6. Техн. Схема пр-ва кормовых аб тетрациклинового ряда (терравит и биовит).

Технология пр-ва АБ немедиц. происхождения за исключением пищевых, по единой схеме:

1. предферментационные процедуры;

2. асептическое культивирование штамма-продуцента, биосинтез АБ;

3. предобработка КЖ;

4. с ушка КЖ (при больших объемах предшествует стадия выпаривания);

5. стандартизация готового препарата, фасовка.

Тетрациклин: в медицине, как корм. добавка, как ср-во защиты раст.

Для с/х препараты 7-хлортетрациклина (7-ХТЦ) (продуцент: Streptomyces aureofaciens); 5-окситетрациклина (5-ОТЦ) (продуцент: Streptomyces rimosys).

В-ва – аморфные соед-я плохо раств в воде при рН=4,5-7,5, в щелочной среде (рН>7,5) разлаг-ся; характ. особенность – свечение в УФ (исп-ся для количеств. определения).

Производство 7-ХТЦ (биовит):

Продуцент выделен из почв р. Миссури, название (ауреомицин) из-за золот окраски продуцента и кристаллич препарата. В пром-ти 7-ХТЦ выпускают под названиями биомицин, дуомицин, РФ – биовит

Продуцент: Streрtomices aureofaciens (аэроб, Тopt=26-28 ⁰С). + В значит кол-вах синт В12 (0,5-0,7 мкг/мл).

Посевной материал: споры продуцента (срок хранения без потери акт-ти до 3 мес.)

- в колбах на 750 мл (200 мл жидк. ПС) (1 генерация), Тopt, качалка (160-180об/мин) 2-3 суток

- посевной аппарат (≈600-800 мл/м³ ПС) (мицелиальная масса 2-й генерации), 24-30 ч (Тopt, ст аэр 1).

- до 10% на подготовку (обязат. проверка на АБтич. Акт-ть КЖ)

ПС(рН=6,6-6,7): тв или жидкая (зернокартофельная барда 40%, кукур экстракт до 3%, мука до 3%), ист-к С (сахароза, мальтоза, глюкоза, крахмал, др. водораств. УВ, некот. к-ты (молочн.) В пром-ти основа ПС – разваренная (1час) картофельная мезга; источник N – аммонийные соли, АК, сложн. смеси (кукур, мясной экстракт), нитраты не исп-ся, конц. Р_опт – 50-100 мг/л.

Регуляция:

- парадиметиламинобензальдегид 100 мг/л увелич-ет выход АБ на 40%

- роданистый бензил (100 мг/л увелич-ет выход АБ на 200%).

- Fe²⁺ ингибируют акт-ть АсКоА-карбоксилазы (обр-ют нераств комплекс с АБ в кл стенке продуцента) => синтез 7-ХТЦ

- Cl (в виде солей NaCl, MgCl₂) = 0,4%, увеличивает выход АБ до 6мг/л, при отсутствии Cl = 2,8 мг/л. - аэр: опт-5-6 мг/л, при ухудшении обр-ся неакт формы АБ (до 50% от общ кол-ва).

- Образование ХТЦ обратно пропорц акт-ти ферментов ЦТК (конкуренция за КоА). КоА необх. для синтеза углеродной цепи АБ, идущего через образование малонилКоА

Ферментация: К_З=0,5-0,6; 60-70ч, ст аэр=0,8-1, рН =6,6-6,7 (до нач), в пр-ссе не поддерж-ся.

ПС: зернокартофельная барда (10% ПС); мука (кукурузная, ржаная) (5% ПС, крахмалистость не <50%); NH₄NO₃ (0,7%); СаСО₃ (0,7-0,5%) (для поддержания рН); СоСl₂ (0,0001%) (для стимулирования синтеза В12); жир животный (кашалотовый) или растит. масла (0,2%); роданистый бензил (как предшественник) (0,0001%); силиконовое масло (пеногаситель) (0,5-1%).

