Работа 2. Подсчет эритроцитов пробирочным методом

Ход работы. Берут кровь из вены или из капилляра пальца. К счетной камере притирают покровное стекло до появления ньютоновских колец и рассматривают сетку под микроскопом. В центрифужную пробирку набирают 4 мл 3% раствора NaCl. Пипеткой от гемометра Сали или другой берут 20 мм³ крови и, обтерев кончик ее ватой, быстро выдувают кровь в пробирку. Не вынимая пипетки из раствора, споласкивают ее раствором. После этого содержимое пробирки перемешивают. Затем разбавленной кровью заполняют подготовленную счетную камеру. Заполнив камеру, ставят ее под микроскоп и считают эритроциты в 5 больших квадратах, разделенных на 16 маленьких, по диагонали (слева сверху, вправо вниз). Подсчет ведут в затемненном поле зрения (окуляр  7, объектив  40). Подсчитывают все эритроциты внутри квадрата и на верхней и левой его сторонах (правило Егорова).

Затем определяют количество эритроцитов в 1 мкл по формуле:

, где

X – искомое число эритроцитов;

Э – число эритроцитов в 5 больших квадратах;

200 – разведение крови;

4000 – учитывая, что объем камеры над одним маленьким квадратом равен 1/4000 мм³, для определения числа эритроцитов в 1 мкл умножают найденное число на 4000;

80 – число маленьких квадратов в 5 больших.

Эта формула после сокращения упрощается до Х=Э 10¹⁰/л.

Рекомендации к оформлению работы. В результатах укажите число эритроцитов в 1 мкл и 1 л исследуемой крови, а также определите пределы колебаний и средние показатели числа эритроцитов для юношей и девушек. В анализе сравните их с нормальными показателями.

Работа 3. Определение гемоглобина по Сали

Ход работы. В среднюю пробирку гемометра наливают 0,1 н р-р HCl до нижней метки. Пипеткой берут 20 мм³ крови и выдувают на дно пробирки, чтобы верхний слой остался неокрашенным. Не вынимая пипетки из кислоты, ополаскивают ее. Затем содержимое пробирки перемешивают, ударяя пальцем по дну пробирки, и оставляют на 5-10 минут. За это время образуется солянокислый гемин. В дальнейшем, добавляя по капле дистиллированной воды, доводят цвет содержимого пробирки до цвета жидкости в боковых пробирках гемометра. По нижнему мениску жидкости в средней пробирке отмечают содержание гемоглобина в г % или г/л.

Рекомендации к оформлению работы. В результатах работы запишите количество гемоглобина в исследуемой крови. В анализе сравните этот показатель с нормой и объясните, почему разбавление производят дистиллированной водой.

Работа 4. Расчет цветового показателя

Ход работы. Цветовой показатель вычисляют по формуле:

Рекомендации к оформлению работы. Подставьте в формулу полученные Вами в предыдущих работах показатели содержания гемоглобина и числа эритроцитов и сравните полученный ЦП с нормой.

Работа 5. Определение гематокритного числа

Ход работы. Гематокритные капилляры – это стеклянные трубочки, разделенные на 100 равных частей. Их промывают цитратом и заполняют кровью. Затем центрифугируют в клинической центрифуге при 3000 об/мин в течение 30 мин, а в угловой – при 8000 об/мин в течение 15 мин. После центрифугирования в 1-ом случае форменные элементы оседают на дно, а во втором – отбрасываются от центра на периферию капилляров.

Рекомендации к оформлению работы. В результатах укажите длину столбика форменных элементов, в анализе сравните полученное число с нормой.

Занятие 2

ФИЗИОЛОГИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ

Цель занятия. Изучить функции лейкоцитов, их образование и регуляцию лейкопоэза.