
- •Сателлитная днк.
- •Полиндромы.
- •Хроматин.
- •2.1. Гистоны.
- •2.2. Нуклеосома.
- •Дифференциальное окрашивание.
- •Следует подчеркнуть, что q- и g-методами окрашиваются одни и те же участки хромосом.
- •Митотическая хромосома.
- •Препараты и микрофотографии.
- •5.1. Препараты. Митотическая хромосома. Кариотип.
- •5.2. Электронные и световые микрофотографии.
- •5.2.1. Митотическая хромосома.
- •5.2.2. Уровни компактизации днк.
- •Общая информация. Коэффициент седиментации.
Следует подчеркнуть, что q- и g-методами окрашиваются одни и те же участки хромосом.
С-метод используют для анализа центромерных районов хромосом (эти районы содержат конститутивный гетерохроматин) и вариабельной, ярко флюоресцирующей дистальной части Y-хромосомы.
R-метод дает картину, противоположную G-окрашиванию. Обычно также используют краситель Гимзы или флюоресцентный краситель акридиновый оранжевый. Этим методом выявляют различия в окрашивании гомологичных G- или Q-негативных участков сестринских хроматид или гомологичных хромосом.
Т-метод применяют для анализа теломерных районов хромосом. Эту методику, а также окрашивание районов ядрышковых организаторов азотнокислым серебром (AgNOR-окрашивание) используют для уточнения результатов, полученных путем стандартного окрашивания хромосом.
Следует отметить, что в 1971г. на Парижской конференции была предложена классификация методов дифференциальной окраски. Методы, с помощью которых выявляется сегментация хромосом, можно подразделить на 6 основных классов: Q-, G-, R-, T-, C-окраски и окраска по Фельгену. Кроме того, позднее были разработаны методики дифференциального переваривания хромосом энзимами, а также флуорисцентная гибридизации in situ (FISH).
Митотическая хромосома.
Еще в 1882 г. Э. Страусбургером было обнаружено у растения Funkia sieboldiana, что хромосомы одной и той же ядерной пластинки весьма резко различаются по величине. В 1912г. К.Мюллер посвятил целое исследование варьированию размеров хромосом. Точным установлением того факта, что каждой хромосоме присущи, помимо определенного абсолютного (или относительного) размера, еще и постоянные и характерные особенности в построении их тела, наука обязана трудам Сергея Гавриловича Навашина (1857-1930), выполненным в 1910-1914гг.
Уже в ранних работах Навашин выделяет три типа хромосом: 1) U-образные, почти равноплечие; 2) U-образные, явственно неравноплечие; 3) крючковидные, один членик которых настолько короток, что даже может ускользнуть из наблюдения. В 1912г. Навашин установил наличие особых мельчайших, но вполне постоянных придатков, присоединенный при помощи «ниточки» в 2 «средним» хромосомам. Придатки эти были названы Навашиным «спутниками». Спутники при делении ядра расщепляются вместе с остальным телом хромосомы. Таким образом, впервые была показана возможность идентификации хромосом по особенностям их строения.
Фактически в соответствии с классификацией Навашина выделяют 4 типа хромосом зависимости от положения центромеры и определяемой этим положением относительной длины плеч, т.е. частей хромосомы по обе стороны от центромеры. По мнению многих ученых любая хромосома имеет два плеча, т.е. телоцентрической хромосомы в природе не существует. У телоцентрических хромосом во всех случаях обнаружено наличие второго, пусть очень короткого плеча. Кроме того, современные данные свидетельствуют о том, что на каждой конце хромосомы должна быть теломера с некоторым количеством прителомерного гетерохроматина. Таким образом центромера не может находиться на самом конце хромосомы.