3.2. Реакция преципитации

В отличие от реакции агглютинации, где антигенами служат целые клетки, в реакции преципитации применяются растворимые или мелкодисперсные антигены, представляющие собой прозрачную или слегка опалесцирующую жидкость. Так, в качестве антигенов могут быть использованы продукты распада микробной клетки – лизаты, фильтраты, экстракты бактериальных культур. При положительной реакции преципитации образуется помутнение растворов, и выпадает нежный осадок.

Реакция преципитации, таким образом, отличается от агглютинации не только размерами частиц антигена, но и видом образующегося осадка.

Антигены, участвующие в реакции преципитации, называют преципитиногенами, антитела сыворотки – преципитинами, а образующийся специфический комплекс, выпадающий в осадок при положительных реакциях – преципитатом. Преципитиногены отличаются большой устойчивостью к высокой температуре – они выдерживают кипячение, сохраняя способность активно реагировать с антителами. Следует отметить, что комплекс антиген – антитело образуется только при определенных (оптимальных) соотношениях концентрации реагирующих молекул.

Реакция преципитации применяется с целью:

а) сероидентификации – определения видовой принадлежности бактерий;

б) для определения видовой принадлежности продуктов, белковых пятен и т. д. – в судебно – медицинской практике;

в) для серодиагностики инфекционных болезней, то есть для обнаружения специфических антител в исследуемой сыворотке.

Достоинствами метода преципитации являются его простота, а также возможность проводить анализ смешанных антигенов и антител. К недостаткам относится довольно низкая чувствительность и большая длительность исследования.

Существуют различные модификации постановки реакции преципитации.

3.2.1. Реакция преципитации с разведённым антигеном

Реакция ставиться в узких преципитационных пробирках. В пробирки разливают равные объемы различных разведений антигена и добавляют одинаковые количества иммунной сыворотки. В пробирках с оптимальным соотношением антигена и соответствующих ему антител наблюдается помутнение смеси или выпадение осадка.

3.2.2. Реакция кольцепреципитации

Реакция кольцеприцепитации – одна из наиболее простых серологических методов. Она выполняется в узких преципитационных пробирках. Сначала во все пробирки поровну разливают прозрачный раствор антигена, взятого в нескольких разведениях (1:2; 1:4; 1:8; 1:16). Соединение антигенов и антител происходит на границе соприкосновения реагентов. В результате этого взаимодействия в положительных случаях (когда антиген соответствует антителу) через некоторое время происходит образование преципитата в виде опалесцирующего кольца.

Реакция нашла широкое применение в медицинской практике для выявления в шерсти, шкурах, мясе животных сибиреязвенного антигена (реакция Асколи); для обнаружения других возбудителей инфекционных болезней в патологическом материале, полученном от больных, или в объектах внешней среды, а также в судебно-медицинской экспертизе для определения видовой принадлежности белка в частности, белка крови или других биологических жидкостей.