Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
занятие 6.rtf
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.03.2025
Размер:
203.05 Кб
Скачать

2.2. Нуклеосома.

Общая масса нуклеосомы – 262 кДа. Масса ДНК – 130кДа, гистонов Н2А и Н2В – по 28 кДа, гистонов Н3и Н4 – по 30 кДа, гистона Н1 -24 кДа

* Джон Дальтон (1766-1844) положил начало признанию атомной массы как главной характеристики элемента. В 1803 он составил первую таблицу атомных масс (отнесённых к массе атома водорода, принятой за единицу). Кстати, дальтонизм назван так потому, что впервые был замечен именно у Дальтона.

Дальтон – единица измерения молекулярной массы. Дальтон - единица измерения массы 1 атома Н: 1,67 х 10-24 г.

2.3. Негистоновые белки.

Негистоновые белки – все белки хроматина (кроме гистонов), выделяющиеся с хроматином или с хромосомами.

  • Белки ламины.

  • SMC-белки (SMC – structural maintenance of chromosomes). Эти белки в основном не поддерживают определенную структуру хромосом (например, конденсированное состояние), а скорее создают структуры и вызывают их динамическое изменение. Белки SMC играют роль в когезии сестринских хроматид, конденсации хромосом, рекомбинации и репарации ДНК. У эукариот известно 6 членов семейства –белков. 6 классов эукариотических SMC-белков названы SMC1-SMC6 у большинства организмов; они могут сгруппированы в соответствии с 3 группами гетеродимеров, которые они формируют: SMC1 и SMC3, SMC2 и SMC4, SMC5 и SMC6. SMC-белки являются структурным компонентом когезинов и конденсинов.

    • Когезины. В состав когезина входят SMC 1-SMC 3–гетеродимер, а также не SMC –белки. Когезия (слипание) сестринских хроматид представляет собой комплексный процесс, необходимый для поддержания целостности генома во всех эукариотических организмах. Нарушения когезии в клетках человека могут приводить к различным генетическим заболеваниям. Основой молекулярного аппарата когезии является белковый комплекс когезин. Существует предположение, что когезин участвует белки в сцеплении сестринских хроматид в мейозе. Когезин связывается с хроматином со значительно большей аффинностью чем с ДНК. Связывание когезина с хроматином не зависит от хвостов коровых гистонов. Таким образом, базовой функцией когезина является обеспечение правильной сегрегации сестринских хроматид после репликации ДНК вплоть до начала деления.

    • Конденсины. Конденсин участвует в компактизации хромосом при переходе к митозу. В клетках позвоночных конденсин является в течение интерфазы цитоплазматическим белком. Конденсин является комплексом из 5 субъединиц, включающий в себя SMC2- SMC4, а также не SMC-белки.

  • HMG-белки.

  1. Дифференциальное окрашивание.

В конце 60-ых гг. Дарлингтон и Ла Кур, изучая растительные объекты, обнаружили, что некоторые красители (в частности квинокрин) окрашивают определенные участки хромосом. Они назвали эти участки бэндами. Каждая хромосома характеризуется специфическим комплексом полос. Гомологичные хромосомы окрашиваются идентично, за исключением полиморфных районов, где локализуются разные аллельные варианты генов. Аллельный полиморфизм характерен для многих генов и встречается в большинстве популяций. Сегментация универсальна: она присуща всем хромосомам эукариот. Характер сегментации видоспецифичен.

На данный момент разработано несколько методов дифференциального окрашивания, или бэндинга.

    • G-метод. После интенсивной предварительной обработки, часто с применением трипсина (это протеаза; ферменты класса гидролаз, расщепляющие пептидные связи в белках и пептидах; то же, что протеолитические ферменты), хромосомы окрашивают красителем Гимзы. Под световым микроскопом на хромосомах видны светлые и темные полосы — G-сегменты. Хотя расположение Q-сегментов соответствует расположению G-сегментов, G-окрашивание оказалось более чувствительным и заняло место Q-окрашивания в качестве стандартного метода цитогенетического анализа. G-окрашивание дает наилучшие результаты при выявлении небольших аберраций и маркерных хромосом (сегментированных иначе, чем нормальные гомологичные хромосомы). Именно этим способом окрашены наши препараты.

В состав красителя Гимза входят: азур, метиленовый фиолетовый, метиленовый синий, эозин. Механизм окраски не ясен. Предполагается, что краситель связывается с зонами большей плотности хромосом. Название метода произошло от названия красителя – Gimza.

    • Q-метод был разработан шведским цитологом Касперссоном. Для этого метода используют флуорисцентный краситель, который получил название акрихиниприт (соответственно, для анализа этого вида окрашивания используют флуорисцентный микроскоп). Акрихиниприт связывается с гуаниновыми основаниями; предполагается, что он выявляет G-С-зоны. Метод лучше всего подходит для исследования Y-хромосом и потому используется для быстрого определения генетического пола, выявления транслокаций (обменов участками). Название метода произошло от красителя квинокрина.