Gistologia_Uchebnik_Afanasyev

Среди лимфоцитов различают три основных функциональных класса: В-лимфоциты, Т-лимфоциты и нулевые лимфоциты.

В-лимфоциты впервые были обнаружены в фабрициевой сумке птиц (bursa Fabricius), поэтому и получили соответствующее название. Они обра­ зуются у эмбриона человека из стволовых клеток — в печени и костном мозге, а у взрослого — в костном мозге. В-лимфоциты составляют около 30 % циркулирующих лимфоцитов. Их главная функция — участие в выра­ ботке антител, т. е. обеспечение гуморального иммунитета. Плазмолемма В- лимфоцитов содержит множество иммуноглобулиновых рецепторов. При действии антигенов В-лимфоциты способны к пролиферации и дифферен­ цировке в плазмоциты — клетки, способные синтезировать и секретировать защитные белки — и м м у н о г л о б у л и н ы (Ig), которые поступают в кровь, обеспечивая гуморальный иммунитет.

Т-лимфоциты, или тимусзависимые лимфоциты, образуются из стволовых клеток костного мозга, а созревают в тимусе (вилочковая железа), что и обусловило их название. Они преобладают в популяции лимфоцитов, со­ ставляя около 70 % циркулирующих лимфоцитов. Для Т-клеток, в отличие от В-лимфоцитов, характерен низкий уровень поверхностных иммуноглобу­ линовых рецепторов в плазмолемме. Но Т-клетки имеют специфические ре­ цепторы, способные распознавать и связывать антигены, участвовать в им­ мунных реакциях. Основными функциями Т-лимфоцитов являются обеспе­ чение реакций клеточного иммунитета и регуляция гуморального иммуни­ тета (стимуляция или подавление дифференцировки В-лимфоцитов).

Т-лимфоциты способны к выработке лимфокинов, которые регулируют деятельность В-лимфоцитов и других клеток в иммунных реакциях. Среди Т-лимфоцитов выявлено несколько функциональных групп: Т-хелперы, Т- супрессоры, Т-киллеры. Подробную характеристику В-лимфоцитов и различ­ ных групп Т-лимфоцитов, их участие в реакциях иммунитета. Нулевые лим­ фоциты не имеют поверхностных маркеров на плазмолемме, характерных для В- и Т-лимфоцитов. Их расценивают как резервную популяцию недиф­ ференцированных лимфоцитов.

В настоящее время оценка иммунного статуса организма в клинике про­ водится с помощью иммунологических и иммуноморфологических методов выявления различных видов лимфоцитов.

Продолжительность жизни лимфоцитов варьирует от нескольких недель до нескольких лет. Т-лимфоциты являются "долгоживущими" (месяцы и го­ ды) клетками, а В-лимфоциты относятся к "короткоживущим" (недели и месяцы).

Для Т-лимфоцитов характерно явление рециркуляции, т. е. выход из крови в ткани и возвращение по лимфатическим путям снова в кровь. Та­ ким образом они осуществляют иммунологический надзор за состоянием всех органов, быстро реагируя на внедрение чужеродных агентов.

Среди клеток, имеющих морфологию малых лимфоцитов, следует на­ звать циркулирующие стволовые клетки крови (СКК), которые поступают в кровь из костного мозга. Впервые эти клетки были описаны А. А. Макси­ мовым и обозначены им как "подвижный мезенхимный резерв". Из СКК, поступающих в кроветворные органы, дифференцируются различные клет­ ки крови, а из СКК, поступающих в соединительную ткань, — тучные клет­ ки, фибробласты и др.

Моноциты (monocytus). В капле свежей крови эти клетки лишь немного

182

ного мозга, способностью прикрепляться к поверхности стекла, активно­ стью пиноцитоза и иммунного фагоцитоза, наличием на мембране рецепто­ ров для иммуноглобулинов и комплемента. Моноциты циркулирующей крови представляют собой подвижный пул относительно незрелых клеток, находящихся на пути из костного мозга в ткани. Время пребывания моно­ цитов в крови варьирует от 36 до 104 ч.

Моноциты, выселяющиеся в ткани, превращаются в макрофаги, при этом у них появляются большое количество лизосом, фагосом, фаголизосом (рис. 73).

Кровяные пластинки

Кровяные пластинки, тромбоциты (thrombocytus), в свежей крови чело­ века имеют вид мелких бесцветных телец округлой, овальной или веретено­ видной формы размером 2—4 мкм. Они могут объединяться (агглютиниро­ вать) в маленькие или большие группы. Количество их в крови человека ко­ леблется от 2,0 • 109/л до 4,0 • 109/л. Кровяные пластинки представляют со­ бой безъядерные фрагменты цитоплазмы, отделившиеся от мегакариоцитов — гигантских клеток костного мозга.

