- •Введение
- •Оборудование, используемое при работе с клеточными культурами Оборудование для очистки воды
- •Приборы и аппараты для мытья и стерилизации посуды
- •Приборы для дозирования, разведения и пробоотбора
- •Устройства для приготовления питательных сред
- •Помещения для работы с культурами клеток
- •Оборудование культуральных лабораторий Лабораторные термостаты
- •2. Культуральная посуда
- •Субстраты для культивирования биообъектов Принципы составления питательных сред
- •Культивирование клеток
- •4.1. Культивирование клеток микроорганизмов
- •Классификация процессов культивирования
- •Получение накопительных и чистых культур
- •Методы культивирования на твердых средах Массовая культура на твердой поверхности
- •Процессы суспензионного или глубинного культивирования
- •Периодическое культивирование
- •Параметры кривой роста
- •Где n число клеток.
- •Глубинное периодическое культивирование
- •Продленное периодическое культивирование
- •Многоциклическое культивирование
- •Полунепрерывное культивирование
- •Непрерывное культивирование
- •Синхронно делящиеся культуры микроорганизмов
- •Методы получения протопластов микроорганизмов
- •Получение протопластов у бактерий
- •Получение протопластов у грибов
- •Регенерация клеточной стенки и реверсия к клеточным формам
- •Культивирование растительных клеток
- •Методы создания клеточных культур растений
- •Методы выращивания культуры каллусных тканей
- •Протопласты растительных клеток
- •4.3. Культивирование животных клеток
- •Культуральные системы животных клеток
- •Типы культуральных систем
- •Суспензионные культуры
- •Монослойное культивирование на микроносителях
- •Клеточный цикл и цикл роста
- •Культивирование клеток и тканей беспозвоночных
- •Культивирование клеток
- •Курс лекций
- •Для студентов специальности g 31 01 01 «Биология»
- •(Направление «Биотехнология» g 31 0 01-03
- •220030, Минск, ул. Красноармейская, 6.
Помещения для работы с культурами клеток
Стерилизация питательных сред, как и все другие манипуляции при работе с клеточными культурами, проводится в боксовых помещениях или в ламинар-боксах.
Боксовое помещение представляет собой изолированную комнату с несорбирующими пыль моющимися покрытиями, имеющую предбоксник и обеспеченную необходимым общим и специальным освещением, системами приточной и вытяжной вентиляции, холодным и горячим водоснабжением, а также подводами газов и сжатого воздуха.
Альтернативой боксовым помещениям, требующей меньших затрат на оборудование, являются ламинар-боксы или стерильные рабочие места. В этом случае в любом помещении может быть создан локальный стерильный объем, необходимый для работы и создающий биологическую защиту пользователей. Технически задача решается путем постоянного обдува места проведения работ ламинарным потоком. При работе с заведомо непатогенными материалами поток обеспыленного воздуха из рабочей зоны выходит непосредственно в окружающее пространство. В случае работы с потенциально патогенным материалом воздух перед выходом из рабочей зоны дополнительно фильтруется, возможность обдува оператора при этом исключена. В зависимости от устройства ламинар-бокса поток обеспыленного воздуха в рабочей зоне может быть горизонтальным, вертикальным или наклонным.
Ламинар-бокс с горизонтальным потоком обеспыленного воздуха типа УОБГ (установка обеспылевания биологическая с горизонтальным потоком) обеспечивает очистку воздуха, подаваемого в рабочую зону, путем фильтрации на фильтрах грубой и тонкой очистки, встроенных в прибор (по мере загрязнения грубый фильтр промывается, тонкий сменяется). Прибор имеет встроенные источники освещения, УФ облучения (для стерилизации рабочей зоны в перерывах между использованием бокса) и регулятор скорости воздушного потока.
Организация ламинар-боксов с вертикальным и наклонным потоком обеспыленного воздуха типов УОБВ и УОБН аналогична организации ламинар-бокса с горизонтальным потоком, описанной выше.
Ламинар-бокс для работ с потенциально патогенными культурами типа БП-4004 («Бокс-Р») имеет некоторые отличия. В приборе обеспечивается рециркуляция воздушного потока, заключающаяся в том, что воздух из рабочего объема попадает на специальный фильтр тонкой очистки, откуда часть его выходит в окружающее пространство, а остальной поток повторно проходит через фильтр тонкой очистки и вновь поступает в рабочий объем. Этим достигается невозможность выноса обрабатываемого материала в помещение. Возможность попадания выходящего воздуха на оператора предотвращается созданием зоны подсоса на открытой стороне рабочего объема бокса. Прибор имеет встроенные источники света и УФ облучения, столешницу из нержавеющей стали. Передняя часть рабочего объема закрыта прозрачным стеклом, перемещаемым по высоте. Бокс снабжен системой регулирования скорости потока воздуха и индикаторами загрязнения фильтра тонкой очистки.
Перечисленные выше типы ламинар-боксов предназначены для размещения в любых производственных помещениях, имеющих приточную вентиляцию с грубой предварительной очисткой воздуха.