1 .3.4.Криоглобулины.

Криоглобулины - это иммуноглобулины, преципитирующие на холоде (ниже 37*С); они бывают трех типов:

- моноклональный иммуноглобулин, вырабатываемый при лимфопролиферативных заболеваниях;

- смесь поликлональных иммуноглобулинов (обычно IgG) и моноклональных IgM-антител к этим иммуноглобулинам;

- поликлональные антитела к IgG.

Понятия холодовые агглютинины и криоглобулины часто путают. Холодовые агглютинины - это иммуноглобулины, которые наиболее эффективно связываются с эритроцитарными антигенами при температуре ниже 37*С. Криоглобулины - это иммуноглобулины, которые при низких температурах преципитируют.

Криоглобулины обычно не связываются с эритроцитарными антигенами, а холодовые агглютинины не преципитируют при низких температурах (т. е. не относятся к криоглобулинам).

Для обнаружения криоглобулинов кровь забирают предварительно нагретым шприцем и инкубируют при 37*С до образования сгустка. Отделившуюся сыворотку охлаждают до 4*С и через 3 сут определяют преципитаты. В норме сыворотка содержит не более 80 мкг/мл криоглобулинов, при криоглобулинемии их концентрация достигает 500-5000 мкг/мл.

1.3.5.Ферменты плазмы крови.

Известно более 50 различных гормонов и ферментов плазмы крови, различающихся по их действию или химическому строению. Многие из них относятся к белкам, полипептидам, аминам, амидам или стероидам.

Ферменты, которые обнаруживаются в норме в плазме или сыворотке крови, условно можно разделить на 3 группы: секреторные, индикаторные и экскреторные. Секреторные ферменты, синтезируясь в печени, в норме выделяются в плазму крови, где играют определенную физиологическую роль. Типичными представителями данной группы являются ферменты, участвующие в процессе свертывания крови, и сывороточная холинэстераза. Индикаторные (клеточные) ферменты попадают в кровь из тканей, где они выполняют определенные внутриклеточные функции. Одни из них находится главным образом в цитозоле клетки (ЛДГ, альдолаза), другие – в митохондриях (глутаматдегидрогеназа), третьи – в лизосомах (β-глюкуронидаза, кислая фосфатаза) и т.д. Большая часть индикаторных ферментов в сыворотке крови определяется в норме лишь в следовых количествах. При поражении тех или иных тканей ферменты из клеток «вымываются» в кровь; их активность в сыворотке резко возрастает, являясь индикатором степени и глубины повреждения этих тканей.

Экскреторные ферменты синтезируются главным образом в печени (лейцинаминопептидаза, щелочная фосфатаза и др.). В физиологических условиях эти ферменты в основном выделяются с желчью. Еще не полностью выяснены механизмы, регулирующие поступление данных ферментов в желчные капилляры. При многих патологических процессах выделение экскреторных ферментов с желчью нарушается, а активность в плазме крови повышается.

Особый интерес для клиники представляет исследование активности индикаторных ферментов в сыворотке крови, так как по появлению в плазме или сыворотке крови ряда тканевых ферментов в повышенных количествах можно судить о функциональном состоянии и поражении различных органов (например, печени, сердечной и скелетной мускулатуры). При остром инфаркте миокарда особенно важно исследовать активность креатинкиназы, АсАТ, ЛДГ и оксибутиратдегидрогеназы.

При заболеваниях печени, в частности при вирусном гепатите (болезнь Боткина), в сыворотке крови значительно увеличиваетсяактивность АлАТ и АсАТ, сорбитолдегидрогеназы, глутаматдегидрогеназы и некоторых других ферментов. Большинство ферментов, содержащихся в печени, присутствуют и в других органах тканей. Однако известны ферменты, которые более или менее специфичны для печеночной ткани. К таким ферментам, в частности, относится γ-глутамилтранспептидаза, или γ-глутамилтрансфе-раза (ГГТ). Данный фермент – высокочувствительный индикатор при заболеваниях печени. Повышение активности ГГТ отмечается при остром инфекционном или токсическом гепатите, циррозе печени, внутрипеченоч-ной или внепеченочной закупорке желчных путей, первичном или метастатическом опухолевом поражении печени, алкогольном поражении печени. Иногда повышение активности ГГТ наблюдается при застойной сердечной недостаточности, редко – после инфаркта миокарда, при панкреатитах, опухолях поджелудочной железы.

