13. Цитогенетические особенности приготовления препаратов хромосом из биоптата хориона, плаценты, амниотической жидкости и пуповинной крови плода.

В настоящее время возможно проведение цитогенетического анализа на любом сроке беременности. В зависимости от срока беременности и поставленных задач используют клетки ворсин хориона, плаценты, амниоциты, лимфоциты пуповинной крови.

Для хромосомного анализа клеток хориона или плаценты используют два основных метода:

1. "Прямой", который основан на анализе спонтанных митозов клеток цитотрофобласта. Существует несколько модификаций данного метода, но наиболее часто используют непосредственную фиксацию клеток или после кратковременного (24 часа) их культивирования. Анализируют в среднем по 11-20 метафаз.

2. Длительное культивирование клеток в монослойной культуре и анализ клеток мезенхимы.

При анализе клеток амниотической жидкости (КАЖ) используется два метода культивирования:

1. Flask-метод - это культивирование клеток во флаконах и фиксация суспензии монослойной культуры после трипсинизации. Анализ проводится в 2-3-х культурах по 10 метафаз для каждого образца.

2. Метод in situ - культивирование и фиксация клеток на покровных стеклах в чашках Петри или специальных флаконах-слайдах.

Лимфоциты пуповинной крови плода культивируют по стандартной методике с использованием ФГА. Срок культивирования 48-72 часа. Анализируют 11-20 метафазных пластинок. Этот метод дает наиболее адекватное представление о хромосомной конституции плода и настоятельно рекомендуется для кариотипирования плода в случае обнаружения плацентарного мозаицизма.

Существует ряд проблем кариотипирования плода, который включает:

• заражение культуры материнскими клетками;

• "псевдомозаицизм" в КАЖ;

• плацентарный мозаицизм;

• структурные перестройки хромосом, возникшие de novo.

Список использованной литературы

1. Методические указания к лабораторным занятиям со студентами по курсу биологии по разделу “Генетика”/ Под ред. Г.И. Полетаева. – Казань: КГМИ, 1987. – 52 с.

2. Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике/ Под ред. В.П. Пузырева, А.Б. Масленникова. – Вып. 7. - Новосибирск: Альфа Виста, 2005. – 240 с.

3. Общая биология: учеб. для 10—11 кл. общеобразоват. учреждений/ Под ред. Д.И. Беляева, ГМ. Дымшица – 5-ое изд. – М.: Просвещение, 2005 – 304 с.

4. Общая биология 10-11 кл.: учеб. для общеобразоват. учреждений/ А.А. Каменский, Е.А. Криксунов, В.В. Пасечник – 2-ое изд. – М.: Дрофа, 2005 – 365 с.

5. Фогель Ф., Мотульски А. Генетика человека: В 3-х т. Т. 1. – М: Мир, 1989. – 312 с.

6. Фросин В.Н. Клеточная биология. Генетика: Рисунки и схемы: Учебное пособие. – Казань: Диалог-Компьютерс, 2002. – 82 с

7. В учебном пособии использованы плакаты и фотографии микропрепаратов каф. Медицинской биологии и генетики.

8. Ярыгин В.Н., Васильева В.И. и др. Биология: Учеб. для мед. спец. вузов. – В 2 кн. – М.: Высшая школа, 2006 – 431 с.