1. Ферменты и ферментные препараты (классификация, активность, способы пр-ва)

Классификация ферментов основана на мех-ме их д-я и включает 6 классов:

1. Оксидоредуктазы (катализирующие ОВР)

2. Трансферазы (катализирующие р-ции переноса гр)

3. Гидролазы (катализирующие р-ции гидролиза)

4. Лиазы (катализирующие присоед гр к // связям или отщепл гр с обр-ем двойной связи)

5. Изомеразы (катализирующие р-ции изомеризации)

6. Лигазы (синтетазы) (р-ции конденсации 2 мол-л с расщепл пирофосфатной связи в мол-ле АТФ)

Св-ва ферментов:

- высокая каталитическая акт-ть (добавка незначит кол-ва фермента (10^-7 – 10^-9 моль) может ускорить скорость р-ции более чем в 10¹⁰ раз).

Кол-во фермента в препарате в абс ед-цах опред-ть достаточно сложно => станд ед акт-ти (Е, U).

Стандартная ед-ца акт-ти - такое кол-во фермента, кот катализирует превращение 1 мкмоль S за 1 мин в станд усл (Т=30^оС, нач скорости р-ции, когда конц S достаточна для насыщ фермента (кинетика р-ции нулевого порядка), конц S, фермента и рН опт для данного фермента).

Часто кол-во субстрата нельзя выразить числом мкмоль, так что точно не известна молек масса мол-лы (белок, крахмал, пектин, целлюлоза). В этом случае опред-ют микроэквивалент затронутых р-цией групп (число образовавшихся карбоксильных или аминных гр, число расщеплённых гликозидных связей и т.д.)

Уд акт-ть (ед акт-ти/1мг фермента (белка)),

Молекулярная акт-ть (число мкмоль S (эквивалентов затронутых р-цией гр), прореагир в теч 1мин с 1мкмоль фермента при станд усл.)

Сод-е фермента в данном препарате [станд ед-цы акт-ти фермента/1мл ферм р-ра или 1г препарата]

ТО акт-ть ферм препарата выраж-ся числом мкмоль S, прореаг-его в присутствии 1мл или 1г препарата в заданных усл. Зная акт-ть, легко рассч расход ферм препарата для конкретных технологич целей.

В производств практике исп-ют также понятия: акт-ть условного ферм препарата и усл тонна ферм препарата.

Условная активность – акт-ть осн фермента в станд усл-ом аппарате, т.е. ср устойчивая акт-ть препарата. За 1 усл тонну принимают 1 тонну ферм препарата со станд акт-тью.

ТО массу ферм препарата с фактич акт-тью, кот может колебаться в зав-ти от партии, переводят в массу усл аппарата со стабильной усл акт-тью.

Номенклатура: сокращ назв осн фермента + вид назв продуцента + –ин + индекс + цифра

Пр: амилолитич ферм препараты, полученные Asp. orizae и B.subtilis – амилоризин и амилосубтилин. Индекс обознач способ его пр-ва (П или Г), индекс Х показыв налич фермента в данном препарате, цифра показывает степень концентрирования и очистки осн фермента от балластных в-в:

х – неочищ КЖ или пов культура продуцента

2х – жидкий неочищ концентрат КЖ или экстракта пов культуры (СВ 40-50%)

3х – сух ферм препарат, получ из КЖ или экстракта пов культуры

10х – сух препарат, очищ от балластных в-в осаждением орг р-лями или высаливанием

15,18,20х – сух препарат, освобожд не только от балластных в-в, но и частично от сопутствующих ферментов (значение выше 20 не исп-ся, т.к. представляют из себя чистый фермент).

ТО сод-е осн фермента в препарате опред-ся степенью его очистки. Ферм препараты 2х и 3х - технич-е.

См вопрос 3 (получение ГлюковомаринаГх)