Реакция иммунофлюоресценции

В реакции иммунофлюоресценции (РИФ) используют люминесцентную микроскопию для серологических исследований. Реакция основана на том, что иммунные сыворотки, к которым химическим путем присоединены флюорохромы, при взаимодействии с соответствующими антигенами образуют специфический светящийся комплекс, видимый в люминесцентном микроскопе. Такие сыворотки называются люминесцирующими. Метод высокочувствителен, прост, не требует выделения чистой культуры (можно обнаружить микроорганизмы непосредственно в материале от больного: кале при холере, мокроте при коклюше, мозговой ткани при бешен­стве). Результат можно получить через полчаса после нанесения на препарат люминесцирующей сыворотки. Поэтому РИФ широко применяют при экспресс (ускоренной)-диагностике ряда инфекций.

Опсонофагоцитарная реакция

Опсонофагоцитарная реакция (ОФР) является одним из методов оценки активности иммунного фагоцитоза. Чем эта активность выше, тем выше устойчивость организма к инфекции. В иммунном организме под влиянием антител (опсонинов) фагоцитоз протекает активнее (поглощается большее количество микробов в более короткий срок). Поэтому показатели фагоцитарной активности имеют не только диагностическое значение (например, при бруцеллезе), но и позволяют прогнозировать исход инфекционного процесса, оценивать результаты лечения и вакцинации. Для реакции необходимы:

1. Антиген — взвесь живых или убитых микроорганизмов.

1. Антитело (опсонины) — исследуемая сыворотка.

3. Фагоциты — обычно нейтрофилы исследуемой крови.

Реакции иммунитета in vivo (кожаные пробы)

При нанесении антигена на скарифицированную кожу или введении внутрикожно можно выявить как иммунное состояние, так и состояние повышенной чувствительности к данному препарату.

Кожная проба с токсином. Внутрикожно вводят оттит­рованное количество токсина. Если организм иммунен, т.e. обладает определенным уровнем антитоксина, действие токсина не проявится — произойдет нейтрализация токсина антитоксином. В неиммунном организме на месте введения токсина разовьется воспалительный инфильтрат (краснота, уплотнение и т. д.).

Кожные пробы с аллергеном (кожно-аллергические пробы) для изучения реакций повышенного типа. При повышенной чувствительности немедлен­го типа введенный аллерген (антиген) вступает в реакцию с антителами, адсорбированными на клетках различных органов. Повышенная чувствительность за­медленного типа обусловлена реакцией на аллерген сенсибилизированных Т-лимфоцитов. Такая сенсибилиза­ция бывает при ряде инфекций у больных, переболевших и привитых (туберкулез, бруцеллез и др.). Поэтому кожно-аллергические пробы при этих инфекциях имеют диагностическое значение.

Препараты для кожных проб готовят специальные производства, снабжая инструкцией по их применению.

Контрольные вопросы

1. Что такое инфекционный процесс?

2. Что такое патогенность и вирулентность?

3. Как дифференцируются экзо- и эндотоксины?

4. Каковы механизмы передачи возбудителей инфекций?

5. Какова роль макроорганизма и факторов внешней среды в возникновении и течении инфекционного процесса?

6. Какова динамика развития инфекционного заболевания?

7. Что такое иммунитет?

8. Какие Вы знаете формы иммунитета?

9. Что такое неспецифические факторы защиты?

10. Какие факторы препятствуют проникновению патогенных микро­организмов через кожу и слизистые оболочки?

11. Что такое фагоцитоз?

12. Какие стадии фагоцитоза Вы знаете?

13. Что такое завершенный и незавершенный фагоцитоз?

14. Что такое гуморальные факторы неспецифической защиты?

15. Какие гуморальные факторы неспецифической защиты Вы знаете?

16. Что такое антигены?

17. Каковы основные свойства антигенов?

18. Какие антигены микробной клетки Вы знаете?

19. Что такое антитела?

20. Какие Вы знаете классы иммуноглобулинов?

21. Какова роль макрофагов в иммунном ответе?

22. Какова роль Т-лимфоцитов и В-лимфоцитов в иммунном ответе?

23. Как образуются антитела?

24. Какие Вы знаете теории образования антител?

25. Каков механизм взаимодействия антигена с антителом?

26. Что такое реакции иммунитета, каковы их основные свойства?

27. Какие компоненты участвуют в серологических реакциях?

28. Поче­му реакции называют серологическими, из скольких фаз они состоят?

29. Что такое реакция агглютинации?

30. Каким антигеном пользуются при исследовании сыворотки больного? Какой сывороткой определяют вид неизвестного микроба?

31. Что такое О- и Н-агглютинация?

32. О чем свидетельствует положительный результат РГА между эритроцитами и исследуемым на наличие вируса материалом?

33. Произойдет ли агглютинация эритроцитов, если к ним добавить вирус и соответствующую ему сыворотку? Как называется реакция, выявляющая этот феномен?

34. В чем основное различие между реакцией агглютинации и преципитации?

35. Почему нельзя применять мутные ингредиенты в реакции преци­питации?

36. Какая реакция произойдет при взаимодействии эритроцитов с гомоло­гичной иммунной сывороткой в отсутствии комплемента?

37. В чем состоит принцип РСК? Какие системы участвуют в РСК?

38. На каком свойстве антител основана ОФР? Специфична ли эта реакция?

39. Что является антителом в кожной пробе с токсином? О чем свидетельствует отрицательный результат этой пробы?

40. Какая реакция позволяет выявить состояние повышенной чувствительности организма к инфекционному агенту?

32