Вопрос44.

Для приготовления препарата на обезжиренное предметное стекло наносят каплю воды или изотонического раствора хлорида натрия, в которую петлей вносят исследуемый материал и распределяют его таким образом ,чтобы получить тонкий и равномерный мазок диаметром около 1-1,5 см, только при таком распределении материала в мазке можно увидеть изолированные бактериальные клетки. Если материал содержится в жидкой среде, то петлей его непосредственно наносят на предметное стекло и готовят мазок. Мазки высушивают на воздухе или в струе теплого воздуха над пламенем горелки. Для фиксации мазка предметное стекло(мазком вверх) медленно проводят 3 раза( в течение 3 с) через пламя горелки. Микроорганизмы при фиксации погибают,плотно прикрепляясь к поверхности стекла, и не смываются при дальнейшей обработке. Более длительное нагревание может вызвать деформацию клеточных структур. Мазкт крови, мазки-отпечатки оргайов и тканей и в некоторых случаях мазки из культур микроорганизмов фиксируют погружением на 5-20 мин в метиловый или этиловый спирт, смесь Никифорова, сулемовый спирт или другие фиксированные жидкости. Окраска по Граму в модификации А. И. Синева . Заготовляют полоски фильтровальной бумаги, пропитанной 1%ным спиртовым раствором кристаллвиолета и высушенной. На препарат накладывают такую полоску (меньше предметного стекла) и набивают 2—3 капли воды. Окрашивание длится 2 мин, после чего снимают фильтровальную бумагу пинцетом и наливают 3—4 капли раствора Люголя, выдерживая препарат 1 мин. Затем его обесцвечивают спиртом и окрашивают разведенным фуксином з течение 0,5—1 мин. Фуксин сливают, мазок промывают водой и просушивают препарат фильтровальной бумагой

Вопрос45.

Приготовить фиксированный препарат из гноя,окрасить его соответствующим методом, микроскопировать и дать характеристику.

Для препаратов из гноя применяется окраска по Граму или по Цилю-Нельсену.

Окраска по Граму:

1 .На фиксированный мазок наносят раствор генцианового фиолетового через полоску фильтровальной бумаги. Через 1-2 мин ее снимают,краситель сливают. 2.Наносят р-р Люголя на 1-2 мин 3.Обесцвечивают спиртом и быстро смывают водой.

4,Докрашивают мазок водным р-ом фуксина в течение 1-2 мин ,промывают водой, высушивают .микроскопируют.

Окраска по Цилю-Нельсену:

1. Ha фиксированный мазок наносят карболовый р-р фуксина через полоску фильтровальной бумаги и подогревают до появления паров в течение 3-5 мин

   2. Снимают бумагу,промывают мазок водой

      3. На мазок наносят 5%р-р серной к-ты или 3% р-р солянокислого спирта на 1-2 мин для обесцвечивания.Промывают водой.

         4. Докрашивают водным р-ом метиленового синего в течение 3-5 мин

Вопрос46.

Для приготовления препарата на обезжиренное предметное стекло наносят каплю

воды или изотонического раствора хлорида натрия, в которую петлей вносят исследуемый материал(испражнения) и распределяют его таким образом ,чтобы получить тонкий и равномерный мазок диаметром около 1-1.5 см, только при таком распределении материала в мазке можно увидеть изолированные бактериальные клетки.Если исследуемый материал содержится в жидкой среде то петлей его непосредственно наносят на предметное стекло и готовят мазок.Мазки высушивают на воздухе или в струе теплого воздуха над пламенем горелки.Для фиксации мазка предметное стекло(мазком вверх) медленно проводят 3 раза через пламя горелки.Микробы при фиксации погибают. Плотно прикрепляясь к поверхности стекла и не смываются при дальнейшей обработке.Далее окрашивают по Граму.Микроскопируем.