- •Оглавление
- •Предисловие
- •Методические указания
- •1. Питательные среды, применяемые в бактериологической практике
- •1.1. Требования, предъявляемые к питательным средам
- •1.2. Классификация питательных сред
- •1.3. Условия культивирования микроорганизмов
- •Распределение бактерий в зависимости от требований к условиям культивирования
- •2. Основы микробиологической диагностики инфекционных заболеваний
- •2.1. Техника сбора патологического материала от больного для бактериологического исследования
- •Взятие крови.
- •Взятие спинномозговой жидкости
- •Взятие желчи
- •Взятие мочи
- •Взятие отделяемого дыхательных путей
- •Взятие отделяемого открытых инфицированных ран
- •Взятие отделяемого глаз
- •Взятие отделяемого женских половых органов
- •Взятие материалов при аутопсии
- •Взятие рвотных масс
- •Взятие промывных вод желудка
- •Взятие испражнений
- •Сопроводительный документ (направление)
- •2.2. Методы микробиологической диагностики инфекционных болезней
- •2.2.1. Бактериоскопический (микроскопический) метод
- •2.2.2. Бактериологический метод
- •2.2.3. Биологический метод
- •2.2.4. Серологический метод исследования
- •2.2.5. Аллергологический метод
- •3. Серологические реакции в диагностике инфекционных заболеваний
- •3.1. Реакция агглютинации
- •3.1.1. Ориентировочная реакция на стекле
- •3.1.2. Развернутая (пробирочная) реакция агглютинации
- •3.1.3. Реакция непрямой гемагглютинации
- •3.1.4. Реакция Кумбса (антиглобулиновый тест)
- •3.2. Реакция преципитации
- •3.2.1. Реакция преципитации с разведённым антигеном
- •3.2.2. Реакция кольцепреципитации
- •3.2.3. Иммунодиффузия по Оухтерлони
- •3.2.4. Иммуноэлектрофорез
- •3.2.5. Реакция флоккуляции
- •3.2.6. Реакция нейтрализации
- •3.3. Реакции лизиса
- •3.3.1. Реакция бактериолиза
- •3.3.2. Реакция гемолиза
- •3.4. Реакция связывания комплемента
- •3.5. Реакции с меченными компонентами
- •3.5.1. Иммунофлюоресцентные методы
- •Реакция прямой иммунофлюоресценции
- •Непрямой иммунофлюоресцентный метод
- •3.5.2. Иммуноферментный анализ
- •Прямой метод ифа
- •Непрямой метод ифа
- •3.5.3. Радиоиммунный анализ
- •3.6. Иммуноблотинг
- •4. Химиотерапевтические препараты. Антибиотики
- •4.1. Требования, предъявляемые к химиотерапевтическим препаратам. Химиотерапевтический индекс
- •4.2. Основные группы химиотерапевтических препаратов
- •4.3. Антибиотики
- •4.3.1. Основные этапы получения антибиотиков
- •4.3.2. Классификация антибиотиков
- •Классификация антибиотиков
- •4.3.3. Антибиотикорезистентность Причины формирования антибиотикорезистентности
- •4.3.4. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам
- •4.3.5. Осложнения и побочные действия антибиотиков
- •4.3.6. Основные причины неэффективности антибиотикотерапии
- •5. Учение об инфекции и иммунитете
- •5.1. Факторы патогенности бактерий
- •Сравнительная характеристика экзо- и эндотоксинов
- •5.2. Инфекционные свойства вирусов
- •5.3. Особенности вирусных инфекций
- •5.4 Невосприимчивость организма к инфекционным агентам
- •5.5. Иммунокомпетентные клетки
- •5.6. Формы иммунного ответа
- •5.6.1. Иммунный ответ по гуморальному типу
- •Динамика образования антител
- •5.6.2 Иммунный ответ по клеточному типу
- •5.6.3. Иммунологическая толерантность
- •6. Биологические препараты для профилактики, лечения и диагностики инфекционных заболеваний
- •6.1. Краткая квалификационная характеристика биологически активных препаратов
- •6.1.1. Лечебно-профилактические препараты
- •6.1.2. Диагностические препараты
- •6.2.1. Вакцины
- •6.3.1. Иммунные сыворотки Сыворотка противодифтерийная
- •Антитоксичная противостолбнячная сыворотка лошадиная
- •Сыворотки противоботулинические типов а,в,с,е,f
- •Антитоксическая противогангренозная поливалентная сыворотка
- •6.3.2. Иммуноглобулины
- •Гамма – глобулин противолептоспирозный
- •Стафилококковый бактериофаг жидкий
- •7.7.1. Антигенные препараты
- •Антиген аденовирусный для рск
- •Стрептолизин–о, сухой
- •6.7.3. Бактериофаги
- •Бактериофаги стафилококковые типовые диагностические сухие ( международный набор, Англия )
- •6.7.4. Бактериальные аллергены
