Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Описание_ида-4_исправл .doc
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.03.2025
Размер:
1.25 Mб
Скачать
  1. Проведение измерений

При закрытом затворе и установленном фильтре до верху заполнить кювету верхнего резервуара ресуспендирующим раствором (вровень с краями кюветы).

Установить датчик на резервуар, надев его до упора. Убедившись, что на табло блока регистрации установились нули («00.00»), а знак «точка» между нулями мигает.

Открыть затвор. При этом цифровые показания на табло должны изменяться в сторону увеличения.

После остановки отсчета времени на табло (показания более не меняются) закрыть затвор и занести показание в рабочий журнал, обозначив эту величину как время протекания 250 мкл ресуспендирующего раствора через фильтр - tb.

Снять датчик (фильтр не снимать!!!), снова залить ресуспендирующий раствор в резервуар и повторить измерение tb (время протекания буфера). Измерение tb с одним фильтром следует проводить не менее 4-х раз.

Удалить из верхней части резервуара ресуспендирующий раствор (фильтр не снимать!!!). Заполнить кювету верхней части резервуара (точно также, как и раствор) суспензией эритроцитов.

Установить датчик и измерить время протекания через тот же фильтр 250 мкл суспензии – обозначив его в журнале, как ts (время протекания суспензии).

Отвинтить верхнюю часть резервуара, тщательно промыть все детали, контактирующие с суспензией, под струей воды. Стряхнуть воду и собрать блок фильтрации с новым фильтром.

Прибор готов к новому измерению.

Для каждой пробы крови (эритроцитов) измерение ts желательно проводить не менее 3-х раз (каждый раз устанавливая новый фильтр).

Вычисление индекса ригидности

В качестве показателя деформируемости эритроцитов используется индекс ригидности (IR):

( ts - tb )  100

IR =  ,

tb  Ht

где ts - время прохождения через фильтр 250 мкл суспензии эрит­роцитов;

tb - усредненное время прохождения через фильтр 250 мкл ресуспендирующего раствора;

Ht - значение гематокрита суспензии в процентах.

Чем больше значение индекса ригидности, тем меньше деформируемость эритроцитов.

Стандартные значения IR для нормальных эритроцитов зависят не только от диаметра пор, но и от толщины фильтра и некоторых других характеристик фильтра, поэтому для каждого типа и даже для каждой серии фильтров норма должна быть определена в специальной серии экспериментов. Для регистрации небольших отклонений индекса ригидности от нормы желательно пользоваться фильтрами с диаметром пор 3 мкм. В тех случаях, когда деформируемость клеток существенно снижена (индекс ригидности высок), целесообразно пользоваться фильтрами с диаметром пор 5 мкм.

Значения IR эритроцитов здоровых доноров, полученные при измерении времени фильтрации О,1%-ной суспензии эритроцитов через ядерные фильтры F-3-17 (средний диаметр пор 3 мкм, толщина пленки 17 мкм) находятся в интервале 370 – 430. Использовалась ресуспендирующая среда с осмолярностью 310 мОсм и рН 7,4.

Следует учитывать, что осмолярность и рН используемой ресуспендирующей среды влияют на значение IR.

Завершение работы

После завершения работы с прибором необходимо отключить электронный блок регистрации от сети.

Фторопластовый корпус датчика и электроды тщательно промыть дистиллированной водой и высушить. При необходимости части прибора, контактирующие с суспензией, можно промывать в растворе детергента. Блок фильтрации также разобрать, промыть и высушить.