Тромбоциты в кровотоке имеют форму двояковыпуклого диска. При ок­ раске мазков крови азур II-эозином в кровяных пластинках выявляются бо­ лее светлая периферическая часть — гиаломер и более темная, зернистая часть — грануломер, структура и окраска которых могут варьировать в зави­ симости от стадии развития кровяных пластинок. В популяции тромбоци­ тов находятся как более молодые, так и более дифференцированные и ста­ реющие формы. Гиаломер в молодых пластинках окрашивается в голубой цвет (базофилен), а в зрелых — в розовый (оксифилен).

Впопуляции тромбоцитов различают 5 основных видов кровяных пластинок:

1)юные — с голубым (базофильным) гиаломером и единичными азурофильными гранулами в грануломере красновато-фиолетового цвета (1—5 %); 2) зрелые — со

слабо-розовым (оксифильным) гиаломером и хорошо развитой азурофильной зерни­ стостью в грануломере (88 %); 3) старые — с более темным гиаломером и грануломером (4 %); 4) дегенеративные — с серовато-синим гиаломером и плотным темнофиолетовым грануломером (до 2 %); 5) гигантские формыраздражения — с розовато­ сиреневым гиаломером и фиолетовым грануломером, размером 4—6 мкм (2 %). Мо­ лодые формы тромбоцитов крупнее старых.

При заболеваниях соотношение различных форм тромбоцитов может из­ меняться, что учитывается при постановке диагноза. Повышение количест­ ва юных форм наблюдается у новорожденных. При онкологических заболе­ ваниях увеличивается число старых тромбоцитов.

П л а з м о л е м м а имеет толстый слой гликокаликса (15—20 нм), образу­ ет инвагинации с отходящими канальцами, также покрытыми гликокалик­ сом. В плазмолемме содержатся гликопротеины, которые выполняют функ­ цию поверхностных рецепторов, участвующих в процессах адгезии и агрега­ ции кровяных пластинок (рис. 74).

Гликопротеин PIb является рецептором для находящегося в плазме фак­ тора фон Виллебранда (vWF) — одного из ключевых механизмов свертыва­ ния крови. Гликопротеин РПЬ—111а является рецептором фибриногена и участвует в агрегации кровяных пластинок в процессе свертывания крови.

185

Рис. 74. Ультрамикроскопическое строение тромбоцита (кровяной пластинки) (по

Н.А. Юриной).

А— горизонтальный срез; Б — поперечный срез. 1 — плазмолемма с гликокаликсом; 2 — от­ крытая система каналов, связанная с инвагинациями плазмолеммы; 3 — актиновые филаменты; 4 — циркулярные пучки микротрубочек; 4а — микротрубочки в поперечном разрезе; 5 — плотная тубулярная система; 6 — а-гранулы; 7 — р-гранулы; 8 — митохондрии; 9 — гранулы

гликогена; 10 — гранулы ферритина; 11 — лизосомы; 12 — пероксисомы.

Ц и т о с к е л е т в тромбоцитах хорошо развит и представлен актиновыми микрофиламентами и пучками (по 10—15) микротрубочек, расположенны­ ми циркулярно в гиаломере и примыкающими к внутренней части плазмо­ леммы. Элементы цитоскелета обеспечивают поддержание формы кровяных пластинок, участвуют в образовании их отростков. Актиновые филаменты участвуют в сокращении объема (ретракции) образующихся кровяных тром­ бов.

В кровяных пластинках имеется д ве с и с т е м ы к а н а л ь ц е в и т р у ­ бочек, хорошо видных в гиаломере при электронной микроскопии. Пер­ вая — это открытая система каналов, связанная, как уже отмечалось, с ин­ вагинациями плазмолеммы. Через эту систему выделяется в плазму содер­ жимое гранул кровяных пластинок и происходит поглощение веществ. Вто­ рая — это так называемая плотная тубулярная система, которая представле­ на группами трубочек с электронно-плотным аморфным материалом. Она имеет сходство с гладкой эндоплазматической сетью, образуется в аппарате Гольджи. Плотная тубулярная система является местом синтеза циклоксигеназы и простагландинов. Кроме того, эти трубочки селективно связывают двухвалентные катионы и являются резервуаром ионов Са2+. Вышеназван­ ные вещества являются необходимыми компонентами процесса свертыва­ ния крови.

