Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
7 тема. Изменчивость.doc
Скачиваний:
1
Добавлен:
01.03.2025
Размер:
80.9 Кб
Скачать

Тест Эймса на сальмонелле.

Для выявления мутагенов обычно используется тест Эймса Salmonella (микросомы и его различные модификации). Тест Эймса является одним из основных методов в скрининговых программах различных стран. Такое широкое применение этого метода связано с высокой корреляцией между канцерогенной и мутагенной активностями химических веществ. Сущность теста Эймса Salmonella (микросомы) заключается в использовании двух основных компонентов: регистрирующего и активирующего. Регистрирующую часть составляет набор индикаторных штаммов Salmonella typhimurium, способных регистрировать действие мутагенов, вызывающих как замены пар оснований в молекуле ДНК, так и сдвиг считывания генетического кода. Активирующий компонент включает постмитохондриальный супернатант гомогената печени крыс (фракция S-9) и кофакторы, необходимые для нормального функционирования микросомных систем окисления.

Метод Меллер- 5 и метод double yellow.

Для учета рецессивных летальных мутаций, сцепленных с полом, у дрозофилы широко применяют метод Меллер-5. Данный метод позволяет проводить количественный учет рецессивных летальных мутаций, возникающих в Х-хромосоме зрелых сперматозоидов самцов дрозофилы. Линия-анализатор Меллер-5 содержит в генотипе 2 инверсии, не влияющие на жизнеспособность мух. Инверсия sc8 захватывает большую часть Х-хромосомы, инверсия δ49 подавляет кроссинговер в средней части Х-хромосомы. Кроме того, линия Меллер-5 маркируется видимой мутацией, например, wa- apricot - абрикосовые глаза и B-Bar - полосковидные глаза.

Также этот метод можно использовать для регистрации рецессивных мутаций в Х-хромосоме с видимым проявлением. Для этой цели удобнее применять метод double yellow, основанный на скрещивании исследуемых самцов с самками, несущими сцепленные Х-хромосомы.

Ингибиторы мутагенеза (антимутагены). Внеклеточные и антиклеточные антимутагены.

Антимутагены, вещества, понижающие частоту мутаций, препятствующие мутагенному действию химических или физических агентов. А. условно можно разбить на 3 группы: 1) блокирующие действие автомутагенов, естественно возникающих в клетках в процессе метаболизма (антиавтомутагены), например фермент каталаза, который разрушает обладающую мутагенным действием перекись водорода. Эти А. обеспечивают сохранение определённого уровня спонтанных мутаций; 2) снижающие действие внешних, искусственных физических (ионизующей радиации и др.) или химических мутагенов. Такими А. являются сульфгидрильные соединения, сильные восстановители типа Na2S2O, некоторые спирты и углекислые соли. А. этих двух групп могут разрушать мутагены или конкурировать с важными в генетическом отношении структурами за взаимодействие с мутагеном, действовать как восстановители и т. д.; 3) ферментные системы, действующие непосредственно на уровне наследственных структур, т. е. «исправляющие» поврежденные мутагеном участки хромосомы. Мутационный эффект может быть также снят физическим воздействиями определённой интенсивности (светом, высокой и низкой температурой и др.).