Трактовка результатов

Реакция агглютинации может быть положительной или отрицательной.

При положительной реакции обычно в течение первых 10-30 секунд на смеси появляются видимые невооруженным взглядом мелкие красные зернышки (агглютинаты), состоящие из склеенных эритроцитов. Мелкие зернышки постепенно сливаются в более крупные зерна, а иногда и хлопья неправильной формы. При этом сыворотка частично или полностью обесцвечивается. Положительная реакция может быть пескообразной или лепестковой.

При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет и в ней не обнаруживается никаких зернышек (агглютинатов).

Результаты реакций в каплях с сыворотками одной и той же группы (двух серий) должны совпадать.

Рисунок 5.25 - Трактовка результатов

При оценке результатов определения групп крови могут быть получены следующие варианты (рис. 5.2):

• Стандартные сыворотки всех трех групп не вызывают агглютинации эритроцитов. Это указывает на то, что эритроциты не содержат агглютиногенов А и В , т.е. исследуемый образец крови относится к группе О(I).

• Стандартные сыворотки группы O(I) и В (III) агглютинировали эритроциты, а с сывороткой А(II) агглютинации не наступило. Исследуемая кровь содержит агглютиноген А, т.е. принадлежит к группе А (П).

• Стандартные, сыворотки 0 (I) и А (II) показали положительную реакцию, а сыворотка В(III) - отрицательную. Эритроциты испытуемого образца крови содержат агглютиноген В, т.е. относятся к группе В(III).

• Стандартные сыворотки всех трех групп агглютинировали эритроциты. Исследуемая кровь содержит аглютиногены А и В. Ее относят к группе AB(IV). Однако для окончательного заключения необходимо провести контрольное исследование на специфичность реакции со стандартной сывороткой AB(IV). Лишь отсутствие агглютинации исследуемой крови с сывороткой группы AB(IV) позволяет отнести кровь к четвертой группе.

6.3.2Определение групп крови по стандартным изогемагглютинирующим сывороткам и стандартным эритроцитам (перекрестный способ).

Способ наиболее часто используется в серологических лабораториях. Суть метода состоит в определении наличия или отсутствия в исследуемой крови групповых антигенов А и В с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток, я также групповых антител α и β с помощью стандартных эритроцитов. Это дает полную серологическую характеристику крови.

Реакция со стандартными эритроцитами проводится следующим образом.

Необходимое оснащение

• Оснащение для реакции со стандартными эритроцитами отличается тем, что для реакция агглютинации необходимы стандартные эритроциты трех групп крови: 0(1), А (II), В(Ш).

• Стандартные эритроциты приготавливают из крови доноров с заранее известной группой крови, хранят при 4-8°С. Срок годности 2-3 дня.

Техника проведения реакции

1. Кровь для исследования берут из вены в сухую пробирку, центрифугируют или оставляют в покое на 20-30 минут для разделения на сыворотку и эритроциты.

2. На маркированную тарелку пипеткой в шесть ячеек наносят по одной большой капле сыворотки исследуемой крови из пробирки (0,1мл), а рядом с ними -по одной маленькой капле (0,01мл) стандартных эритроцитов групп 0(1), А(П), В(Ш) (по две серии).

3. Дальнейшие мероприятия проводятся аналогично методу с использованием стандартных изогемагглютинирующих сывороток: соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют изотонический раствор хлорида натрия, после чего оценивают результат. Реакция со стандартными сыворотками проводится описанным выше способом параллельно с реакцией со стандартными эритроцитами.