Внимание!
При подготовке домашнего задания обратите особое внимание на те разделы темы, в которых Вы сделали ошибки.
Запишите домашнее задание:
Повторите строение микробной клетки по материалам лекции или по учебнику. Тема лекции «Морфология бактерий»
Учебник - гл. 2.2 «Морфология и ультраструктура бактерий» – стр. 13 – 19.
Устно ответьте на вопросы:
какие группы бактерий по форме клеток Вы знаете?
как располагаются в мазке диплококки, стрептококки, сарцины, стафилококки?
какие группы палочковидных бактерий по спорообразованию выделяют в бактериологии? Приведите примеры возбудителей из каждой группы.
какую роль выполняет спора у бактерий?
чем обеспечивается устойчивость споры во внешней среде?
какое строение имеет оболочка бактерий?
какое значение имеет капсула в развитии инфекционного заболевания? Приведите примеры капсулообразующих бактерий.
что такое включения?
у каких бактерий наличие включений является важным диагностическим признаком?
назовите органы подвижности бактерий. Приведите примеры подвижных бактерий.
Информационный блок
для самостоятельной работы студентов
Часть 1. Методы окраски бактерий.
Окраска микроорганизмов имеет большое диагностическое значение, так как даёт возможность установить морфологические и тинкториальные особенности микроба, чего в некоторых случаях достаточно для постановки микробиологического диагноза. Для окрашивания микроорганизмов применяют простые и сложные методы окраски
(
смотрите схему №1 «Методы окраски
микроорганизмов»).
Схема №1
Методы окраски микроорганизмов.
При простых способах окраски применяют один краситель – раствор метиленового синего или фуксина. Простым способом пользуются для обнаружения микроорганизмов, определения их количества, формы и расположения (рисунок №1).
При сложных способах окраски используют два красителя, один из которых – основной, а другой – дополнительный. Кроме того, при сложных методах применяются дополнительные химические реактивы. Сложные методы окраски применяются для выявления структурных элементов микробной клетки или для дифференциально-диагностических целей (рисунок №2, №3).
Часть 2. Простой метод окраски.
Простой способ окраски используют для обнаружения микроорганизмов, определения их количества, формы и расположения в мазке. Обычно используют раствор красителя метиленового синего. В препаратах, окрашенных простым методом, фон окрашивается значительно слабее, чем клеточные элементы и бактерии (Рис. №1).
АЛГОРИТМ ПРОСТОГО МЕТОДА ОКРАСКИ
Поместить препарат на подставку для окрашивания мазком кверху.
Нанести на мазок 1-2 капли раствора метиленового синего.
Выдержать краситель на мазке 3 минуты.
Промыть мазок водой.
Высушить мазок на воздухе.
Часть 3.
Метод окраски по Граму.
Окраска по Граму даёт возможность разделить все бактерии на две большие систематические группы – грамположительные (отдел Firmicutes) и грамотрицательные (отдел Gracilicutes) - в соответствии со строением клеточной стенки. Тинкториальные свойства бактерий учитываются при определении вида бактерий в ходе лабораторной диагностики инфекционных болезней. При окраске по методу Грама применяются два красителя:
основной – генциановый фиолетовый и
дополнительный – фуксин.
Толстостеночные бактерии хорошо удерживают генциановый фиолетовый и сохраняют фиолетовый цвет до конца окрашивания. Их называют грамположительными (Г +). Тонкостеночные бактерии легко обесцвечиваются, поэтому мазок докрашивают дополнительным красителем – фуксином. По окончании окраски они имеют розовый цвет и называются грамотрицательными (Г - ). (Рисунки №2 и №3).
АЛГОРИТМ ОКРАСКИ ПО ГРАМУ
(модификация по Синёву)
Поместить препарат на подставку для окрашивания мазком кверху.
Положить на мазок фильтровальную бумажку, пропитанную раствором генцианового фиолетового.
Нанести на бумажку 2-3 капли воды.
Выдержать краситель на мазке 2 минуты.
Удалить фильтровальную бумажку пинцетом в специальную ёмкость.
Нанести на мазок 1 – 2 капли раствора Люголя на 2 мин.
Обесцветить мазок, промыв в спирте.
Промыть препарат водой.
Нанести на мазок 1 – 2 капли раствора фуксина на 2 минуты.
Промыть мазок водой.
Высушить препарат на воздухе.
Задачи самоконтроля.
