Альбумин сывороточный: pg2d изомеразная активность

Ко второму типу ферментов с PGH2 D-изомеразной активностью относятся сывороточные альбумины (Hamberg, 1976; Christ-Hazelhof, 1976; Watanabe, 1982). Hamberg (Hamberg, 1976) впервые показал, что в присутствии бычьего сывороточного альбумина PGH (Простагландинэндопероксиды) преимущественно изомеризуется в PGD, тогда как в его отсутствие основным продуктом являлся PGE. Такой способностью обладали альбумины различных животных и человека.

Убедительное подтверждение эта гипотеза получила в результате изящно выполненной работы Watanabe (Watanabe, 1982a), продемонстрировавшего участие человеческого сывороточного альбумина в регуляции агрегации тромбоцитов. Им была предпринята попытка выделить фермент, ответственный за синтез PGD в плазме, богатой тромбоцитами (факт, неоднократно отмеченный различными исследователями). В результате был очищен и охарактеризован фермент, осуществляющий тиол-независимое специфическое (KM=6мкМ) превращение PGH в PGD (единственный продукт рассматриваемой реакциии) и отличающийся по ряду параметров от всех известных PGH2 D- изомераз. Этот фермент оказался полностью идентичным человеческому сывороточному альбумину. На катализируемый альбумином синтез PGD не оказывали влияния ингибиторы PGH2 D-изомераз (Shimizu, 1979; Urade, 1985; Urade, 1987a) N-этилмалеимид (Hamberg, 1976) и β-гидроксимеркурийбензоат (Watanabe, 1982a), но синтез PGD почти полностью подавлялся в присутствии арахидоновой кислоты (Hamberg, 1976; Watanabe, 1982a). Специфичность катализируемой альбумином изомеразной реакции подтверждена также экспериментом с денатурацией белка. Несмотря на достаточно низкую для ферментов каталитическую активность (0.87 мин-1) высокая скорость реакции по сравнению с неферментативным процессом достигается за счет высокой концентрации сывороточного альбумина в крови (30-35мг/мл или ок. 0.5мМ).

Роль сывороточного альбумина в регуляции агрегации тромбоцитов продемонстрирована на модельных системах: плазме, богатой тромбоцитами, (PRP) и отмытых тромбоцитах (Watanabe, 1982a). Кинетика вызванной тромбином агрегации тромбоцитов в случае PRP и тромбоцитов, помещенных в среду, содержащую альбумин, была идентичной и отличалась от кинетики, наблюдаемой при использовании отмытых тромбоцитов, помещенных в среду без альбумина, обратимым характером. Кинетика агрегации тромбоцитов становилась практически необратимой при добавлении в среду антител к PGD2. Подавление агрегации тромбоцитов специфическим ингибитором тромбоксан синтазы приводило к снижению синтеза PGD.

*-*-*- Простагландинэндопероксиды (PGH)

Простагландинэндопероксиды - универсальные медиаторы синтеза простагландинов и тромбоксана. Простагландинэндопероксиды, PGG и PGH, являются нестабильными в водной среде, биологически активными продуктами PG-эндопероксид синтазной реакции.

Структура PG-эндопероксидов (PGH) была впервые предсказана (Samuelsson, 1965) на основе результатов анализа стабильных продуктов биопревращения C20 ПНЖК препаратами PG-эндопероксид синтазы и данных по включению атомов 180.

Показано (Hamberg, 1966), что образование простагландинов, таких как PGD , PGE , PGF , сопровождается образованием 12- гидроксидекаполиеновых кислот и малонового диальдегида. Анализ радиоактивных продуктов позволил установить, что MDA содержит C9-C11 углеродные атомы исходного соединения. Кроме того, два атома кислорода циклопентанового кольца всех простагландинов возникают из одной молекулы кислорода (Ryhage, 1965; Samuelsson, 1965). Для объяснения полученных данных появилось предположение о том, что промежуточный продукт синтеза простагландинов является производным 2,3-диоксибицикло-[2.2.1]-гептана. В этом случае восстановление O-O связи бициклического пероксидного интермедиата приводит к образованию простагландина F, а перераспределение электронов между C-O связями приводит к образованию одной гидроксильной и одной кетогруппы циклопентанового кольца простагландина E и простагландина D.