Органоспецифическими ферментами для печени считаются также гистида-за, сорбитолдегидрогеназа, аргиназа и орнитинкарбамоилтрансфераза. Изменение активности этих ферментов в сыворотке крови свидетельствует о поражении печеночнойткани.

В настоящее время особо важным лабораторным тестом стало исследование активности изоферментов в сыворотке крови, в частности изоферментов ЛДГ. Известно, что в сердечной мышце наибольшей активностью обладают изоферменты ЛДГ₁ и ЛДГ₂, а в ткани печени– ЛДГ₄ и ЛДГ₅. Установлено, что у больных с острым инфарктом миокарда в сыворотке крови резко повышается активность изоферментов ЛДГ1  и отчасти ЛДГ₂. Изоферментный спектр ЛДГ в сыворотке крови при инфаркте миокарда напоминает изоферментный спектр сердечной мышцы. Напротив, при паренхиматозном гепатите в сыворотке крови значительно возрастаетактивность изоферментов ЛДГ₄ и ЛДГ₅ и уменьшается активность ЛДГ₁ и ЛДГ₂.

Диагностическое значение имеет также исследование активности изофер-ментов креатинкиназы в сыворотке крови. Существуют по крайней мере 3 изофермента креатинкиназы: ВВ, ММ и MB. В мозговой ткани в основном присутствует изофермент ВВ (от англ. brain – мозг), в скелетной мускулатуре – ММ-форма (от англ. muscle – мышца). Сердце содержит гибридную МВ-форму, а также ММ-форму.Изоферменты креатинкиназы особенно важно исследовать при остром инфаркте миокарда, так как МВ-форма в значительном количестве содержится практически только в сердечной мышце. Повышение активности МВ-формы в сыворотке крови свидетельствует о поражении именно сердечной мышцы.

Возрастание активности ферментов сыворотки крови при многих патологических процессах объясняется прежде всего двумя причинами: 1) выходом в кровяное русло ферментов из поврежденных участков органов или тканей на фоне продолжающегося их биосинтеза в поврежденных тканях; 2) одновременным повышением каталитической активности некоторых ферментов, переходящих в кровь. Возможно, что повышение активности ферментов при «поломке» механизмов внутриклеточной регуляции обмена веществ связано с прекращением действия соответствующих регуляторов и ингибиторов ферментов, изменением под влиянием различных факторов строения и структуры макромолекул ферментов.

Содержание ферментов в плазме крови

(величины для оптимального метода при 25°С) (Полачек К. и др., 1986) Фермент Единицы измерения Новорож-денные Грудные дети Дети старшего возраста Взрослые Аспартатамино-трансфераза мккат/л 0,183-0,583 0,133-0,467 0.1-0,383 0,02-0,317 ЕД/л 11-35 8-28 6-23 2-19 Аланинамино-трансфераза мккат/л 0,083-0,4 0,083-0,467 0,067-0,333 0,083-0,4 ЕД/л 5-24 5-28 4-20 5-24 Гаммаглютамил-трансфераза мккат/л < 1,667 До 3 мес.< 1,05 До 12 мес.< 0,583 < 0,217 < 0,467 ЕД/л < 100 До 3 мес.< 63 До 12 мес.< 35 < 13 < 28 Щелочная фосфатаза мккат/л 1.83-9.6 2,2-12,2 1,8-11.67  108-702 1,3-3,33  60-200 ЕД/л 110-576 130-730 Лейцинамино-пептидаза мккат/л 1,167-0,533 0,167-0,45 0,167-0,35 0,183-0,533  10-35 ЕД/л 10-32 10-27 10-21 Глутаматде-гидрогеназа мккат/л < 0,122 6 мес.< 0,072 12 мес.< 0,058 < 0 047 < 0,067 ЕД/л < 7,3 6мес.< 4,3 12 мес.< 3,5 < 2,8 < 4 Креатинкиназа мккат/л ЕД/л 0,517-2,734 31-64 3 мес. 0,3-1,383 12 мес. 0,067-1,0 3 мес. 18-83 12 мес. 4-60 0,083-0,933 5-56 0,833 < 50 Гидроксибутират дегидрогеназа мккат/л ЕД/л 1 день 2,63-8,83  До 1 мес. 1,8-7.67 1 день 158-530 До 1 мес. 108-460 1.67-4.58 100-275 1,17-2,75 70-165 0,92-2,33 55-140 Холинэстераза мккат/л 53,3± 14,5 73,2± 16,7 95.6± 26 ЕД/л 3200± 869 4393± 1101 5738± 1561