Ассоциированные вакцины
На основе вышеперечисленных вакцин изготавливают ассоциированные вакцины. В своем составе они могут содержать как корпускулярные вакцины (например, убитую) и анатоксины.
Примером может служить ассоциированная вакцина АКДС –адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная. Она состоит из инактивированных клеток возбудителя коклюша и двух анатоксинов (дифтерийного и столбнячного). Процесс получения заключается в получении суспензии инактивированных коклюшных микробов, дифтерийного и столбнячного анатоксин в отдельности. Затем определенные дозы каждого компонента помещают в реактор-смеситель, добавляют адьювант – гель гидроокиси алюминия и перемешивают. Фасуют.
Контроль качества вакцинных препаратов
Все вакцинные препараты, предназначенные для введения в живой организм, должны быть подвергнуты строгой проверке на безопасность и соответствие установленным стандартам.
Контроль осуществляется на всех этапах производства, а также и у готового препарата.
В процессе производства контролируют:
стерильность.
густоту микробной взвеси нативной и разведенной вакцины с помощью оптического стандарта мутности.
иммуногенность нативной смеси.
чистоту культуры (мазок, окраска, микроскопия).
титр инактивированной вакцины (количество микробных клеток в 1 мл вакцины).
У готового препарата контролируют:
чистоту культуры (мазок, окраска, микроскопия).
титр инактивированной вакцины (количество микробных клеток в 1 мл вакцины).
стерильность посевом на питательную среду.
растворимость для сухой вакцины и гомогенность при добавлении растворителя.
содержание консерванта.
безвредность – биологическая проба на животных. Серию проверяют на 3 мышах. После введения вакцины спустя трое суток животные должны быть живы. В случае гибели 1 мыши испытание проводят на 6 мышах.
иммуногенность – проба на животных. Мышей вакцинируют проверяемым препаратом в разных дозах, затем через 10 дней заражают внутрибрюшинно культурой возбудителя. Через трое суток проводят учет результатов. При максимальной дозе, должны выжить все мыши, при минимальной - все погибнуть.
переносимость. Испытание каждой серии вакцины на группе 5 человек, которым вводят проверяемый препарат. Учитывают общее состояние – температуру тела, гиперемию в месте введения, появление инфильтрата. Вакцина считается переносимой при отсутствии сильных общих и местных реакций в группе 5 человек.
правильность оформления упаковки.
Выпуск вакцин осуществляется по разрешению Государственного института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов имени Л.А.Тарасевича.
Современные вакцины
К современным вакцинам относят:
Искусственные антигены.
Генно-инженерные вакцины.
Рибосомальные вакцины.
Вакцины на основе ДНК.
Вакцины искусственных антигенов содержат в своем составе синтетический протектиновый антиген, обеспечивающий иммунный ответ. Прообразом такой вакцины является классическая химическая вакцина, содержащая натуральный молекулярный антиген выделенный из возбудителя.
Достоинства вакцин синтетических антигенов:
Химическая чистота.
Возможность синтеза в больших количествах.
Простота хранения по сравнению с классическими вакцинами.
Безопасность получения. Нет необходимости работать с вирулентными культурами возбудителя.
При получении данных вакцин основная задача состоит в выявлении антигена, обеспечивающего иммунный ответ и разработке способа его синтеза.
С этой целью выращивают биомассу микроорганизма, выделяют антиген белковой или полисахаридной природы, проводят его глубокую очистку, анализируют первичную структуру молекулы антигена и разрабатывают способ искусственного синтеза данной антигенной молекулы или фрагмента, отвечающего за антигенность. Затем осуществляют промышленный синтез искусственного антигена.
Применяют вакцины искусственных антигенов вместе с адьювантами.
Примером таких вакцин является вакцина против тропической малярии. Она содержит синтетическую копию протеина, выделенного из наружной клеточной мембраны малярийного плазмодия.
Генно-инженерные вакцины – это вакцины, полученные с использованием специально созданных методом рДНК биотехнологии клеток продуцентов, синтезирующих необходимый протектиновый антиген.
Технология получения состоит из двух основных этапов:
1 этап – создание рекомбинантной клетки продуцента.
2 этап – культивирование клеток, с целью получения протектинового антигена.
На первом этапе получают ген, кодирующий синтез протекинового антигена, вносят его в вектор, а затем вводят в пермиссивную клетку. Проводят клонирование клетки, продуцирующей протектиновый антиген, испытывают иммуногенность протектинового антигена.
На втором этапе осуществляют промышленное культивирование рекомбинатного продуцента с целью получения протектинового антигена.
По такой технологии в настоящее время получают вакцину гепатита В. В качестве клетки-продуцента применяют дрожжи, со встроенным геном гепатита В, кодирующим синтез поверхностного атингена возбудителя. Готовая вакцина содержит протектиновый антиген, адьювант гидроокись алюминия и консервант мертиолят.
Рибосомальные вакцины – это вакцины состоящие из рибосом микробов возбудителей.
Достоинства:
Более выраженная иммуногенность по сравнению с живыми и инактивированными вакцинами.
Способность создавать перекрестный иммунитет к различным серотипам в пределах вида.
Малая реактогенность для человека.
Технология получения:
Накопление биомассы клеток микроорганизмов.
Отделение биомассы клеток и их дезинтеграция.
Выделение рибосом методом ультрацентрифугирования.
Проверка иммунологической активности.
В настоящее время выпускается рибосомальная вакцина «Рибомунил», содержащая рибосомы возбудителей пневмоний и адьювант.
ДНК-вакцины.
Это новое направление в создании вакцинных препаратов. Для вакцинации используют плазмиды, содержащие участки вирусной ДНК. После их введения они концентрируются на внешней стороне клеточных мембран. Поскольку они являются чужеродными для организма, их распознают рецепторы Т-лимфоцитов и формируют клон клеток-киллеров, направленных против них. Таким образом осуществляется борьба с вирусной инфекцией.
Достоинства:
Возможность введения внутреннего белка вируса, который в отличие от белков его оболочки не изменяется.
Этот принцип положен в основу создания интраназальной вакцины против гриппа.