4.1. Аминокислотный состав ядрышка.
- •4.2. Специфические ядрышковые белки.
- •5. Строение и функционирование генов рРнк.
- •Гены класса I. Экспрессия.
- •Процессинг рРнк.
- •Гены 5s-рРнк.
- •6. Классификация ядрышек.
- •6.1. Нуклеолонемные ядрышки.
- •6.2. Ретикулярные ядрышки.
- •6.3. Вакуализированные ядрышки.
- •6.4. Кольцевидные ядрышки.
- •6.5. Ядрышки типа кора-сердцевина.
- •6.6. Компактные ядрышки.
- •6.7. Сегрегированные ядрышки.
- •6.8. Плотные фибрилляторные ядрышки.
- •6.9. Свободные фц.
- •6.10. Промежуточные типы ядрышек.
- •6.10.1. Нуклеолонемно-вакуолизированные (нуклеолонемно-кольцевидные) ядрышки.
- •6.10.2. Псевдонуклеолонемные ядрышки.
- •7. Ядрышко и клеточный цикл.
- •8. Морфогенез ядрышка.
- •8.2. Морфогенез ядрышка вследствие частичной гепатэктомии мышей и крыс.
- •Ядерно-поровый комплекс.
- •Описанные ниже структурная организация япк и транспорт через япк (пункты 1,2,3,6) были взяты из обзора е.В. Кисилевой (Институт цитологии и генетики со ран, Новосибирск).
- •С труктурная организация.
- •2.Транспорт через ядерную пору.
- •3. Регуляция транспорта молекул через ядерную пору.
- •3.1. Первая система.
- •3.2. Вторая система.
- •3.3. Третья система.
- •4. Импорт.
- •4. 1. Рецепторы импорта ядерных белков (импортины).
- •4.2. Ядерные белки: импорт, nls-зависимый механизм.
- •4. 3. Ядерные белки: импорт, nls-независимые механизмы.
- •5. Экспорт.
- •6.Сборка ядерных пор in vitro происходит через интермедиаты.
- •Ядерно-белковый матрикс.
- •Препараты и микрофотографии.
- •1. Препараты.
- •1. Включение 3нт в клетки культуры спэв. Расчет пролиферативного пула.
- •2. Включение 3ну в клетки культуры спэв.
- •3. Ооциты рыб. Амплификация ядрышка.
2. Ультраструктурное строение ядрышка.
2.1. Фибриллярный центр (фц).
Впервые этот термин введен в 1969г. Рехером. ФЦ представляют собой обязательный структурный компонент интерфазного ядрышка. ФЦ – это участок скопления фибрилл с низкой электронной плотностью, в составе которого находится ДНК, ответственная за синтез рРНК. Толщина основного класса фибрилл в среднем составляет 6-8нм. Зоны ФЦ состоят из тонких хроматиновых фибрилл, значительно обедненных гистоном Н1. ФЦ как и ядрышковые организаторы (ЯОР) окрашиваются солями серебра (это зависит от наличия особых ядрышковых кислых белков) и содержат РНК-полимеразу-I, что подтверждает соответствие ФЦ активным ЯОР. Однако, скорее всего, ФЦ входят в состав ЯОР вместе с внутри- и околоядрышковым хроматином.
ФЦ представляют собой сферические, реже цилиндрические образования. Объем ФЦ может сильно меняться. Число ФЦ также изменчиво. При активации синтеза рРНК наблюдается такое изменение числа ФЦ и их размеров, которое может говорить о какой-то фрагментации исходных ФЦ в относительно малоактивных ядрышках. Как правило, ФЦ разбросаны по всему ядрышку без какой-либо закономерности.
Существует несколько моделей, объясняющих пространственную организацию ФЦ и взаимоотношения различных компонентов ядрышка. По одной из них, предложенной Жоссеном и Лепуаном (Goessens, Lepoint, 1974-84), «елочка» располагается на поверхности ФЦ, где и происходит синтез рРНК. Тяжи рДНК локализованы также внутри ФЦ, но синтез РНК на них не идет: то есть в ФЦ расположены неактивные рибосомные гены и, возможно, спейсерные участки.
Согласно Мирр и Сталь (Mirre, Stahl, 1978-81) деконденсированная рДНК протянута между ФЦ, соединяя их в единую систему. При этом та часть фибрилл, которая располагается внутри ФЦ, находится в конденсированном состоянии, другая же, лежащая на поверхности ФЦ, - транскрибирует. По мнению авторов, для синтеза рРНК не обязательно, чтобы рДНК располагалось на поверхности ФЦ. Подобная пространственная организация характерна для нуклеолонемных ядрышек. Таким образом, не исключено, что ФЦ в данном случае выполняет структурную функцию, поддерживая пространственную организацию деконденсированной рДНК.
По третьей версии рДНК локализована и транскрибирует внутри ФЦ.
В активных ядрышках ФЦ не всегда хорошо выявляются, т.к. большое число мелких ФЦ распределено по ядрышку без какой-либо закономерности. Напротив, в ядрышках дифференцированных клеток, клеток с искусственно подавленной транскрипцией, а также некоторых опухолевых клеток ФЦ имеют крупные размеры и часто центральное расположение. При естественной или искусственной задержке транскрипции рРНК параллельно с упрощением композиции ядрышка происходит уменьшение числа и увеличение размеров ФЦ. Между числом и размерами ФЦ существует строгая корреляция: увеличение количества ФЦ всегда сопровождается уменьшением среднего объема одного ФЦ и ростом суммарного объема ФЦ. Это может быть связано как с дополнительным синтезом специфических белков, расходующихся на новообразующиеся ФЦ, так и с фрагментацией существующих ФЦ.