Микроскопическое исследование окрашенных препаратов (Окраска по Паппенгейму)

На мазок наносят раствор краски-фиксатора Май — Грюнвальда на 3 мин. Затем препарат ополаскивают водой и заливают на 5—10 мин рабочим раствором краски Романовского, который готовят перед употреблением из расчета 1 капля краски Рома­новского на 1 мл дистиллированной воды. Препарат промывают проточной водой, высушивают и исследуют с использованием иммерсионной системы. Время окраски может быть изменено в зависимости от качества красителя.

В окрашенном препарате подсчитывают не менее 200 спер­матозоидов и выражают в процентах количество нормальных и патологических форм, количество клеток сперматогенеза. Моло­дые или незрелые формы сперматозоидов имеют вокруг головки и шейки остаток цитоплазмы («воротничок» или «капюшон»), наблюдаются при частых половых сношениях и неспособны к оплодотворению. В норме составляют не более 2%.

Старые формы сперматозоидов с гиперхромией, ахромией, вакуолизацией головки появляются в семенной жидкости после продолжительного полового воздержания и непригодны для оплодотворения. В нормальном эякуляте их не более 4%.

К патологическим формам относят сперматозоиды: макро-, микро-, конические головки, клювовидные, двуглавые с одной шей­кой и хвостом, с раздвоенными головками, без шейки, с утол­щенной, изогнутой шейкой, с несколькими хвостами, без акросомы или без ядра и др. У здоровых мужчин с нормальной спермой патологические формы сперматозоидов обычно не встречаются, но их количест­во при нормоспермии может достигать не более 20%. Среди па­тологических форм нормального эякулята 10—15% приходитс на патологию головки, 2—5% — тела, 2—9% — хвоста. При секреторной форме бесплодия выявляются спер­матозоиды с патологией головки и тела. Патология хвоста обычно экс­креторного происхождения возника­ет при прохождении сперматозоида по семявыносящим путям.

Клетки сперматогенеза в нор­мальной сперме составляют 0,5—2% по отношению к количеству спер­матозоидов. Сперматогонии в нор­ме не обнаруживаются, встречаются обычно сперматиды. При беспло­дии секреторного типа процент их значительно повышается, появля­ются более молодые клетки спер­матогенеза. Микроскопическое исследова­ние спермы выявляет следующие состояния: аспермия — отсутствие в сперме сперматозоидов и клеток сперматогенеза; азооспермия — от­сутствие сперматозоидов при нали­чии клеток сперматогенеза; астеноспермия — характеризуется сни­жением процента активноподвиж- ных сперматозоидов; олигозооспермия — уменьшение количества спер­матозоидов в 1 мл эякулята; тератоспермия — увеличение процента патологических форм спермато­зоидов; некроспермия — увеличение количества мертвых сперматозои­дов; акинезис — состояние, при ко­тором неподвижные сперматозоиды после «оживления» начинают дви­гаться.

Исследование секрета предстательной железы

Предстательная железа расположена у места выхода мочеис­пускательного канала из мочевого пузыря между лонным сочле­нением и прямой кишкой. Она состоит из 30—50 трубчато-альвеолярных железок. Выводные протоки простаты открываются в мочеиспускательный канал на перекрестке мочевыделительного и семявыносящего трактов, поэтому предстательная железа легко вовлекается в воспалительные процессы.

Основной функцией предстательной железы является выработка секрета, необходимого для поддержания жизнедеятельности сперма­тозоидов после эякуляции. У мужчин зрелого возраста простата продуцирует за сутки от 0,1 до 3 мл секрета. Отделяемое простаты получают путем массажа железы после 4—5-дневного полового воз­держания, после предварительного мочеиспускания, которое преду­преждает присоединение к секрету простаты отделяемого уретры.

Можно исследовать осадок мочи, полученной после массажа простаты, так как часто секрет затекает в мочевой пузырь.

Нормальный секрет предстательной железы — это густая вяз­кая мутная жидкость со специфическим запахом цветов каштана, обусловленным спермином. Химический состав секрета проста­ты весьма сложен. Реакция его слабощелочная (рН = 7,6—8,4).

Приготовление препаратов. Полученный секрет предварительно просматривают в нативном препарате, для чего каплю жидкости помещают на предметное стекло и покрывают покровным. Мо­чу, полученную после массажа простаты с целью исследования на элементы секрета простаты, центрифугируют, препараты го­товят из осадка. По необходимости готовят мазки и окрашивают их по Романовскому, метиленовым синим, по Граму и др.

Микроскопическое исследование. В нативном препарате в норме выявляется от 0 до 10 лейкоцитов в поле зрения. Количество их увеличивается при воспалительных процессах. Однако есть ука­зания, что на их увеличение влияет ряд факторов (техника массажа, примесь содержимого уретры, сексуальная активность и др.), что нужно учитывать при оценке количества лейкоцитов.

Эритроциты в нормальном секрете единичные, попадают при энергичном массаже предстательной железы. Увеличение коли­чества эритроцитов наблюдается при воспалительных процессах, новообразованиях.

Эпителиальные клетки в норме встречаются редко. Выводные протоки предстательной железы выстланы цилиндрическим и час­тично переходным эпителием. Десквамация эпителия резко уве­личивается при воспалительных процессах и опухолях. Эпителиоциты имеют вид круглых клеток с признаками жировой дис­трофии, встречаются вместе с лейкоцитами.

