(7) Бруцеллы

Бруцеллы — факультативные внутриклеточные паразиты. Род Brucella включён в семей­ство Brucellaceae отдела Gracilicutes. Представлены неподвижными мелкими (0,5-0,7x0,6-1,5мкм) палочками или коккобациллами. Бруцеллы названы в честь английского бактериолога Д. Брюса, выделившего бактерии из организма погибшего человека (В. melitensis) в 1887 г. Позднее было установлено, что патогенными для человека свойствами обладают также В. abortus (палочка Банга), В. suis, В. canis и их биовары. У чувствительных животных и человека вызывают бруцеллёз. У животных заболевание проявляется инфекционными абортами, у че­ловека — длительно протекающими инфекционными поражениями опорно-двигательной систе­мы, нервной и половой системы.

Эпидемиология. Бруцеллёз — зоонозная инфекция. Резер­вуар и источник инфекции — домашние животные (овцы, козы, коровы, свиньи, реже собаки). Человек — вторичный хозяин; заболевания людей (исключая случаи лабораторного зараже­ния) возникают на фоне эпизоотии. От животного к животным и человеку бактерии передаются через заражённые фекалии, мочу, молоко и мясо. Как правило, каждый из патогенных для человека видов бруцелл избирательно инфицирует специфичес­ких животных. В. abortus чаще вызывает бруцеллёз крупного рогатого скота (болезнь Банга), В. melitensis — коз и овец (иног­да кур), В. suis— свиней. В РФ заболеваемость людей бруцел­лёзом носит профессиональный характер; основные возбудите­ли — В. melitensis и В. abortus. Возбудитель внедряется в орга­низм человека через повреждённую кожу, слизистую оболочку дыхательных путей и ЖКТ, конъюнктиву. Контактный путь за­ражения более характерен для овечьего и свиного бруцеллёза. Бруцеллы устойчивы во внешней среде. При 10-13 °С они со­храняются в воде и влажной почве до 5 мес, в молоке — до

9 мес, в сыре — до года. При 70 °С они погибают в течение

10 мин, при кипячении — практически мгновенно. Бактерии чувствительны к дезинфектантам. •

Морфология и культуральные свойства. Бруцеллы от­личаются выраженным полиморфизмом: в одном препарате (осо­бенно в молодых культурах) наблюдают кокки и удлинённые палочки. Клетки В. melitensis чаще представлены кокковидны-ми формами, В. abortus и В. suis — палочками с закруглённы­ми концами (рис. 20-1); бруцеллы в мазках располагаются беспорядочно, нередко в виде скоплений. Легко окрашиваются анилиновыми красителями. Хемоорганотрофы, каталаза- и оксидаза-положительны (кроме В. ovis и В. neotomae). Бру­целлы — строгие аэробы. Температурный оптимум 37 °С; опти­мальный рН 6,6-7,4. Они требовательны к питательным сре­дам. Посевы обычно проводят на 5% КА (с кровью барана) или печёночный агар Хаддльсона. На твёрдых средах бруцеллы образуют мелкие выпуклые гладкие мутноватые, с перламутровым оттенком S-колонии. В процес­се диссоциации они формируют шероховатые R-колонии. В жидких средах дают равномерное помутнение.

Биохимические свойства. Ферментируют глюкозу и арабинозу с образованием кислоты. Восстанавливают нитраты; цитрат не утилизируют; индол не образуют; реакции с метиловым красным и Фогеса-Проскауэра отрицательные, образуют сероводород.

Антигенная структура. У бруцелл определяют до 15 антигенных фракций; выделяют ро­довой Аг и видовые поверхностные М- (доминируют у В. melitensis), А- (преобладают у В. abortus и В. suis) и R- (у шероховатых форм) Аг. Для их идентификации применяют соответ­ствующие антисыворотки. Третий поверхностный Аг — термолабильный L-Ar, имеющий сход­ство с Vi-Ar сальмонелл.

Патогенез поражений. Из первоначальных ворот бруцеллы распространяются по лимфо-току и депонируются в лимфатических узлах. В первые 5-10 сут бактерии размножаются в макрофагах регионарных лимфатических узлов (миндалины, заглоточные, подчелюстные, языч­ные, шейные узлы, лимфоидная ткань подвздошно-слепокишечного отдела кишечника). Бруцел­лы способны переживать внутри фагоцитов, выделяя низкомолекулярные факторы, ингиби-рующие слияние фагосом с лизосомами. Внутри фагоцитов бруцеллы могут формировать в L-формы и длительно персистировать, что приводит к появлению гранулём. Обратный переход в исходные формы обусловливает рецидив болезни. Из разрушенных макрофагов бруцеллы попадают в кровоток и диссеминируют в печень, селезёнку, почки, костный мозг и эндокард. В поражённых органах находят очаги некроза, окружённые инфильтратами. В дальнейшем бак­терии могут попадать в молочные железы человека и появиться в грудном молоке. Инфицирова-ние плаценты и тканей плода животных приводит к абортам, однако при бруцеллёзе беремен­ных женщин спонтанные аборты регистрируют не чаще, чем у здоровых. Такое различие обус­ловлено наличием в плаценте животных ускоряющего рост бруцелл эритритола.

