
- •1. Цитологические основы универсальности законов наследования
- •2. Химический состав и структура хромосом.
- •3. Предмет и история развития цитогенетики
- •4. Методы приготовления препаратов хромосом.
- •5. Международная система цитогенетической номенклатуры хромосом человека и этапы ее развития.
- •6. Дифференциальная окраска хромосом.
- •7. Патогенетические механизмы возникновения хромосомной патологии
- •8. Условные обозначения и запись хромосомного дисбаланса по международной цитогенетической номенклатуре.
- •9. Хромосомные болезни
- •10. Молекулярная цитогенетика
- •11. Форма записи результатов молекулярно-цитогенетического анализа согласно международной цитогенетической номенклатуре.
- •1 2. Пренатальная цитогенетическая диагностика
- •13. Цитогенетические особенности приготовления препаратов хромосом из биоптата хориона, плаценты, амниотической жидкости и пуповинной крови плода.
- •Список использованной литературы
13. Цитогенетические особенности приготовления препаратов хромосом из биоптата хориона, плаценты, амниотической жидкости и пуповинной крови плода.
В настоящее время возможно проведение цитогенетического анализа на любом сроке беременности. В зависимости от срока беременности и поставленных задач используют клетки ворсин хориона, плаценты, амниоциты, лимфоциты пуповинной крови.
Для хромосомного анализа клеток хориона или плаценты используют два основных метода:
"Прямой", который основан на анализе спонтанных митозов клеток цитотрофобласта. Существует несколько модификаций данного метода, но наиболее часто используют непосредственную фиксацию клеток или после кратковременного (24 часа) их культивирования. Анализируют в среднем по 11-20 метафаз.
Длительное культивирование клеток в монослойной культуре и анализ клеток мезенхимы.
При анализе клеток амниотической жидкости (КАЖ) используется два метода культивирования:
Flask-метод - это культивирование клеток во флаконах и фиксация суспензии монослойной культуры после трипсинизации. Анализ проводится в 2-3-х культурах по 10 метафаз для каждого образца.
Метод in situ - культивирование и фиксация клеток на покровных стеклах в чашках Петри или специальных флаконах-слайдах.
Лимфоциты пуповинной крови плода культивируют по стандартной методике с использованием ФГА. Срок культивирования 48-72 часа. Анализируют 11-20 метафазных пластинок. Этот метод дает наиболее адекватное представление о хромосомной конституции плода и настоятельно рекомендуется для кариотипирования плода в случае обнаружения плацентарного мозаицизма.
Существует ряд проблем кариотипирования плода, который включает:
заражение культуры материнскими клетками;
"псевдомозаицизм" в КАЖ;
плацентарный мозаицизм;
структурные перестройки хромосом, возникшие de novo.
Список использованной литературы
Методические указания к лабораторным занятиям со студентами по курсу биологии по разделу “Генетика”/ Под ред. Г.И. Полетаева. – Казань: КГМИ, 1987. – 52 с.
Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике/ Под ред. В.П. Пузырева, А.Б. Масленникова. – Вып. 7. - Новосибирск: Альфа Виста, 2005. – 240 с.
Общая биология: учеб. для 10—11 кл. общеобразоват. учреждений/ Под ред. Д.И. Беляева, ГМ. Дымшица – 5-ое изд. – М.: Просвещение, 2005 – 304 с.
Общая биология 10-11 кл.: учеб. для общеобразоват. учреждений/ А.А. Каменский, Е.А. Криксунов, В.В. Пасечник – 2-ое изд. – М.: Дрофа, 2005 – 365 с.
Фогель Ф., Мотульски А. Генетика человека: В 3-х т. Т. 1. – М: Мир, 1989. – 312 с.
Фросин В.Н. Клеточная биология. Генетика: Рисунки и схемы: Учебное пособие. – Казань: Диалог-Компьютерс, 2002. – 82 с
В учебном пособии использованы плакаты и фотографии микропрепаратов каф. Медицинской биологии и генетики.
Ярыгин В.Н., Васильева В.И. и др. Биология: Учеб. для мед. спец. вузов. – В 2 кн. – М.: Высшая школа, 2006 – 431 с.