Самостоятельная работа студентов
Для самостоятельной работы необходимы: микроскопы, счетные камеры, пробирки, 11-ти клавишный счётчик для подсчёта лейкоцитов, микропипетки от гемометра Сали, мерные пипетки, центрифужные пробирки, шприц однократного применения, стерильные скарификаторы, медицинский жгут, готовые окрашенные мазки крови, 3-5% раствор уксусной кислоты, подкрашенной метиленовым синим, иммерсионное масло, спирт, йод, вата.
Работа 1. Подсчет лейкоцитов пробирочным способом
Ход работы. В центрифужную пробирку набирают 0,4 мл 5% р-ра уксусной кислоты, подкрашенной метиленовым синим. Кислота разрушает оболочки форменных элементов, а краситель окрашивает ядра белых клеток. При этом эритроциты становятся невидимыми и не мешают подсчету лейкоцитов. Считают лейкоциты, как и эритроциты, согласно правилу Егорова. Пипеткой от гемометра Сали набирают 0,02 мл цельной крови и выдувают в пробирку (см. занятие 1, работа 1). Затем разбавленной кровью (разведение 1:20) заполняют камеру и ставят ее под микроскоп. Лейкоциты считают при малом увеличении (окуляр 15, объектив 20) в 100 больших квадратах, неразделенных на маленькие.
Количество лейкоцитов определяют по формуле:
,
а после сокращения Х=Л
50/мкл=Л
5
107/л
Л – число лейкоцитов в 100 больших квадратах.
Рекомендации к оформлению работы. В результате работы укажите полученное число лейкоцитов, а также пределы колебаний и средний показатель у студентов подгруппы. В анализе сравните полученные показатели с нормой.
Работа 2. Определение лейкоцитарной формулы
Ход работы. Мазок крови помещают под микроскоп и считают лейкоциты в иммерсионной системе. Необходимо просмотреть не менее 200 клеток. Мазок передвигают либо от верхнего края до нижнего, затем отодвигают на 2-3 поля зрения вдоль края, затем идут в обратном направлении; либо от края продвигают на 5-6 полей к середине мазка, затем столько же вбок, потом обратно к краю. Отодвигают на несколько полей вбок и опять повторяют продвижение, пока не будет сосчитано 50 клеток. Просматривают под микроскопом 4 таких участка по 4 углам мазка. Каждую клетку отмечают на 11-клавишном счетчике, на котором есть клавиши для всех видов лейкоцитов. Сосчитав в сумме 200 клеток, делят каждый показатель пополам и записывают лейкоформулу.
Рекомендации к оформлению работы. В результатах запишите подсчитанную лейкоцитарную формулу, определите по ней индекс регенерации. Кроме того, учитывая количество лейкоцитов по работе 1, вычислите абсолютное число отдельных видов лейкоцитов. В анализе сравните эти показатели с нормой.
Занятие 3
ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА И ГРУППЫ КРОВИ
Цель занятия. Рассмотреть основные механизмы поддержания гомеостаза, группы крови и правила ее переливания. Научиться определять групповую принадлежность крови в системах агглютиногенов АВО и резус.
Примерные вопросы для самоподготовки
1. Состав плазмы. Белки плазмы (альбумины, глобулины, фибриноген) и их значение. Минеральный состав плазмы.
2. Физико-химические свойства крови: вязкость, относительная плотность, осмотическое и онкотическое давление.
3. Осмотическая резистентность эритроцитов и ее определение.
4. Коллоидная стабильность плазмы и суспензионная устойчивость крови. СОЭ и ее определение.
5. Реакция крови и поддержание ее постоянства. Буферные системы крови.
6. Группы крови и реакции агглютинации. Значение переливания крови. Система агглютиногенов АВО и определение групп крови по этой системе. Классические правила переливания крови.
7. Резус-фактор и резус-несовместимость. Другие системы агглютиногенов. Группы крови и заболеваемость.
8. Современные правила переливания крови. Пересадка органов и тканей.