186

Выход Са2+ из трубочек в цитозоль необходим для обеспечения функционирова­ ния кровяных пластинок (адгезия, агрегация и др.). Циклооксигеназа метаболизирует арахидоновую кислоту и образование из нее простагландинов и тромбоксана А2, которые секретируются из пластинок и стимулируют их агрегацию в процессе коагу­ ляции крови.

При блокаде циклооксигеназы (ацетилсалициловой кислотой и др.) агре­ гация тромбоцитов тормозится, что используют в медицинской практике для профилактики образования тромбов.

В г р а н у л о м е р е выявлены органеллы, включения и специальные гра­ нулы. Органеллы представлены рибосомами (в молодых пластинках), эле­ ментами эндоплазматической сети аппарата Гольджи, митохондриями, лизосомами, пероксисомами. Имеются включения гликогена и ферритина в виде мелких гранул.

Специальные гранулы в количестве 60—120 составляют основную часть грануломера и представлены двумя главными типами. Первый тип: а-грану- лы — это самые крупные (300—500 нм) гранулы, имеющие мелкозернистую центральную часть, отделенную от окружающей мембраны небольшим свет­ лым пространством. Они содержат различные белки и гликопротеины, при­ нимающие участие в процессах свертывания крови, факторы роста, литические ферменты.

К наиболее важным б е л ка м , секретируемым при активации тромбоцитов, отно­ сятся фактор пластинок 41, p-тромбоглобин, фактор фон Виллебранда, фибриноген, факторы роста (тромбоцитарный PDGF, трансформирующий TGFp), фактор свер­ тывания — тромбопластин; к г л и к о п р о т е и н а м относятся фибронектин и тромбоспондин, играющие важную роль в процессах адгезии тромбоцитов. К белкам, связывающим гепарин (разжижает кровь, препятствует свертыванию), относятся фактор 4 и р-тромбоглобулин.

Кроме того, в а-гранулах содержатся литические ферменты, характерные для лизосом, — кислая фосфатаза, катепсин, р-глюкуронидаза.

В т о р о й т и п г р а н у л — 5-гранулы (дельта-гранулы) — представлен плотными тельцами размером 250—300 нм, в которых имеется эксцентрич­ но расположенная плотная сердцевина, окруженная мембраной. Между криптами хорошо выражено светлое пространство. Главными компонента­ ми гранул являются серотонин, накапливаемый из плазмы, и другие биоген­ ные амины (гистамин, адреналин), Са2+, АДФ, АТФ в высоких концентра­ циях.

Кроме того, имеется т р е т и й т и п м е л к и х г р а н у л (200—250 нм), представленный лизосомами (иногда называемыми ^-гранулами), содержа­ щими лизосомные ферменты, а также микропероксисомами, содержащими фермент пероксидазу.

Содержимое гранул при активации пластинок выделяется по открытой системе каналов, связанных с плазмолеммой.

Основная функция кровяных пластинок — участие в процессе с в е р т ы ­ в а н и я к р о в и — защитной реакции организма на повреждение и предот­ вращение потери крови. В тромбоцитах содержится около 12 факторов, уча­ ствующих в свертывании крови. При повреждении стенки сосуда пластинки

1Факторы свертывания крови, находящиеся в пластинках, обозначают арабскими цифрами 1, 2, 3 и т. д.

187

быстро агрегируют, прилипают к образующимся нитям фибрина, в результате чего формируется тромб, закрывающий рану. В процессе тромбообразования наблюдается несколько этапов с участием многих компонентов крови.

На п е р в о м э т а п е происходят скопление тромбоцитов и выход физиологиче­ ски активных веществ; на в т о р о м э т а п е — коагуляция и остановка кровотече­ ния (гемостаз). Этот этап имеет 3 основные фазы изменений. В п е р в о й ф а з е происходит образование активного тромбопластина из тромбоцитов (внутренний

рин формирует нити с поперечной исчерченностью (толщина полос 25 нм). Для всех фаз свертывания крови необходим Са2+. Наконец, на последнем, третьем этапе на­ блюдается ретракция кровяного сгустка, связанная с сокращением нитей актина в отростках тромбоцитов и нитей фибрина. Рассасывание тромба (фибринолиз) про­ исходит под влиянием ферментов антисвертывающих систем крови. В гиаломере кро­ вяных пластинок, помимо актина, содержится фактор ретракции кровяного сгустка.

