- •Адаптивна гуморальна імунна відповідь. Імуноглобуліни (антитіла). Серологічні реакції флокуляції, нейтралізації
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •1. Імунні сироватки (антитоксичні) та імуноглобуліни.
- •2. Титрування антитоксичної сироватки методом флокуляції.
- •Поясненя до самостійної роботи з теми: гуморальна імунна відповідь. Імуноглобуліни (антитіла). Серологічні реакції флокуяції, нейтралізації
- •Надбаний (адаптивний) імунітет
- •Гуморальний
- •Загальний (IgM, g, a, e)
2. Титрування антитоксичної сироватки методом флокуляції.
Д
ля
визначення активності імунних
антитоксичних сироваток і анатоксинів
використовується реакція флокуляції,
яка характеризується помутнінням в
пробірці з сумішшю анатоксину (токсину)
й антитоксину.
Для постановки реакції флокуляції (таблиця 5) змішують сироватку (в даній демонстрації це антитоксична протидифтерійна сироватка) з антигеном (в даній демонстрації це протидифтерійний токсин). Після змішування компонентів, пробірку зтрушують та витримують у термостаті 2 години, після чого залишають на 18 – 20 годин при кімнатній температурі. При позитивній реакції на дно пробірки випадає преципітат. Реакцію враховують неозброєним оком або за допомогою лупи.
Таблиця 5
Схема титрування антитоксичної сироватки
Номер пробірки |
Компоненти |
Результат через 20 хвилин після інкубації в термостаті |
||
Антитоксична сироватка (мл) |
Дифтерійний токсин (50lf у 1 мл) |
|||
1 2 3 4 5 |
0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 |
2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 |
Ініціальна флокуляція |
|
Поясненя до самостійної роботи з теми: гуморальна імунна відповідь. Імуноглобуліни (антитіла). Серологічні реакції флокуяції, нейтралізації
Адаптивна імунна відповідь |
Це ланцюг міжклітинних і міжмолекулярних взаємодій, який формується у відповідь на проникнення антигена в організм та закінчується накопиченням антитіл або клітин-ефекторів |
Форми адаптивної імунної відповіді |
1. Гуморальна 2. Клітинна 3. Імунологічна толерантність |
Фази розвитку адаптивної імунної відповіді |
1. Індуктивна (аферентна) 2. Проліферативна 3. Продуктивна (ефекторна) 4. Імунологічна пам'ять |
Клітини імунної системи, які беруть участь в імунній відповіді |
1. Макрофаги 2. Дендритні клітини 3. В-лімфоцити 4. Т-лімфоцити |
Антигенпрезентуючі клітини |
1. Макрофаги 2. Дендритні клітини 3. В-лімфоцити |
Гуморальні фактори (молекули), які беруть участь в адаптивній імунній відповіді |
1. Цитокіни: інтерлейкіни, інтерферон (ІФНγ), трансформуючий ростовий фактор (ТРФ) 2. Адгезивні молекули, інтегрини 3. Костимулюючі молекули 4. Молекули системи НLА (І або II класу) |
Цитокіни |
Медіатори міжклітинних взаємодій, які продукуються переважно активованими клітинами імунної системи. Діють неспецифічно по відношенню до антигенів через спеціальні рецептори на мембрані клітин-мішеней, і зумовлюють міжклітинні комунікації при імунній відповіді, запаленні, гемопоезі. |
Адаптивна гуморальна (антитільна) імунна відповідь (від лат. humor - рідина)
|
Реакція на проникнення в організм антигену, при якій ланцюг міжклітинних і міжмолекулярних взаємодій закінчується синтезом специфічних антитіл. Адаптивну гуморальну імунну відповідь зумовлюють і регулюють Тх2 та цитокіни ІЛ-4,ІЛ-5,ІЛ-10. |
Антитіла (Ат) |
Специфічні молекули імуноглобулінів, що продукуються (синтезуються) плазматичними клітинами при імунній відповіді на визначений антиген. Мають характерну загальну структуру: в основі мономер - симетричний комплекс із двох легких і двох важких ланцюгів |
Класи (ізотипи) імуноглобулінів (Іg) |
В залежності від структури Іg (типу важких ланцюгів) визначають 5 класів: М, G, А, Е, Д. Ізотип визначає біологічні властивості антитіл |
Моноклональні антитіла |
Антитіла до окремої антигенної детермінанти (епітопу), які синтезуються одним клоном клітин в гібрідомі та є однорідними за специфічністю. Використовують для визначення поверхневих структур (маркерів) клітин організму, а також мікроорганізмів |
Головні властивості антитіл |
|
Специфічність антитіл
|
Здатність антитіл з’єднуватись тільки з тими антигенами, у відповідь на які вони були синтезовані імунною системою. Специфічність антитіл визначається V-доменом молекули Іg (активним центром)
|
Гетерогенність антитіл |
Велика популяційна різноманітністі (109 -1016) зв’язувальних властивостей антитіл по відношенню до антигенів
|
Практичне використання сироваток |
1. Для профілактики та лікування ряду бактеріальних інфекцій, збудники яких продукують екзотоксин (дифтерія, правець, ботулізм та інші) 2. Для визначення антигенних властивостей мікроорганізмів (ідентифікація бактерій і вірусів) |
Бактеріальні інфекції, при яких провідна роль в захисному імунітеті належить антитілам |
Дифтерія, правець, газова гангрена, ботулізм і ін.
|
Антитільні препарати, які використовують з лікувальною та профілактичною метою |
|
Фази ходу серологічних реакцій |
1. Специфічна (між антитілом і антигеном) 2. Неспецифічна, яка зумовлює зовнішній прояв реакції. |
Практичне використання серологічних реакцій |
1. Діагностика інфекційних захворювань - Серологічна (визначення антитіл в сироватці крові обстеженого), - Бактеріологічна або вірусологічна (визначення антигенних властивостей збудника, виділеного від хворого або носія), 2. Оцінка рівня поствакцинального імунітету. 3. Оцінка імунного статусу (стану імунної системи) |
Визначення активності анатоксину
|
Активність анатоксину визначається в імунних (антигенних) одиницях (АО) в реакції флокуляції. За 1 АЕ приймають мінімальну дозу анатоксину, яка реагує з 1 МО антитоксичної сироватки і виникає позитивна реакція флокуляції. |
Реакція нейтралізації |
Антиген (екзотоксин) має біологічну (токсичну, отруйну) активність, яка нейтралізується (знешкоджується, зв'язується) за допомогою антитіл – антитоксинів, які містяться в антитоксичних сироватках. Ця серологічна реакція називається, реакція нейтралізації |