Конец ферментации: рН=7,2. ХТЦ в КЖ ≈3000 ед/мл (т.е ≈3 мг/мл); СВ ≈3%.

- вакуум-выпаривание (при большой производит-ти), Т>55⁰C до СВ10-12% (2-3 корпусное выпаривание).

- добавляют стабилизатор (пиросульфат Na) – 2-3кг/м³ р-ра.

- Распылительная сушилка. Т(теплоносителя на входе)=200-220С; на выходе 80-90⁰C

Стандартизация, фасовка (наполитель: муку, отруби (пшеничн), мел, свекловичный жом).

ИТОГО: Сух. препарат 90-150г/кг препарата, АБ в станд препарате – 20, 40, 80 г/кг.

Готовая форма – порошок светло-коричневого (коричневого) цвета, безвредность ЛД₅₀=100мг/мышь. Препарат содержит В12 (≈от 3-8 мкг/г препарата). МАХ акт-ть ХТЦ при рН=6,2-6,5.

Обладает выс. акт-тью по отн. к грам-полож, грам-отриц МО, кислотоустойчивым бактериям, микобактериям, риккетсиям, простейшим.

«+»: медленное развития резистентности МО, можно исп-ть ХТЦ как в медицине, так и в пищ. пром-ти, с/х (стараются не применять как консервант для предотвращ. развития резистентности). В медицине: при лечении заболеваний, возбудители кот устойчивы к пенициллину, стрептомицину (коклюш, скарлатина, сибир. язва, туляремия, бруцеллез). В с/х: исп-ся как корм АБ при обраб телят, ягнят, свиней (ув-ет скорость роста, ум-ет расход кормов)

В США на основе ХТЦ выпускается препарат ауреомицин, сод-т дополнительно вит А, D, E.

Препараты 5-ОТЦ (терравит).

Продуцент: Streptomyces rimosus, м.б. Streptomyces aureofaciens, Streptomyces oxytetraciclin.

Коммерч. названия препаратов на основе 5-ОТЦ: терравит, террамицин, оксиникоин, риомицин.

Может утилизировать орг. к-ты быстрее, чем продуцент ХТЦ, а именно ПВК, кумаровую, молочную, ЖК с С 10-20 атомов.

ПС: кукур мука (до 6%); кукур экстракт (до 2%); соли (NH₄)₂SO₄ , СаСО₃, NaCl (0,4-0,8%)

- С (крахмал, глюкоза, мальтоза, галактоза, глицерин (лактозу и сахарозу не усваивает))

- N (окисленные формы (нитраты), восстановленные (аммонийный), азот из АК)

- Р (из гидрофосфатов).

Ферментация: вводится синтетич. пеногаситель (до 2%); СоСl₂ (до 0,0001%). рН=6,6-6,7; ст аэр = 1; Тopt =26-28⁰C; 100-120 ч.

- потребление С, Р, N, рост биомассы, незначит накопл ПВК, уксусн. к-ты (1/3всей ферм-ции по врем).

- потребление орг. к-т, синтез АБ (2/3 времени).

Готовые формы: терравит - высушенная КЖ; терравит R – высушенный фильтрат КЖ; терравит К – высушенная биомасса продуцента.

Стандартизация препарата: кукур мука, отруби (пшеничн), свекловичный жом. Содержание АБ: терравит – 5,10, 50 г/кг; терравит R – 20, 40 г/кг; терравит К - 40 г/кг. Содержание В12 не регламентируется. ЛД₅₀=100 мг/мышь (вводят внутрибрюшинно).

Препарат прим-ют для профилактики желудочно-киш, легочных заболеваний в сост премиксов. Леч доза - 15-20 г/т премиксов. Прим-ют в виде водных р-ров, премиксов, р-ров на молоке.

США: террамицин – солянокислый ОТЦ (НCl∙ОТЦ) – 10, 50, 100 г/кг (станд-ан грубыми кормами)