7Каковы особенности хламидий, микоплазм и риккетсий?

Биологические особенности хламидий. имеют вид маленьких кокков

Хламидии относятся к патогенным облигатным внутриклеточным микроорганизмам. Хламидии имеют все основные признаки бактерий: размножаются простым делением, содержат два типа нуклеиновых кислот (РНК и ДНК), рибосомы, мурамовую кислоту (как и грамотрицательные бактерии), сохраняют морфологию на протяжении всего жизненного цикла, имеют общий родоспецифический антиген. Отличительной особенностью хламидий является двухфазный жизненный цикл.

1 форма: вегетативно размножающиеся крупных неинфекционные клетки - ретикулярные телца - РТ. Элементарные тельца адаптированы к внеклеточному выживанию, метаболически мало активны, имеют прочную клеточную стенку, высокочувствительны к антибиотикам.

2 форма: небольшие плотные спороподобные элементарные тельца(ЭТ) - инфекционная форма микроорганизма. Ретикулярные тельца обладают высокой метаболической активностью, синтезируют нуклеиновые кислоты и белки. Это высоко лабильные формы, неспособные выжить вне эукариотной клетки. К антибиотикам элементарные тельца практически не восприимчивы. Цикл развития продолжается 40-72 часа.Эти две различные формы хламидий прекрасно адаптированы к условиям существования как внутри, так и вне клетки. Совокупность двух фаз внутриклеточного развития и внеклеточного существования составляет жизненный цикл хламидий.Хламидии паразитируют в базальных клетках столбчатого, возможно переходного и плоского эпителия. Они не являются нормальными представителями микрофлоры человека. Обнаружение их указывает на наличие инфекционного процесса. Отсутствие клинических симптомов обусловлено лишь временным равновесием между паразитом и хозяином в условиях, ограничивающих размножение патогенного организма. Наличие микробных ассоциаций способствует не только лучшей адаптации хламидий к внутриклеточному паразитированию, но усиливает патогенные свойства каждого их сочленов (гарднерелл, гонококков, трихомонад, энтерококков), что приводит к большей сопротивляемости к антибиотикам.

Микоплазмы — мелкие прокариоты, лишённые истинной клеточной стенки и не способные синтезировать её компоненты. Функции клеточной стенки у микоплазм выполняет трёхслойная ЦПМ. Микоплазмы отличает полиморфизм, обусловленный отсутствием ригидной клеточной стенки. Микоплазмы образуют кокковидные, ветвящиеся, крупные многоядерные формы, а также псевдомицелий, обусловливающий их название По Граму окрашиваются отрицательно, но лучшие результаты даёт окраска по Романовскому-Гимзе.

Риккетсии сначала были классифицированы как особая группа микроорганизмов, занимающих промежуточное положение между бактериями и вирусами и обладающих свойствами, характерными для обоих типов возбудителей. риккетсии являются облигатными внутриклеточными паразитами, рост и размножение которых происходят в клетках подходящего хозяина. Вследствие тесной связи жизненного цикла внутриклеточно паразитирующих бактерий с зараженными клетками хламидии и риккетсиидолгое время считали крупными вирусами.От вирусов хламидии и риккетсии отличает ряд признаков, наличие РНК, ДНК и рибосом клеток прокариотического типа; наличие клеточной стенки бактериального типа; способность к самостоятельному синтезу нуклеиновых кислот, белков и липидов; наличие метаболически активных ферментов, в том числе сбраживающих углеводы; чувствительность к антибактериальным препаратам.

8 Метод приготовления мазков и техника простых методов окраски.

Окрашивание препаратов проводится с помощью красителей, которые можно разделить на позитивные (метиленовый синий, фуксин) и негативные (нигрозин). Позитивными называются красители, окрашивающие микроорганизмы и другие находящиеся на стекле фиксированные объекты, негативными - красители, заполняющие пространство, окружающее микроорганизмы, в результате чего последние становятся видимыми в виде силуэтов на фоне красителя; кислые (эозин, конго красный) и щелочные (гематоксилин, толуидиновый синий, азур). Кислые красители связываются с веществами, имеющими щелочную реакцию (например, цитоплазматическими белками). Щелочные - связываются с базофильными (кислыми) компонентами клеток (нуклеиновыми кислотами, рибосомами).

Основные цвета окрашивания могут быть следующими:

а) красный (основной фуксин, кислый фуксин, сафранин, конго-красный);

б) фиолетовый (генциановый фиолетовый, метиловый фиолетовый, кри­сталлический фиолетовый);

в) синий (метиленовый синий, толуидиновый синий, водный синий);

г) зеленый (малахитовый зеленый, бриллиантовый зеленый).

Способность клеток воспринимать различные красители отражает их тинкториальные свойства. Это определяется структурой и составом клеточной стенки.

Простыми методами окрашивания называют окрашивание препаратов каким-либо одним красителем. Чаще всего при этом используется фуксин, генциановый фиолетовый, метиленовый синий.

9 Техника окраски мазков по Граму

Наибольшее значение для идентификации имеет использование сложных (дифференцирующих) методов, в первую очередь метода Грама, позволяющего различить: грамположительные грамотрицательные бактерии. При окраске этим методом грамположительные бактерии окрашиваются в сине-фиолетовый цвет, а грамотрицательные – в бордово-красный, что отражает различия в строении клеточных стенок бактерий двух групп. На основании результатов микроскопии окрашенных по методу Грама препаратов из патологического материала можно ориентировочно судить о составе микрофлоры и степени микробной обсемененности материала, что позволяет выбрать более адекватные методы и средства диагностики и начальной антимикробной терапии. Так, например, при обнаружении стрептококков препаратом выбора должен быть пенициллин. Результаты параллельного выделения и идентификации возбудителя с дальнейшим определением чувствительности уточняют сделанный выбор. ОкрашиваниепоГраммы 1. Фиксированный мазок окрашивают карболовым раствором генцианового фиолетового в течение 1-2 минут.

2. В течение 1 минуты обрабатывают мазок раствором Люголя.

3. Обесцвечивают спиртом 10-20 сек.

4. Промывают водой.

5. Докрашивают мазок водным раствором фуксина 1-2 минуты.

11Техника окраски мазков по Цилю-Нильсену. методов часто используют окраску по Цилю–Нильсену, позволяющую выявить кислотоустойчивые формы бактерии (Mycobacterium spp., Nocardia spp.) и споры (покоящиеся формы). Например, микобактерии туберкулеза окрашиваются в красный цвет, а некислотоустойчивые клетки – в синий. 1Мазок окрашивают карболовым фуксином Циля (основной краситель) при нагревании 3-5 мин.2. Обесцвечивают раствором серной кислоты (дифференцирующее вещество) в течение 1-2 мин.3. Промывают водой.4. Докрашивают 3-5 мин метиленовым синим (дополнительный краситель).

12 Техника окраски мазков по Нейссеру.Метод Нейссера используется для выявления зерен волютина.