- •Методическое пособие по микробиологии
- •Предисловие
- •1. Общая микробиология
- •1.1 Микроскопический (бактериоскопический) метод исследования
- •1.2. Противомикробные мероприятия
- •1.3.Классификация питательных сред
- •1.4.Культуральный метод исследования
- •1.5. Методы выделения чистых культур микроорганизмов
- •1. Метод механического разобщения микроорганизмов:
- •2. Метод заражения чувствительных лабораторных животных (биологический):
- •3. Методы, основанные на избирательной чувствительности микроорганизмов к воздействию внешних факторов:
- •1.6. Определение биохимических свойств микробов
- •1.11. Биологический (экспериментальный) метод исследования
- •1.12. Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам
- •1.13. Методы генетического анализа микроорганизмов
- •1.14. Методы изучения нормальной микрофлоры
- •2. Частная микробиология
- •2.1. Микробиологическая диагностика пневмококковых инфекций
- •II. Культуральный (бактериологический) метод:
- •2.2. Общие принципы диагностики острых кишечных
- •2.3 Диагностика кишечных эшерихиозов (колиэнтеритов)
- •2.4. Диагностика брюшного тифа, паратифов а и в, сальмонеллезов
- •2.5. Лабораторная диагностика кишечного иерсиниоза
- •2.6. Клебсиеллы. Лабораторная диагоностика склеромы и озены
- •2.7. Лабораторная диагностика холеры
- •2.8. Кампилобактерии. Методы диагностики кампилобактериоза
- •2.9. Диагностика пищевых отравлений бактериальной природы
- •2.10. Лабораторная диагностика газовой гангрены
- •2.11. Лабораторная диагностика столбняка
- •2.12. Лабораторная диагностика ботулизма
- •2.13. Серологическая диагностика сифилиса
- •2.14. Лабораторная диагностика хламидиозов
- •2.15. Микоплазмы, микоплазмозы
- •3. Общая и частная вирусология
- •3.1. Методы культивирования вирусов
- •I. Культуры клеток
- •3.2. Принципы диагностики вирусных инфекций
- •3.3. Лабораторная диагностика вирусных гепатитов
- •3.4. Лабораторная диагностика спиДа
- •4. Другие инфекции
- •4.1. Классификация грибов. Методы диагностики микозов
- •4.2. Возбудители мадуромикоза
- •4.3. Возбудитель пневмоцистоза
- •4.4. Возбудитель донованоза
- •4.5. Возбудитель язвы Бурули
- •4.6. Возбудитель мелиоидоза
4.2. Возбудители мадуромикоза
Мадуромикоз (мадурская стопа) - хроническое гранулематозное заболевание, вызываемое актиномицетами (Actinomyces, Nocardia) или грибами (Pseudoallescheria boydii, Aspergillus, Madurella). Встречается преимущественно в тропических и субтропических странах. Возбудители проникают в организм из почвы через микротравмы кожи. Процесс локализуется в стопе, реже - в кисти. Болезнь начинается с появления мелких плотных узелков (гранулем), которые в последующем сливаются в один очаг с вовлечением в воспаление кожи, подкожной клетчатки, сухожилий, костей. Гранулематозный очаг распадается с образованием гноя, который через многочисленные свищи вытекает наружу. Наряду с распадом ткани происходит разрастание фиброзной ткани. Пораженная стопа увеличивается в размерах, деформируется, приобретая вид "медвежьей лапы". Болезнь нередко осложняется присоединением гноеродной инфекции. Самостоятельное выздоровление наблюдается редко. Материалом для микробиологического исследования является гной, кусочки биопсированной ткани. В материале отыскивают друзы - бесцветные или пигментированные зерна, из них готовят мазки, как при актиномикозе. Мицелий грибов по сравнению с мицелием актиномицетов толстый (2-5 мкм), ветвистый, септированный, содержит много хламидоспор, друзы пигментированы. Мицелий актиномицетов тонкий (0,5-2,0 мкм), несептированный, ветвящийся. Центр друзы состоит из поли- и мононуклеарных клеток и войлокообразного скопления мицелия, от которого на периферию отходят гифы с реактивно-утолщенными концами ("дубинки"). Выделение и идентификация возбудителя проводится, как при актиномикозах и грибковых поражениях кожи. Чистые культуры грибов выделяют на среде Сабуро, пивном сусло-агаре. Выращивают в аэробных и анаэробных условиях при температурах 20-25°С и 37°С. Одновременно материал исследуют на гноеродные бактерии.
4.3. Возбудитель пневмоцистоза
Пневмоцистоз - заболевание, вызываемое пневмоцистами (Pneumocystis carinii). Одноядерные трофозоиты имеют форму неправильной дольки и варьируют в размерах от 1 до 5 мкм; содержат митохондрии, эндоплазматический ретикулум, различные гранулы и вакуоли. Размножаются бинарным делением. Более крупные трофозоиты окружены толстой стенкой, в результате чего формируется циста. В последней происходит деление ядра и цитоплазмы трофозоита с образованием от 2 до 8 клеток (спорозоитов). Диаметр цисты около 10 мкм. После разрыва ее стенки выходят спорозоиты, и начинается новый цикл размножения трофозоитов.
Пневмоцисты обитают в альвеолах легких здоровых людей (1-10%), прикрепляясь к альвеолярному эпителию. При пневмоцистозе поражаются межальвеолярные перегородки с развитием хронической интерстициальнои пневмонии. Альвеолы и бронхиолы заполняются пенистой массой, в результате чего нарушается газообмен и наступает кислородная недостаточность. Развивается картина хронической пневмонии. Заболевание связано с недостаточностью иммунной системы, что объясняет наиболее частое поражение грудных, особенно недоношенных и ослабленных детей (чаще в закрытых детских коллективах). Возможно длительное носительство. Пневмоцистоз у взрослых осложняет иммунодефицитные состояния (туберкулез, опухоли, СПИД).
Пневмоцистоз - инфекция дыхательных путей с воздушно-капельным механизмом передачи.
Материал для исследования: слизь, полученная методом ларингоскопии, либо катетером, либо при глубоком откашливаний (после предварительной инголяции водяного пара). Материал берут не ранее второй недели болезни. При летальном исходе изучают гистологические среды и мазки-отпечатки легких.
Микроскопический метод исследования (основной метод диагностики): препараты окрашивают по Романовскому-Гимзе. Наиболее типично обнаружение восьмиядерных цист паразита. Пневмоцисты приобретают фиолетовый цвет, ядра - темно-синий. Препараты можно обрабатывать также люминесцентной сывороткой.