1.10-7.10 Фенилпируват и глюкоза (и определение глюкозы в моче)

8.10-14.10 Белок в моче

15.10-14.10 Качественная реакция на инсулин

22.10-28.10 Перекисные липиды в сыворотке крови

29.10-4.11 Метод Мойдина и зака

5.11-11.11 Метод Гесса

12.11-18.11 Общие липиды в сыворотке крови

19.11-25.11 Качественная реакция на адреналин и фолликулин

26.11-2.12 Прямой и непрямой билирубин в сыворотке крови

3.12-9.12 Ортотолуидиновый метод определения глюкозы

10.12-16.12 Хлориды в сыворотке крови

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА

Тема: «качественная реакция на наличие фенилпировиноградной кислоты в моче».

Накопление фенилпировиноградной кислоты в организме (в крови, в тканях) и наличие фенилпировиноградной кислоты в моче связаны с отсутствием у детей в печени фермента 4-фенилаланингидроксилазы. При этом фенилаланин не гидроксилируется и не превращается в тирозин. Накопление фенилаланина и продуктов его аномального распада, в частности фенилпировиноградной кислоты, в крови и тканях приводит к нарушению нормального развития мозга и появлению тяжелых нарушений психики ребенка. Доказательством данного наследственного заболевания – фенилпировиноградной олигофрении (слабоумия) – служит выявление повышенного содержания фенилаланина в крови (10-40 мг%) и наличие фенилпировиноградной кислоты в моче.

Метод основан на способности енольной формы фенипировиноградной кислоты образовывать с ионами трехвалентного железа комплексное соединение, окрашенное в сине-зеленый цвет.

ИСЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ: Моча.

РЕАКТИВЫ: 1) Серная кислота, 5 Н раствор. 2) Хлорид железа (III) FeCl₃, 10%-ный раствор.

ОБОРУДОВАНИЕ: 1) Капельницы. 2) Пробирки. 3) Фильтры. 4) Пипетки на 5 мл.

ХОД РАБОТЫ:

К 5 мл свежепрофильтрованной мочи приливают 4 капли 5 Н раствора серной кислоты, перемешивают и добавляют к смеси 4 капли 10%-ного раствора FeCl₃. При наличии в моче фенилпировиноградной кислоты через 30 сек – 1 мин появляется сине-зеленая окраска, исчезающая через 5 – 10 минут.

УКАЗАНИЯ К СОСТАВЛЕНИЮ ОТЧЕТА:

Написать в тетради образование фенилпировиноградной, фенилмолочной, фенилуксусной кислот из фенилаланина.

Записать в тетрадь технику проведения качественной реакции на фенилпировиноградную кислоту.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 12

Тема: «ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЛЮКОЗЫ В МОЧЕ».

Исследуемый материал: моча.

Реактивы: бумага реактивная «Глюкотест».

ХОД РАБОТЫ:

1. Полностью смочить в моче желтую полоску реактивной бумаги.

2. Поместить реактивную бумажку на пластмассовую пластинку и выдержать около 5-10 минут.

3. Сравнить изменившуюся окраску желтой полоски с цветной шкалой.

Примечания:

1. Для исследования использовать свеженабранную мочу, взятую до приема пищи.

2. На точность анализа отрицательно влияет присутствие в моче аскорбиновой кислоты.

3. Не дотрагивайтесь пальцами желтой полоски реактивной бумаги. Беречь от солнечных лучей и влаги!

Лабораторная работа

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ БЕЛКА В МОЧЕ.

Белок в нормальной моче находится в следовых количествах, которые не определяются обычными реакциями, применяемыми в клинической лаборатории.

Появление белка в моче носит название протеинурия или часто альбуминурия, поскольку моча содержит в основном сывороточный альбумин и лишь частично сывороточный глобулин. Протеинурия может быть истинной или ложной. При истинной, или почечной, протеинурии белки сыворотки крови попадают в мочу через почки. Случайная, или ложная, протеинурия наблюдается при попадании в мочу слизи, крови, гноя не из почек, а из мочевыводящих путей.

Белок появляется в моче при нефрите (т.е. воспалении сосудистых клубочков почек, когда увеличивается их проницаемость), в случае сердечной декомпенсации, при некоторых формах повышенного кровяного давления и иногда при беременности. Моча, содержащая белок, становится мутной.

Для обнаружения белка в моче применяется реакция осаждения.

Основными реакциями, наиболее часто применяемыми в клинических лабораториях для

осаждения белка являются следующие:

1) проба с кипячением;

2) осаждение концентрированной азотной кислотой;

3) осаждение сульфосалициловой кислотой (самая чувствительная реакция на белок, положи-

тельная в разведении белка 1:50000).

Наряду с качественным определением белка в моче существует и количественное по методу Робертса-Стольникова-Брандберга, имеющее диагностическое и прогностическое значение. Оно дает возможность судить о результатах терапевтического воздействия.

Данный метод количественного определения белка в моче широко применяется в клинике.

Исследуемый материал:

1) Моча, содержащая белок; 2) Нормальная моча.

Реактивы:

1) Уксусная кислота, 1%-ный раствор; 2) Концентрированная азотная кислота с хлоридом натрия.

Оборудование:

1) Штатив с пробирками; 2) Пипетка (2 шт.); 3) Фильтры; 4) Колбочка; 5) Воронки.