- •Ядрышко.
- •1.1.1.Метод серебрения.
- •1.1.4. Электронная микроскопия.
- •1.1.5. Метод молекулярной гибридизации in situ.
- •1.1.6. Выделение ядрышек.
- •1.2. Физические и химические свойства ядрышка.
- •2. Ультраструктурное строение ядрышка.
- •2.1. Фибриллярный центр (фц).
- •2.2. Плотный фибриллярный компонент (пфк).
- •2.3. Гранулярный компонент.
- •2.4. Околоядрышковый хроматин (охр).
- •2.5. Матрикс ядрышка.
- •2.6.Ядрышковая вакуоль («nucleolar vacuole»).
- •3. Функции ядрышка. Связь структуры и функций.
- •3.4. Некоторая роль в биосинтезе srp.
- •3.6. Тельца Кахаля.
- •Связь структуры и функций.
- •Динамичность ядрышка.
- •4. Белки ядрышка.
- •4.1. Аминокислотный состав ядрышка.
- •4.2. Специфические ядрышковые белки.
- •5. Строение и функционирование генов рРнк.
- •Гены класса I. Экспрессия.
- •Процессинг рРнк.
- •Гены 5s-рРнк.
- •6. Классификация ядрышек.
- •6.1. Нуклеолонемные ядрышки.
- •6.2. Ретикулярные ядрышки.
- •6.3. Вакуализированные ядрышки.
- •6.4. Кольцевидные ядрышки.
- •6.5. Ядрышки типа кора-сердцевина.
- •6.6. Компактные ядрышки.
- •6.7. Сегрегированные ядрышки.
- •6.8. Плотные фибрилляторные ядрышки.
- •6.9. Свободные фц.
- •6.10. Промежуточные типы ядрышек.
- •6.10.1. Нуклеолонемно-вакуолизированные (нуклеолонемно-кольцевидные) ядрышки.
- •6.10.2. Псевдонуклеолонемные ядрышки.
- •7. Ядрышко и клеточный цикл.
- •8. Морфогенез ядрышка.
- •8.2. Морфогенез ядрышка вследствие частичной гепатэктомии мышей и крыс.
- •Ядерно-поровый комплекс.
- •Описанные ниже структурная организация япк и транспорт через япк (пункты 1,2,3,6) были взяты из обзора е.В. Кисилевой (Институт цитологии и генетики со ран, Новосибирск).
- •С труктурная организация.
- •2.Транспорт через ядерную пору.
- •3. Регуляция транспорта молекул через ядерную пору.
- •3.1. Первая система.
- •3.2. Вторая система.
- •3.3. Третья система.
- •4. Импорт.
- •4. 1. Рецепторы импорта ядерных белков (импортины).
- •4.2. Ядерные белки: импорт, nls-зависимый механизм.
- •4. 3. Ядерные белки: импорт, nls-независимые механизмы.
- •5. Экспорт.
- •6.Сборка ядерных пор in vitro происходит через интермедиаты.
- •Ядерно-белковый матрикс.
- •Препараты и микрофотографии.
- •1. Препараты.
- •1. Включение 3нт в клетки культуры спэв. Расчет пролиферативного пула.
- •2. Включение 3ну в клетки культуры спэв.
- •3. Ооциты рыб. Амплификация ядрышка.
6.5. Ядрышки типа кора-сердцевина.
Основными структурными компонентами являются РНП-фибриллы и гранулы. При этом центральная часть ядрышка занята фибриллярным компонентом, гранулы образуют мощный слой на его периферии. ФЦ морфологически не выявляются; возможно, они замаскированы продуктами синтеза рРНК. Как правило, вакуолярный компонент плохо выражен. Об организации ОХР и ВХР не известно. Размер не превышает 1-2 мкм. Ядрышки типа кора-сердцевина характерны для клеток с высоким уровнем синтеза рРНК и белка, то есть эти ядрышки можно отнести к высокоактивным. Они описаны в ооцитах и сперматоцитах амфибий и некоторых беспозвоночных, гепатоцитах саламандры и меристематических клетках многих растений.
6.6. Компактные ядрышки.
Эта форма характеризуется отсутствием нуклеолонем и имеет вид плотных структур, как правило, погруженных в ОХР. Эта форма ядрышек встречается в специализированных клетках и, скорее всего, характеризуется низкой активностью. Наиболее часто компактные ядрышки встречаются в опухолевых клетках. Однако, уже в 1988 г. Челидзе и Зацепина утверждают, что компактные ядрышки (наряду с нуклеолонемными) являются наиболее активными и характерны для незрелых (бластных) клеток.
Компактные ядрышки отличаются достаточно крупными (3-4мкм) размерами. Имеют высокую плотность упаковки компонентов (РНП-фибрилл, гранул и ФЦ), которые равномерно распределены по объему ядрышка. ФЦ хорошо выражены, имеют округлую или чашеобразную форму и достигают 0,1-0,5мкм в диаметре; общее число ФЦ в одном ядре превосходит число ядрышкообразующих районов. ФЦ могут быть собраны в группу, окруженные общим слоем ДНП-фибрилл – такие группы были названы фибриллярными комплексами. Отличительный признак компактного ядрышка - высокая степень развития гранулярного компонента (70-80% от общего объема ядрышка). Вакуоли, как правило, полностью отсутствуют. Лишь в некоторых объектах в компактных ядрышках наблюдается система мелких полостей – такие ядрышки получили название компактно-нуклеолонемные. Таким образом, в типе компактные ядрышки можно выделить два класса: собственно компактные и компактно-нуклеолонемные. ОХР и ВХР в компактных ядрышках развиты слабо.
При анализе ядрышек на ЭМФ следует быть внимательными, т.к. есть вероятность принять за компактные ядрышки плоскость сечения сегрегированных или кольцевидных ядрышек. Компактные ядрышки наблюдаются в следующих видах ткани: корневой меристеме проростков гороха, клетки инфильтратных форм рака молочной железы. Компактные ядрышки обладают высокой активностью. Они обнаруживаются в интенсивно пролиферирующих и растущих клетках животных и растений: корневая меристема проростков гороха, кукурузы, клетки инфильтратных форм рака молочной железы, клетки асцитной карциномы Эрлиха, культура ткани (свиньи, мыши, человека). В некоторых случаях при активации синтеза РНК также появляются компактные ядрышки: в лимфоцитах при действии фитогемагглютинина, в гепатоцитах при обработке тиоацетамидом. Кроме того, компактные ядрышки выявляются в клетках трофобласта лабиринтного отдела плаценты крысы, то сеть в дифференцирующихся клетках.