Принципы микробиологической диагностики

При типичной форме острого гонорейного уретрита распознавание возбудителя в условиях лаборатории не представляет особого труда и может быть ограничено бактериоскопическим исследованием мазков гнойного отделяемого. Для этого готовят два мазка: первый окрашивают 1% спиртовым раствором эозина и 1% водным раствором метиленового синего, второй мазок окрашивают по Гра'му. Бактериоскопическая диагностика основана на наличии трёх призна­ков — характерной морфологии, внутриклеточного расположения бактерий и окраски по Граму. Диагностика гонореи у женщин путём бактериоскопии не всегда даёт положительный результат. У молодых женщин с пиурией (более 10³ нейтрофилов в поле зрения при отсутствии прочей патогенной микрофлоры) необходимо исключить гонококковую этиологию заболевания. При бактериоскопической диагностике также применяют методы прямой иммунофлюоресцен-ции и реакцию непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ). Для распознавания хронических инфекции, а также после неэффективной химиотерапии, приводящих к изменению характерных мор­фологических особенностей прибегают к выделению возбудителя.

Материал высеивают на свежеприготовленные твёрдые питательные среды — асцит-агар, среду с аутолизатами и сывороткой, КА. Инкубацию посевов желательно проводить при повышен­ном содержании СО, (10-20%). В зависимости от условий культивирования и качества сре­ды колонии появляются через 1-8сут после посева. Характерная особенность— аутолиз колоний от центра к периферии, начинающийся уже через сутки.

Дифференциальный признак N. gonorrhoeae — оксидаза-положительные колонии, образованные грамотрицателъными диплококками. В ходе реакции происходит изменение окраски колоний в течение нескольких секунд с варьированием от розовой до чёрной (рис. 16-5). Видовую принадлежность подтверждают по способности ферментировать углеводы (табл. 16-1).

Лечение и профилактика

Лечение. Основу составляет антимикробная терапия. Препараты выбора — сульфанилами-ды и антибиотики, подавляющие жизнедеятельность гонококков (р-лактамные антибиотики, аминогликозиды).

Профилактика. Средства специфической иммунопрофилактики отсутствуют, что обуслов­лено высокой антигенной изменчивостью гонококков. Гоновакцина, на которую возлагалось много надежд, оказалась неэффективной. В настоящее время её применяют для лечения боль­ных с осложнениями или в диагностических целях (провокационные пробы). Общая профилак­тика основана на мерах предупреждения венерических заболеваний. Для предупреждения го-нобленнореи новорождённым сразу после рождения закапывают в конъюнктивальный мешок (девочкам также в половую щель) 1-2 капли раствора сульфацил натрия.

(14) Возбудитель коклюша

Коклюш — острое инфекционное заболевание, сопровождаю­щееся воспалением гортани, трахеи и бронхов. Возбудитель — В. pertussis; впервые выделен Ж. Бордё и О. Жангу (1906).

Эпидемиология. В. pertussis (палочка Борде-Жангу) па­тогенна только для человека; передаётся воздушно-капель­ным путём. Резервуар инфекции — больные типичной или стёртой формами. К возбудителю восприимчивы лица любого возраста, но чаще болеют дети от 1 года до Шлет. До введе­ния в практику антибиотиков и средств иммунопрофилактики заболевание часто заканчивалось летально, особенно у детей в возрасте до 1 года. Бордетеллы мало устойчивы во внешней среде. Чувствительны к солнечному излучению. При 50-55 °С погибают за 30 мин, при кипячении — мгновенно. В мокроте сохраняются более длительно, при высыхании последней поги­бают в течение нескольких часов. Очень чувствительны к дей­ствию дезинфектантов и антисептиков.

Морфология, тинкториальные и свойства. В. pertussis — мелкая овоидная палочка, размером 0,2-0,5x1,0-1,2 мкм. Неподвижна, образует капсулу. Клетки плохо окрашиваются по Граму, предпочтительно использовать толуидиновый синий, выявляющий биполярные метахро-матические гранулы (клеточные липоиды). Коклюшная палочка — строгий аэроб; каталаза положительна. Углеводы практически не ферментирует, требовательна к питательным сре­дам. Кроме того, росту бактерий препятствуют накапливающиеся в среде жирные кислоты, ингибирующие их рост. Поэтому в культуральные среды вносят адсорбенты — активированный уголь, крахмал, альбумин и др. Наиболее часто используют агар Бордё-Жангу и казеиново-угольный агар (КУА).

« Через 3-5 сут на агаре Бордё-Жангу коклюшная палочка образует небольшие (1 мм в диамет­ре) сероватые, выпуклые и блестящие колонии, напоминающие капельки ртути или жемчужи­ны, окружённые зоной слабого гемолиза. На КУА колонии блестящие, серовато-кремового цвета (рис. 20-3). При изменении состава питательной среды или условий культивирова­ния бордетеллы быстро изменяют тип роста и антигенные свойства. Переход от S-формы (I фаза) к R-форме (IV фаза) происходит через промежуточные II и III фазы и сопровождается изменением набора Аг и потерей вирулентных свойств.

• В жидких средах (20% кровяной бульон) бактерии дают незначительное помутнение, образу­ют плёнку (иногда со спускающимися вниз отростками типа сталактитов); к 10-14-м суткам культивирования образуют осадок, среда при этом становится прозрачной. Антигенная структура. У возбудителя коклюша выделяют общие (родовые) и специфи­ческие (видовые) Аг. Общие Аг опосредуют агглютинацию бактерий гомологичными и гетероло-гичными антисыворотками.

• Бактерии I фазы. Набор Аг изучен не полностью. У бактерий выделяют специфический 0-Аг, содержащийся в микроворсинках (агглютиногены I фазы). Другие Аг В. pertussis I фазы — коклюшный токсин и гемагглютинины.

• Бактерии II и III фаз. Основные Аг сохранены, но их количественное содержание изменено.

• Бактерии IV фазы. Характерны утрата 0-Аг и отсутствие вирулентных свойств.