Градуировочная шкала для определения витамина с в условиях проведения измерений
Стандартный образец: ГСО Витамин С (аскорбиновая кислота), чистота 99%
Исходный раствор: 10,000 мг растворяют в 10 мл дистиллированной воды
Калибровочные растворы готовят путём разбавления исходного раствора 1:2 и 1:4
Таблица 2
Градуировочная прямая для определения витамина С
Концентрация, мг/мл |
Площадь пика, mAU*min |
Высота пика, mAU |
0 0,25 0,50 1,00 |
0 377,8714 610,2279 975,3084
|
0 1539,943 2437,366 3252,406 |
Рис 2. Градуировочный график и уравнение регрессии для определения концентрации витамина С по площади хроматографического пика
Примечание - данные для построения калибровочного графика и расчёта концентраций испытуемых растворов справедливы только при условиях хроматографирования, использованных в настоящем методе исследования.
Глава 4. Анализ тест – образцов
В качестве тест-объектов для оценки точности и воспроизводимости метода были использованы таблетированные формы витаминов.
Витамин С – таблетка аскорбиновая кислота с глюкозой, концентрация аскорбиновой кислоты – 100 мг в таблетке.
Витамин В6 – таблетка мультивитаминов, концентрация витамина В6 (пиридоксина гидрохлорида) – 5 мг в таблетке.
Подготовка образцов к анализу
Таблетки, содержащие витамины тщательно растирают в фарфоровой ступке и растворяют в 100 мл дистиллированной воды. Концентрации витаминов в испытуемых растворах:
Витамин С 1 мг/мл, Витамин В6 – 0,05 мг/мл.
Определение содержания витамина С в испытуемом растворе
Условия измерения
Колонка: Acclaim® C18, 3мкм, 120 Ǻ, 2,1×210 |
Время удерживания |
Элюент: ацетонитрил : вода 70%:30% (v/v) Скорость потока: 0,400 мл/мин Объем инъекции: 20 мкл Спектр поглощения: 265 нм |
Витамина С: 0,37 – 0,40 мин Давление в колонке: в начале измерения: 158 бар в конце измерения: 159 бар |
Результаты измерений
Измерения проводили в трех кратной повторности. Полученные данные и статистическая обработка результатов приводятся в таблице 3.
Таблица 3
Результаты измерений содержания витамина с в испытуемом тест-растворе
Площадь пика, mAU*min |
Концентрация витамина С по калибровочному графику |
Содержание витамина С в таблетке |
973,436 |
0,99 |
99,00 |
Определение содержания витамина В6 в испытуемом растворе
Условия измерения
Колонка: Acclaim® C18, 3мкм, 120 Ǻ, 2,1×210 |
Время удерживания |
Элюент: ацетонитрил : вода 70%:30% (v/v) Скорость потока: 0,300 мл/мин Объем инъекции: 20 мкл Спектр поглощения: 261 нм |
Витамина В6: 1,37 – 1,40 мин Давление в колонке: в начале измерения: 121 бар в конце измерения: 121 бар |
Результаты измерений
Измерения проводили в трех кратной повторности. Полученные данные и статистическая обработка результатов приводятся в таблице 4.
Таблица 4