1.3. Условия культивирования микроорганизмов

Выделение микробов из естественной среды обитания и дальнейшее поддержание их жизнедеятельности в лабораторных условиях осуществляется с использованием искусственных питательных сред. При выращивании культур микроорганизмов необходимо учитывать не только их потребности в питании, но и влияние многих других факторов окружающей среды, так как одни из них оказывают стимулирующее влияние на рост и размножение микробов, а другие – угнетающее. Разные виды микроорганизмов могут иметь неодинаковые оптимальные условия выращивания. В связи с этим при их культивировании следует учитывать влияние на интенсивность роста и размножения микробов температурных условий, кислотности среды, потребности в кислороде и некоторых других факторов.

В зависимости от потребности в тех или иных факторах окружающей среды микроорганизмы подразделяются на группы (Таблица № 1.)

Таблица № 1.

Распределение бактерий в зависимости от требований к условиям культивирования

Наименование группы микроорганизмов	Факторы внешней среды	Условия культивирования
требовательные к питательным средам нетребовательные	питательная среда	Требуют добавления органических соединений (кровь, сыворотка) к простым средам. Растут на простых пита- тельных средах (МПБ, МПА).
психрофилы мезофилы термофилы	температура	от 2оС до 20оС от 20оС до 40оС от 40оС до 100оС
аэробы облигатные анаэробы облигатные факультативные аэробы аэротолерантные бактерии микроаэрофилы	кислород	Живут только в присутствии кислорода. Обитают только в бескислородной среде. За счёт альтернативных метаболических путей способны существовать как в бескислородной, так и в кислородной среде. Устойчивы к наличию кислорода в среде, но не используют его в метаболизме. Нуждаются в небольшом количестве кислорода в среде.
быстрорастущие медленнорастущие	время культивирования	до 72 часов более 72 часов

2. Основы микробиологической диагностики инфекционных заболеваний

При диагностике заболеваний решающие значение имеет клиническое обследование больного, позволяющее нередко уже в первые дни и даже часы болезни выявить симптомы, характерные для данной патологии. Однако большое значение придается и лабораторным методам исследования, в том числе и иммунологическим. Они облегчают раннюю диагностику, позволяют дифференцировать нозологические формы заболеваний, имеющих общность в клинических проявлениях и течении болезни

Диагностический процесс в бактериологии складывается из четырех основных этапов:

- формулировка задачи и выбор метода исследования;

- выбор и взятие исследуемого материала, его хранение и транспортировка;

- проведение исследований;

- анализ полученных результатов.

Различают следующие методы лабораторной диагностики заболеваний микробной природы:

1. Методы, основанные на выявлении инфекционных агентов (бактерий, вирусов, грибов, простейших и т.д.):

- микроскопические методы (базируются на прямом обнаружении возбудителя в патологическом материале с помощью различных приемов микроскопии);

- бактериологические (основаны на культивировании возбудителя на питательных средах или на культурах тканей с целью выделения его в чистой культуре и последующей идентификации);

- биологические (целью является воспроизведение инфекционного заболевания в организме восприимчивых животных с последующим выделением чистой культуры возбудителя и ее идентификацией);

- методы, позволяющие обнаружить в исследуемом материале соединения, синтезированные микроорганизмами (летучие жирные кислоты при диагностике инфекций, обусловленных неспорообразующими анаэробами или токсин при диагностике ботулизма);

- иммунологические методы поиска антигенов возбудителей в исследуемом материале путём постановки серологических реакций с использованием диагностических сывороток (сероидентификация);

- генетические методы, основанные на обнаружении нуклеиновых кислот возбудителя в пробе.

2. Методы исследования активного иммунитета направлены, чаще всего на выявление нарастания титров антител к возбудителям в сыворотке крови больных в динамике заболевания (серодиагностика) или на обнаружение сенсибилизации организма больного (аллергодиагностика).

3. Неспецифические лабораторные тесты, позволяющие выявить отклонения исследуемых показателей от нормальных и тем самым обнаружить патологические изменения, характерные для определённых инфекционных процессов (например, наличие изменение активности трансаминаз при вирусных гепатитах).

Применение бактериологического метода диагностики способствует осуществлению ранней диагностики инфекционных болезней, дает лечащему врачу объективные доказательства достоверности поставленного диагноза. Успех бактериологической лабораторной диагностики в значительной степени зависит от правильности взятия у больного патологического материала, своевременной доставки его в лабораторию, грамотного оформления бланка-направления.