- •6.7.5. Дополнительные диагностические препараты
- •7.2. Инфекция и иммунитет
- •7.3. Частная микробиология
- •1.4. Частная вирусология
- •7.5. Принцип и образец построения экзаменационного билета
- •Образец билета
- •7.6. Планы ответа студентов по некоторым разделам
- •7.6.1. Схема ответа по частной микробиологии
- •7.6.2. Схема ответа по биологически-активным препаратам
- •Заключение
2.1. Техника сбора патологического материала от больного для бактериологического исследования
Материалом для бактериологических исследований могут быть: кровь, спинномозговая жидкость, гнойное отделяемое ран, мокрота, слизь из носоглотки или миндалин, желчь, испражнения, рвотные массы, промывание воды желудка, моча, реже - пробы секционного материала. Патологический материал для бактериологического исследования рекомендуется брать у больных до начала лечения, так как под влиянием сульфаниламидов, антибиотиков, иммунных сывороток и других лечебных средств бактерии изменяются и утрачивают способность к росту на искусственных питательных средах.
Взятие крови.
Кровь для посева следует брать у больных, соблюдая правила асептики, чтобы избежать попадания в питательную среду микроорганизмов из внешней среды.
Посев необходимо проводить во время подъема у больного температуры, в начале появления лихорадки.
Посев рекомендуется проводить до начала специфического, антибактериального лечения или, по крайней мере, через 12-24 часа после последнего введения препаратов больному (это время зависит от скорости выведения применяемого препарата из организма). Следует учитывать также стадию заболевания с тем, чтобы взять кровь для посева в то время, когда предполагается бактериемия (например, при брюшном тифе - в первые 10-15 дней от начала заболевания).
Для результативного бактериологического исследования необходимо сеять достаточные количества крови (не менее 10мл у взрослых и 5мл у детей) в соответствующее количество жидкой питательной среды (100 или 50 мл). Это делается для того, чтобы путем разведения крови (1:10) преодолеть естественные бактерицидные свойства крови.
Для взятия крови необходимо пользоваться стерильным шприцем. Системы для одноразового пользования или шприцы, простерилизованные в централизованной стерилизационной, освобождаются от упаковки только непосредственно перед употреблением.
Кожу над пунктируемой веной обрабатывают 70% спиртом, затем 5% настойкой йода, затем снова спиртом. При наличии у больного постоянного подключенного катетера или капельницы в вене можно пользоваться ими для получения крови. Некоторому количеству крови дают свободно стечь в пробирку (эту кровь можно использовать для биохимических анализов), затем набирают кровь в шприц для посева. Врач - бактериолог должен следить за соблюдением правил асептики на всех этапах взятия и посева крови. Если возникает подозрение, что в какой-то момент в посев крови могли попасть микроорганизмы из внешней среды (с кожи больного, с рук персонала, из воздуха и т.п.) и нет возможности повторить посев, следует сделать специальную пометку на соответствующем флаконе, чтобы соответственно оценить результаты посева.
Кровь на посев берут у постели больного или в процедурном кабинете стерильным шприцем или системой для взятия крови одноразового пользования с соблюдением всех правил асептики и засевают на питательную тут же у постели больного. Взятие крови и ее посев осуществляют, как правило, два человека. Пока один человек обрабатывает кожу больного над пунктируемой веной, пунктирует вену и берет кровь, другой над пламенем спиртовки открывает пробку флакона с питательной средой, подставляет его со средой под струю крови из шприца или системы, обжигает горлышко и пробку флакона и закрывает его.
Для приготовления препарата «толстой капли» одну каплю из шприца или системы помещают на предметное стекло и подсушивают ее на воздухе, фиксируют метиловым спиртом или смесью Никифорова (спирт с эфиром поровну) и затем окрашивают спиртово-водным раствором метиленового синего (96% этилового спирта - 10мл, метиленового синего - 1г, дистиллированной воды - 100мл).