Морфологически на первом этапе происходит адгезия тромбоцитов на базальной мембране и на коллагеновых волокнах поврежденной сосудистой стенки, в результате которой образуются отростки тромбоцитов и на их по­ верхность из пластинок через систему трубочек выходят гранулы, содержа­ щие тромбопластин. Он активирует реакцию превращения протромбина в тромбин, а последний влияет на образование из фибриногена фибрина. За­ тем в сгусток, состоящий из тромбоцитов и фибрина, проникают фибробласты и капилляры и происходят замещение сгустка соединительной тканью и его ретракция.

При ретракции сгустка сокращается его объем до 10 % от первоначального, изме­ няется форма пластинок (дисковидная становится шаровидной), наблюдаются раз­ рушение пограничного пучка микротрубочек, полимеризация актина, появление многочисленных миозиновых филаментов, формирование актомиозиновых ком­ плексов, обеспечивающих сокращение сгустка. Отростки активированных пластинок вступают в контакт с нитями фибрина и втягивают их в центр тромба. В организме существуют и противосвертывающие системы. Известно, что мощным антикоагу­ лянтом является гепарин, вырабатываемый тучными клетками. Уменьшение сверты­ вания крови отмечается при ряде заболеваний. Усиление свертывания крови обу­ словливает образование тромбов в кровеносных сосудах, например при атеросклеро­ зе, когда изменены рельеф и целостность эндотелия. Уменьшение числа тромбоци­ тов (тромбоцитопения) приводит к снижению свертываемости крови и кровотечени­ ям. При наследственном заболевании гемофилии имеют место дефицит и наруше­ ние образования фибрина из фибриногена.

Важной функцией тромбоцитов является их участие в метаболизме серо­ тонина. Тромбоциты — это практически единственные элементы крови, в которых из плазмы накапливаются резервы серотонина. Связывание тром­ боцитами серотонина происходит с помощью высокомолекулярных факто­ ров плазмы крови и двухвалентных катионов с участием АТФ.

В процессе свертывания крови из разрушающихся тромбоцитов высвобождается серотонин, который действует на сосудистую проницаемость и сокращение гладко­ мышечных клеток сосудов. Серотонин и продукты его метаболизма обладают проти­ воопухолевым и радиозащитным действием. Торможение связывания серотонина тромбоцитами обнаружено при ряде заболеваний крови — злокачественном мало­ кровии, тромбоцитопенической пурпуре, миелозах и др.

188

Продолжительность жизни тромбоцитов — в среднем 9—10 дней. Ста­ реющие тромбоциты фагоцитируются макрофагами селезенки. Усиление разрушающей функции селезенки может быть причиной значительного снижения числа тромбоцитов в крови (тромбоцитопения). Для устранения этого требуется операция — удаление селезенки (спленэктомия).

При снижении числа кровяных пластинок, например при кровопотере, в крови накапливается тромбопоэтин — гликопротеид, стимулирующий обра­ зование пластинок из мегакариоцитов костного мозга.

Гемограмма. Лейкоцитарная формула

В медицинской практике анализ крови играет большую роль. При клини­ ческих анализах исследуют химический состав крови, определяют количество эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, резистентность эритроцитов, быстро­ ту их оседания — скорость оседания эритроцитов (СОЭ) и др. У здорового человека форменные элементы крови находятся в определенных количествен­ ных соотношениях, которые принято называть гемограммой, или формулой крови. Важное значение для характеристики состояния организма имеет так называемый дифференциальный подсчет лейкоцитов. Определенные про­ центные соотношения лейкоцитов называют лейкоцитарной формулой.

Возрастные изменения крови

Число эритроцитов в момент рождения и в первые часы жизни выше, чем у взрослого человека, и достигает 6,0—7,0 • 10|2/л. К 10—14 сут оно рав­ но тем же цифрам, что и во взрослом организме. В последующие сроки происходит снижение числа эритроцитов с минимальными показателями на 3—6-м месяце жизни (физиологическая анемия). Число эритроцитов стано­ вится таким же, как и во взрослом организме, в период полового созрева­ ния. Для новорожденных характерно наличие анизоцитоза (разнообразие размеров) с преобладанием макроцитов, увеличенное содержание ретикулоцитов, а также присутствие незначительного числа ядросодержащих пред­ шественников эритроцитов.

Число лейкоцитов у новорожденных увеличено и достигает 10,0— 30,0 • 109/л.

