4.3.3. Антибиотикорезистентность Причины формирования антибиотикорезистентности

Под антибиотикорезистентностью понимают устойчивость микроорганизмов к действию антибиотиков и других противомикробных препаратов.

Причины формирования антибиотикорезистентности:

а) массовое, бесконтрольное применение антибиотиков;

б) неоправданное их применение;

в) назначение без определения чувствительности к ним возбудителя заболевания;

г) миграция в микробных популяциях R-плазмид;

д) добавление антибиотиков в качестве консервантов к продуктам питания;

е) высокая приспособляемость микробов к изменяющимся условиям окружающей среды.

Известны два вида устойчивости бактерий к антибиотикам:

1) первичная, или естественная связана с отсутствием «мишени» для антибиотика, она характерна для всех представителей вида, поэтому является видовой (например, устойчивость микоплазм к пенициллину обусловлена отсутствием у них клеточной стенки);

2) приобретённая резистентность является штаммовым признаком, т.к. она характерна для отдельных представителей вида, возникает под действием факторов окружающей среды.

Механизмы приобретённой резистентности могут быть генетическими и биохимическими.

Генетические механизмы – результат мутаций в генетическом аппарате микробной клетки или миграции плазмид, содержащих гены, которые контролируют синтез ферментов, осуществляющих инактивацию антибиотика.

К биохимическим механизмам формирования антибиотикорезистентности относятся:

а) инактивирование антибиотиков ферментами микроорганизмов, то есть превращение активной формы антибиотика в неактивную в результате ацетилирования или фосфорилирования;

б) нарушение синтеза компонентов клеточной стенки (например, в результате синтеза -лактамаз пенициллинрезистентными штаммами стафилококков);

в) возникновение у бактерий альтернативного пути образования жизненно важного метаболита, заменяющего основной путь, блокированный препаратом;

д) утрата проницаемости клеточной стенки для определённого антибиотика.

Пути преодоления лекарственной устойчивости:

- систематическое внедрение в практику новых антибиотиков;

- химическая модификация известных антибиотиков с защищенными активными группами, устойчивыми к бактериальным ферментам;

- разработка ингибиторов, подавляющих активность бактериальных ферментов, а также препаратов, препятствующих адгезии бактерий на клетках макроорганизма;

- мероприятия по ограничению распространения лекарственно-устойчивых бактерий;

- определение чувствительности выделяемых бактерий к антибиотикам перед их назначением;

- ограничение применения антибиотиков без достаточных показаний;

- запрещение использования антибиотиков в качестве консервантов пищевых продуктов и кормовых добавок;

- выявление носителей лекарственно-устойчивых бактерий;

- соблюдение дозировок антибиотиков, интервалов их введения;

- одновременное назначение препаратов, различных по механизмам действия.

4.3.4. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам

Для определения чувствительности бактерий к антибиотикам на практике используются 3 метода.

Метод стандартных бумажных дисков. Степень чувствительности бактерий к антибиотикам определяется величиной зон отсутствия роста засеянных газоном на чашках Петри микроорганизмов вокруг дисков, пропитанных разными антибиотиками.

- При диаметре зон от 0 до 6 мм микробы считаются устойчивыми к антибиотику;

- от 6 до 15 мм – слабочувствительными;

- от 15 до 25 мм – чувствительными;

- от 25 мм и более – высокочувствительными.

Достоинства метода - простота исследования, относительная дешевизна, а также его доступность. Недостаток метода - в том, что он является ориентировочным, даёт только качественную характеристику устойчивости бактерий к антибиотикам.

Метод серийных разведений антибиотиков более сложен в исполнении, более трудоёмкий и дорогой. Однако он позволяет определить минимальную бактериостатическую и бактерицидную дозу антибиотика и бактерицидную.

Экспресс рэдокс-метод – самый быстрый, основан на улавливании изменения окислительно-восстановительного потенциала питательной среды размножающимися микроорганизмами, при этом происходит изменение цвета индикатора, добавленного в питательную среду. Метод быстрый, даёт возможность получения результатов исследования в течение 3-4 часов. Но метод является ориентировочным и качественным.

Новые методы. В настоящее время разработаны компьютеризированные системы, автоматически проводящие выделение бактерий из исследуемых образцов материала и определяющие их чувствительность к антибиотикам. Их основными достоинствами является освобождение персонала от рутинных исследований и чёткая стандартизация полученных результатов. Широкое распространение новых методов ограничивает их стоимость. Наиболее доступным из новых методов является Е-тест, являющийся модификацией метода дисков, но вместо последних используются полоски фильтровальной бумаги, пропитанные разными концентрациями препаратов. Если бактерии чувствительны к действию препарата, то вокруг участков полоски, содержащих ингибирующие концентрации, образуется эллипсовидная зона. Минимальной ингибирующей концентрации препарата соответствует участок полоски, где её пересекает граница задержки роста бактерий.