- •Ядрышко.
- •1.1.1.Метод серебрения.
- •1.1.4. Электронная микроскопия.
- •1.1.5. Метод молекулярной гибридизации in situ.
- •1.1.6. Выделение ядрышек.
- •1.2. Физические и химические свойства ядрышка.
- •2. Ультраструктурное строение ядрышка.
- •2.1. Фибриллярный центр (фц).
- •2.2. Плотный фибриллярный компонент (пфк).
- •2.3. Гранулярный компонент.
- •2.4. Околоядрышковый хроматин (охр).
- •2.5. Матрикс ядрышка.
- •2.6.Ядрышковая вакуоль («nucleolar vacuole»).
- •3. Функции ядрышка. Связь структуры и функций.
- •3.4. Некоторая роль в биосинтезе srp.
- •3.6. Тельца Кахаля.
- •Связь структуры и функций.
- •Динамичность ядрышка.
- •4. Белки ядрышка.
- •4.1. Аминокислотный состав ядрышка.
- •4.2. Специфические ядрышковые белки.
- •5. Строение и функционирование генов рРнк.
- •Гены класса I. Экспрессия.
- •Процессинг рРнк.
- •Гены 5s-рРнк.
- •6. Классификация ядрышек.
- •6.1. Нуклеолонемные ядрышки.
- •6.2. Ретикулярные ядрышки.
- •6.3. Вакуализированные ядрышки.
- •6.4. Кольцевидные ядрышки.
- •6.5. Ядрышки типа кора-сердцевина.
- •6.6. Компактные ядрышки.
- •6.7. Сегрегированные ядрышки.
- •6.8. Плотные фибрилляторные ядрышки.
- •6.9. Свободные фц.
- •6.10. Промежуточные типы ядрышек.
- •6.10.1. Нуклеолонемно-вакуолизированные (нуклеолонемно-кольцевидные) ядрышки.
- •6.10.2. Псевдонуклеолонемные ядрышки.
- •7. Ядрышко и клеточный цикл.
- •8. Морфогенез ядрышка.
- •8.2. Морфогенез ядрышка вследствие частичной гепатэктомии мышей и крыс.
- •Ядерно-поровый комплекс.
- •Описанные ниже структурная организация япк и транспорт через япк (пункты 1,2,3,6) были взяты из обзора е.В. Кисилевой (Институт цитологии и генетики со ран, Новосибирск).
- •С труктурная организация.
- •2.Транспорт через ядерную пору.
- •3. Регуляция транспорта молекул через ядерную пору.
- •3.1. Первая система.
- •3.2. Вторая система.
- •3.3. Третья система.
- •4. Импорт.
- •4. 1. Рецепторы импорта ядерных белков (импортины).
- •4.2. Ядерные белки: импорт, nls-зависимый механизм.
- •4. 3. Ядерные белки: импорт, nls-независимые механизмы.
- •5. Экспорт.
- •6.Сборка ядерных пор in vitro происходит через интермедиаты.
- •Ядерно-белковый матрикс.
- •Препараты и микрофотографии.
- •1. Препараты.
- •1. Включение 3нт в клетки культуры спэв. Расчет пролиферативного пула.
- •2. Включение 3ну в клетки культуры спэв.
- •3. Ооциты рыб. Амплификация ядрышка.
6.7. Сегрегированные ядрышки.
Основным морфологическим признаком сегрегированных ядрышек считается пространственное разделение (сегрегация) их структурных компонентов. Такие ядрышки имеют небольшие размеры: 1-2 мкм в диаметре. Гранулярный и фибриллярный компоненты четко отделены друг от друга. ФЦ значительно увеличиваются в размерах, уменьшаются в количестве и локализуются в периферической части ядрышка. Вакуолей практически не образуется. Сегрегированные ядрышки обнаруживаются в большом числе объектов животного и растительного происхождения после действия различных ингибиторов синтеза рРНК, в частности актиномицина Д. Кроме того, ядрышки этого типа выявляются в процессе естественном дифференцировки клеток, например, в эпителии ворсинок тонкой кишки и в лимфоцитах крысы.
Сегрегированные ядрышки образуются под действием многих антибиотиков, которые подавляют не только транскрипцию (актиномицин), но и редупликацию (митомицин) и трансляцию (циклогексимид). Аналогичная картина наблюдается при действии на клетки некоторыми канцерогенами (афлатоксин) и антиметаболитами. Такое многообразие веществ, вызывающих сегрегацию ядрышка, и способы их воздействия на клетку указывают на тот факт, что процесс образования сегрегированных ядрышек не носит специфического характера. Любое нарушение клеточного метаболизма в конечном итоге отражается на процессе транскрипции. Кроме того, сегрегированные ядрышки обнаружены при созревании эритробласта на стадии ортохроматофильного эритробласта (в данных клетках они состоят из ФЦ и слоя ПФК) и в эпителии ворсинок тонкой кишки.
Сегрегированные ядрышки характеризуются низким уровнем синтеза рРНК, причем при полной сегрегации компонентов ядрышка синтез рРНК практически равен нулю.
6.8. Плотные фибрилляторные ядрышки.
Имеют малые размеры: менее 1мкм, это само по себе служит удобным критерием для их идентификации. Обладают высокой плотностью упаковки РНП-материала, имеют сферическую форму и ровные контуры. В этом типе ядрышек можно выделить два класса: малые и большие фибриллярные ядрышки. Малые плотные фибрилляторные ядрышки обнаруживаются в клетках эпителия ворсинки кишечника мыши и крысы, ядерных эритроцитах, бластомерах амфибий, а также в клетках, подверженных воздействию многих химических и физических факторов – ингибиторов синтеза рРНК. Большие плотные фибрилляторные ядрышки выявляются в растущих ооцитах на стадии многослойного фолликула и в ядрах 1-2 клеточных зародышей некоторых млекопитающих. Плотные фибриллярные ядрышки практически неактивны.
6.9. Свободные фц.
Некоторые авторы рассматривают их как одну из разновидностей микроядрышек. На светооптическом уровне без специального окрашивания свободные ФЦ не выявляются. На электронно-микроскопическом уровне они представляют собой округлые зоны, образованные рыхло лежащими фибриллами. То есть свободные ФЦ практически не отличаются от ФЦ, видимых в составе ядрышек других типов. В некоторых случаях ФЦ контактируют с небольшим количеством фибрилл. Свободные ФЦ обнаруживаются в клетках, характеризующихся полным отсутствием синтеза рРНК: ядерных эритроцитах птиц, нормобластах костного мозга и печени зародыша мыши, гранулоцитах. свободные ФЦ видны в телофазных клетках и метафазных хромосомах; в последнем случае их называют ядрышкообразующими районами. при стимуляции синтеза рРНК вокруг свободных ФЦ начинается формирование активного ядрышка.