Амилоидные конкременты (тельца) представляют собой сгу­щенный секрет железы, имеют овальную или округлую форду, слоистое строение, желтоватого цвета с концентрической исчерченностью. Наличие их указывает на застой секрета в железе, что может иметь место при хронических воспалительных процессах, аденомах, гипертрофии предстательной железы у лиц пожилого возраста.

Липоидные тельца (лецитиновые зерна) — мелкие белесоватые преломляющие свет образования, специфический продукт секреции эпителия предстательной железы. Они придают секрету молочный вид. В нормальном секрете находятся в большом количестве. Умень­шение их количества наблюдается при простатитах. При злокачес­твенных опухолях число их резко уменьшается вплоть до полного исчезновения.

Кристаллы Бетхера напоминают по форме кристаллы Шарко — Лейдена. Окрашиваются в синий цвет при добавлении рас­твора Люголя. Появляются в секрете при простаторее.

При аденоме предстательной железы наблюдается ретенционный синдром (застой). В застоявшемся секрете выявляются макрофаги, многоядерные клетки типа инородных тел и амило­идные тельца, кристаллы холестерина.

При распаде опухоли простаты можно обнаружить элементы злокачественного новообразования, которые дифференцируются по характерным морфологическим признакам злокачественно­сти. Клетки чаще встречаются в виде комплексов. Исследуются препараты, окрашенные по Романовскому.

Лекция № 35 Лабораторное исследование жидкостей из серозных полостей, дифференциация экссудатов и транссудатов, диагностическое значение исследования.

К серозным полостям относят плевральную, брюшную по­лость, полость перикарда. Серозные полости представляют собой узкие щели, образованные покрывающими органы висцеральным и париетальным листками серозной оболочки. Серозные оболочки состоят из нескольких слоев эластических и коллагеновых воло­кон с кровеносными и лимфатическими сосудами; покрыты сло­ем мезотелиальных клеток, лежащих на базальной мембране. У здорового человека в полости плевры, брюшины, перикар­да имеется незначительное количество жидкости, которое только увлажняет покровы органов и способствует легкому скольжению их при дыхании, перистальтике, работе сердца. При некоторых патологических состояниях в этих полостях может накапливаться значительное количество жидкости.

Таблица 11

Отличительные признаки транссудатов и экссудатов

Свойства	Выпотнаяая жидкость
	транссудат	экссудат
Цвет	Лимонно-желтый	Лимонно-желтый, зеленова­то-желтый, бурый, желтый, буровато-красный, кровянис­тый, молочно-белый
Характер	Серозный	Серозный, серозно-гнойный, гнойный, гнилостный, гемор­рагический
Мутность	Прозрачный или слегка мут­новатый	Разная степень помутнения
Относительная плот­ность	< 1, 015	>1,015
Свертываемость	Не свертывается	Свертывается
Белок	< 30 г/л	> 30 г/л
Проба Ривальта	Отрицательная	Положительная
Клеточный состав	В основном лимфоциты, ме- зотелиальные клетки	Различные лейкоциты, мак­рофаги, мезотелий, частью в состоянии пролиферации (разное количество), эритро­циты, кристаллы холестери­на, липофаги, капли жира, элементы злокачественных новообразований
Бактериальный состав	Обычно стерилен	Микобактерии туберкулеза, стрептококки, стафилококки

В соответствии с существующей классификацией выпотные жидкости делят на экссудаты и транссудаты. Отдельно выделяют жидкость кистозных образований.

Транссудаты появляются вследствие разнообразных причин: изменения проницаемости сосудистых стенок; повышения внутрикапиллярного давления; расстройства местного и общего кро­вообращения (при сердечно-сосудистой недостаточности, цирро­зах печени; снижении онкотического давления в сосудах; нефротическом синдроме и др.). Обычно это прозрачная жидкость светло-желтого цвета слабощелочной реакции. Изменение цвета и прозрачности может наблюдаться в геморрагических и хилезных транссудатах. Относительная плотность жидкости колеблет­ся от 1,002 до 1,015, белок имеет концентрацию 5—25 г/л.

Экссудаты образуются в результате воспалительных процес­сов, вызываемых различными причинами. Это жидкость щелоч­ной реакции, относительная плотность которой выше 1,018, а кон­центрация белка более 30 г/л.

Экссудаты бывают серозные и серозно-фибринозные (при ревматических плевритах, плевритах и перитонитах туберкулез­ной этиологии), серозно-гнойные и гнойные (при бактериаль­ных плевритах и перитонитах), геморрагические (чаще всего при злокачественных новообразованиях, реже при инфаркте легкого, геморрагических диатезах, туберкулезе), хилезные (при затруд­нении лимфооттока через грудной проток вследствие сдавления опухолью, увеличенными лимфоузлами, а также разрыве лимфа­тических сосудов, обусловленном травмой или опухолью), холе­стериновые (застарелые, осумкованные выпоты, содержащие крис­таллы холестерина), гнилостные (при присоединении гнилостной флоры).

Выпотные жидкости получают путем пункции соответствую­щей полости. Полученный материал собирают в чистую сухую посуду. С целью предотвращения свертывания добавляют цитрат натрия из расчета 1 г на 1 л жидкости или раствор цитрата натрия (38 г/л) в соотношении 1 : 9.