Клинические проявления. Продолжительность инкубационного периода 1-6нед. Выде­ляют пять клинических форм бруцеллёза: первично-латентную, остросептическую, первично-хроническую метастатическую, вторично-хроническую метастатическую и вторично-латентную. Среди поражений доминируют нарушения функций опорно-двигательного аппарата, нервной и половой систем. Наиболее характерны полиартриты, полиневриты, орхиты и эпидидимиты. При аэрогенном заражении часто развиваются вялотекущие пневмонии. Практически все фор­мы сопровождаются генерализованной лимфаденопатией, увеличением печени и селезёнки.

Принципы микробиологической диагностики. Включают бактериологические, серо­логические и аллергологические методы. Материал для исследований: кровь, моча, грудное молоко, аспираты костного мозга и биопсийный материал печени. Принимая во внимание сис­темный характер поражений, в первую очередь исследуют кровь. Образцы культивируют в МПБ при 37 "С. При проведении исследования засевают два флакона и в одном создают повышенную концентрацию С0₂. Через 4-5 сут в этом флаконе наблюдают рост бруцелл; среда может ос­таваться слегка мутной или прозрачной. После пе­ресева на твёрдые среды отмечают характерный рост колоний, из которых отсеивают чистые культуры с последующей идентификацией видовых свойств. При сильном загрязнении материала им заражают морс­ких свинок и от них выделяют чистую культуру.

• Поскольку биохимические и культуральные свойст­ва варьируют внутри одного вида, то у В. melitensis вы­деляют 3 биовара, у В. abortus — 9, а у В. suis — 5. Для их дифференцировки используют потребность пер­вых генераций в СО,, способность к образованию H₂S, чувствительность к бактерицидному действию красителей основного фуксина и тионина, фаголиза-бельность, а также агглютинабельность моноспеци­фическими антисыворотками.

• Для выявления Аг бруцелл применяют РПГА с эрит-роцитарным диагностикумом с AT к родовому Аг, а также реакцию агрегат-агглютинации, РП и ИФА.

• Для выявления AT в сыворотке крови применяют РА Райта, реакцию Кумбса (на неполные AT), РНИФ, РПГА, РСК, ИФА и др. Для быстрого обнаружения AT применяют реакцию агглютинации Хаддльсона на стекле, латекс-агглютинации, тест с бенгальским розовым и др.

• При отрицательных результатах бактериологичес­ких и серологических исследований ставят кожные аллергические пробы (проба Бюрнё), обычно положительные у 70-85% пациентов к концу 1 мес заболевания. Аллергеном служит бруцеллин — белковый экстракт культуры. Реакция положительна и у вакцинированных лиц.

• Для выявления возбудителя в молоке широко приме­няется кольцевая проба Банга (рис. 20-2).

Лечение и профилактика. Препараты выбора — тетрациклины и аминогликозиды (стрептомицин); в тяжёлых и упорных случаях назначают рифампицин. Предупреждению бруцеллёза способствует элементар­ное соблюдение правил личной гигиены и режима

обработки сельскохозяйственной продукции. Заболе­ваемость человека определяется эффективностью профилактики бруцеллёза среди животных. В эндемичных очагах козье-овечьего бруцеллёза применяют живую вакцину из штамма В. abortus. Проводят однократную накожную иммунизацию. При отрицательной кожной пробе и отсутствии выработки AT проводят ревакцинацию. Вакцина реактогенна. Также предложена химическая вакцина из Аг клеточной стенки. Все доступные вакцины не обеспечивают 100% защитного эффекта. Способность взвеси убитых бруцелл (лечебная вакцина) или ХБВ стимулировать кле­точные иммунные реакции используют при лечении хронических поражений.

(18) Способностью к внутриклеточному выживанию и размножению обладают многие бактерии. Внутриклеточный паразитизм — важ­ное звено жизненного цикла этих микробов — в большинстве слу­чаев носит временный и факультативный характер. Исключе­ние — хламидии и риккетсии, для которых характерен облигат-ный внутриклеточный паразитизм (жизнедеятельность бактерий невозможна вне клетки-хозяина). Вследствие тесной связи жизнен­ного цикла внутриклеточно паразитирующих бактерий с заражен­ными клетками такие микробы долгое время считали крупными ви­русами. От вирусов их отличает ряд признаков: наличие РНК, ДНК и рибосом клеток прокариотического типа; наличие клеточной стен­ки бактериального типа; способность к самостоятельному синтезу нуклеиновых кислот, белков и липидов; наличие метаболически ак­тивных ферментов, в том числе сбраживающих углеводы; чувстви­тельность к антибактериальным препаратам.