Существование бициклического пероксидного интермедиата было окончательно подтверждено после выделения и установления структуры простагландина H2 .

1.3.2.α-глобулины.

В составе фракции альфа-1-глобулинов мигрирует ряд конъюгированных белков, простетической группой которых являются углеводы - преимущественно гексозы и гексозамины. Эти белки называются гликопротеинами. Около 2/3 всей глюкозы плазмы циркулирует в составе гликопротеинов. Эту связанную глюкозу невозможно определить клиническими пробами на сахар в плазме, лишенной белков, она может быть измерена лишь после ее отделения от белков методом кислотного гидролиза . К субфракции гликопротеинов относится еще одна группа углеводсодержащих белков - мукопротеины, в состав которых входят мукополисахариды

Фракция альфа-2-глобулинов включает гаптоглобины, относящиеся по химическому строению к мукопротеинам, и медьсодержащий белок церулоплазмин. На каждую молекулу его приходится 8 атомов меди, он связывает около 90% всей меди, содержащейся в плазме. К другим белкам из фракции альфа-2-глобулинам относятся тироксинсвязывающий белок, витамин В- 12-связывающий глобулин (транскобаламин), билирубинсвязывающий глобулин и кортизолсвязывающий глобулин (транскортин).

-*-*-*-

Среди гексоз, абсорбируемых в желудочно-кишечном тракте, преобладают глюкоза, фруктоза и галактоза. Они образуются из поступающих с пищей крахмала, сахарозы и лактозы соответственно. В тканях, в первую очередь в печени, функционируют специальные пути превращения фруктозы и галактозы в глюкозу.

Основными метаболическими процессами, обеспечивающими усвоение глюкозы, являются гликолиз и пентозофосфатный путь. Незначительным в количественном плане, но весьма важным для экскреции продуктов метаболизма и чужеродных веществ ( ксенобиотиков) в виде глюкоуронидов является образование глюкоуроновой кислоты из глюкозы (путь уроновой кислоты). Недостаточная эффективность этого пути приводит к идиопатической пентозурии. Полным отсутствием определенного фермента данного пути у приматов и морских свинок объясняется тот факт, что для человека (в отличие от большинства других млекопитающих) аскорбиновая кислота (витамин C) является необходимым компонентом пищи. Недостаточная активность ферментов, участвующих в метаболизме фруктозы и галактозы, приводит к таким метаболическим заболеваниям, как идиопатическая фруктозурия и галактоземия. Фруктоза используется для парентерального питания, однако при высоких концентрациях она может вызывать снижение уровня адениновых нуклеотидов в печени и приводить к некротическому поражению этого органа.

/*/*/*

аминосахара (гексозамины) (Метаболизм фруктозы, сорбитола и аминосахаров: метаболическая карта). Аминосахара являются важными компонентами гликопротеинов, некоторых гликосфинголипидов (например, ганглиозидов) и гликозаминогликанов. Наибольшее значение среди них имеют глюкозамин, галактозамин, маннозамин (все они - гексозамины) и C-9-соединение - сиаловая кислота. Главной сиаловой кислотой, обнаруженной в тканях человека, является нейраминовая кислота[N-ацетил].

Наиболее существенные моменты взаимных превращений аминосахаров следующие: (1) главным аминосахаром является глюкозамин; он образуется из фруктозо-6-фосфат а в форме глюкозамин-6-фосфата, причем донором аминогруппы является глутамин; (2) аминосахара функционируют в основном в N-ацетилированной форме, донором ацетила является ацетил-CoA; (3) маннозамин-6-фосфат[N-ацетил] образуется путем эпимеризации глюкозамин-6-фосфата[N-ацетил]; (4) N-ацетилнейраминовая кислота образуется в результате конденсации маннозамин-6-фосфата[N-ацетил] с фосфоенолпируватом; (5) галактозамин образуется путем эпимеризации UDP-N-ацетилглюкозамина (UDPGAC) в UDP-N-ацетилгалактозамин (UDPGLA); (6) аминосахара используются для биосинтеза гликопротеинов и других соединений в форме нуклеотидсахаров, основными из которых являются UDPGAC, UDPGLA и CMP-N-ацетилнейраминовая кислота.

/*/*/*