В течение 2 нед после рождения число их падает до 9,0—15,0 • 109/л. Ко­ личество лейкоцитов достигает к 14—15 годам уровня, который сохраняется у взрослого. Соотношение числа нейтрофилов и лимфоцитов у новорожден­ ных такое же, как и у взрослых, — 4,5—9,0 • 109/л. В последующие сроки со­ держание лимфоцитов возрастает, а нейтрофилов падает, и, таким образом, к 4-м суткам количество этих видов лейкоцитов уравнивается ( п е р в ы й ф и з и о л о г и ч е с к и й п е р е к р е с т лейкоцитов). Дальнейший рост числа лимфоцитов и падение нейтрофилов приводят к тому, что на 1—2-м году жизни лимфоциты составляют 65 %, а нейтрофилы — 25 %. Новое сниже­ ние числа лимфоцитов и повышение нейтрофилов приводят к выравнива­ нию обоих показателей у 4-летних детей ( в т о р о й ф и з и о л о г и ч е с к и й пе р е к р е с т ) . Постепенное снижение содержания лимфоцитов и повыше­ ние нейтрофилов продолжаются до полового созревания, когда количество этих видов лейкоцитов достигает нормы взрослого.

189

в печени достигает максимума через 5 мес и завершается перед рождением. СКК печени заселяют тимус (здесь, начиная с 7—8-й недели, развиваются Т-лимфоциты), селезенку (гемопоэз начинается с 12-й недели) и лимфати­

мозге, где гемопоэз начинается с 10-й недели и постепенно нарастает к ро­ ждению, а после рождения костный мозг становится центральным органом гемопоэза.

Кроветворение в стенке желточного мешка. У человека оно начинается в конце 2-й — начале 3-й недели эмбрионального развития. В мезенхиме стенки желточного мешка обособляются зачатки сосудистой крови, или кровяные островки. В них мезенхимные клетки округляются, теряют отрост­ ки и преобразуются в стволовые клетки крови. Клетки, ограничивающие кровяные островки, уплощаются, соединяются между собой и образуют эн­ дотелиальную выстилку будущего сосуда. Часть СКК дифференцируется в первичные клетки крови (бласты), крупные клетки с базофильной цитоплаз­ мой и ядром, в котором хорошо заметны крупные ядрышки (рис. 75, А, Б, В, Г). Большинство первичных кровяных клеток митотически делится и превращается в первичные эритробласты, характеризующиеся крупным раз­ мером (мегалобласты). Это превращение совершается в связи с накоплени­ ем эмбрионального гемоглобина в цитоплазме бластов, при этом сначала образуются полихроматофильные эритробласты, а затем оксифильные эрит­ робласты с большим содержанием гемоглобина. В некоторых первичных эритробластах ядро подвергается кариорексису и удаляется из клеток, в дру­ гих ядро сохраняется. В результате образуются безъядерные и ядросодержа­ щие первичные эритроциты, отличающиеся большим размером по сравне­ нию с нормоцитами и поэтому получившие название мегалоцитов. Такой тип кроветворения называется м е г а л о б л а с т и ч е с к и м . Он характерен для эмбрионального периода, но может появляться в постнатальном перио­ де при некоторых заболеваниях (злокачественное малокровие). Наряду с мегалобластическим в стенке желточного мешка начинается н о р м о б л а - с т и ч е с к о е к р о в е т в о р е н и е , при котором из бластов образуются вто­ ричные эритробласты; сначала они превращаются в полихроматофильные эритробласты, далее в нормобласты, из которых образуются вторичные эритроциты (нормоциты); размеры последних соответствуют эритроцитам (нормоцитам) взрослого человека (см. рис. 75, А). Развитие эритроцитов в стенке желточного мешка происходит внутри первичных кровеносных сосу­ дов, т. е. и н т р а в а с к у л я р н о . Одновременно экстраваскулярно из бла­ стов, расположенных вокруг сосудистых стенок, дифференцируется неболь­ шое количество гранулоцитов — нейтрофилов и эозинофилов. Часть СКК остается в недифференцированном состоянии и разносится током крови по различным органам зародыша, где происходит их дальнейшая дифференци­ ровка в клетки крови или соединительной ткани. После редукции желточ­ ного мешка основным кроветворным органом временно становится печень.

Кроветворение в печени. Печень закладывается примерно на 3—4-й неде­ ле эмбриональной жизни, а с 5-й недели она становится центром кроветво­ рения. Кроветворение в печени происходит э к с т р а в а с к у л я р н о , по хо­ ду капилляров, врастающих вместе с мезенхимой внутрь печеночных долек. Источником кроветворения в печени являются стволовые клетки крови, из которых образуются бласты, дифференцирующиеся во вторичные эритроци-

191