- •Оглавление
- •Предисловие
- •Методические указания
- •1. Питательные среды, применяемые в бактериологической практике
- •1.1. Требования, предъявляемые к питательным средам
- •1.2. Классификация питательных сред
- •1.3. Условия культивирования микроорганизмов
- •Распределение бактерий в зависимости от требований к условиям культивирования
- •2. Основы микробиологической диагностики инфекционных заболеваний
- •2.1. Техника сбора патологического материала от больного для бактериологического исследования
- •Взятие крови.
- •Взятие спинномозговой жидкости
- •Взятие желчи
- •Взятие мочи
- •Взятие отделяемого дыхательных путей
- •Взятие отделяемого открытых инфицированных ран
- •Взятие отделяемого глаз
- •Взятие отделяемого женских половых органов
- •Взятие материалов при аутопсии
- •Взятие рвотных масс
- •Взятие промывных вод желудка
- •Взятие испражнений
- •Сопроводительный документ (направление)
- •2.2. Методы микробиологической диагностики инфекционных болезней
- •2.2.1. Бактериоскопический (микроскопический) метод
- •2.2.2. Бактериологический метод
- •2.2.3. Биологический метод
- •2.2.4. Серологический метод исследования
- •2.2.5. Аллергологический метод
- •3. Серологические реакции в диагностике инфекционных заболеваний
- •3.1. Реакция агглютинации
- •3.1.1. Ориентировочная реакция на стекле
- •3.1.2. Развернутая (пробирочная) реакция агглютинации
- •3.1.3. Реакция непрямой гемагглютинации
- •3.1.4. Реакция Кумбса (антиглобулиновый тест)
- •3.2. Реакция преципитации
- •3.2.1. Реакция преципитации с разведённым антигеном
- •3.2.2. Реакция кольцепреципитации
- •3.2.3. Иммунодиффузия по Оухтерлони
- •3.2.4. Иммуноэлектрофорез
- •3.2.5. Реакция флоккуляции
- •3.2.6. Реакция нейтрализации
- •3.3. Реакции лизиса
- •3.3.1. Реакция бактериолиза
- •3.3.2. Реакция гемолиза
- •3.4. Реакция связывания комплемента
- •3.5. Реакции с меченными компонентами
- •3.5.1. Иммунофлюоресцентные методы
- •Реакция прямой иммунофлюоресценции
- •Непрямой иммунофлюоресцентный метод
- •3.5.2. Иммуноферментный анализ
- •Прямой метод ифа
- •Непрямой метод ифа
- •3.5.3. Радиоиммунный анализ
- •3.6. Иммуноблотинг
- •4. Химиотерапевтические препараты. Антибиотики
- •4.1. Требования, предъявляемые к химиотерапевтическим препаратам. Химиотерапевтический индекс
- •4.2. Основные группы химиотерапевтических препаратов
- •4.3. Антибиотики
- •4.3.1. Основные этапы получения антибиотиков
- •4.3.2. Классификация антибиотиков
- •Классификация антибиотиков
- •4.3.3. Антибиотикорезистентность Причины формирования антибиотикорезистентности
- •4.3.4. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам
- •4.3.5. Осложнения и побочные действия антибиотиков
- •4.3.6. Основные причины неэффективности антибиотикотерапии
- •5. Учение об инфекции и иммунитете
- •5.1. Факторы патогенности бактерий
- •Сравнительная характеристика экзо- и эндотоксинов
- •5.2. Инфекционные свойства вирусов
- •5.3. Особенности вирусных инфекций
- •5.4 Невосприимчивость организма к инфекционным агентам
- •5.5. Иммунокомпетентные клетки
- •5.6. Формы иммунного ответа
- •5.6.1. Иммунный ответ по гуморальному типу
- •Динамика образования антител
- •5.6.2 Иммунный ответ по клеточному типу
- •5.6.3. Иммунологическая толерантность
- •6. Биологические препараты для профилактики, лечения и диагностики инфекционных заболеваний
- •6.1. Краткая квалификационная характеристика биологически активных препаратов
- •6.1.1. Лечебно-профилактические препараты
- •6.1.2. Диагностические препараты
- •6.2.1. Вакцины
- •6.3.1. Иммунные сыворотки Сыворотка противодифтерийная
- •Антитоксичная противостолбнячная сыворотка лошадиная
- •Сыворотки противоботулинические типов а,в,с,е,f
- •Антитоксическая противогангренозная поливалентная сыворотка
- •6.3.2. Иммуноглобулины
- •Гамма – глобулин противолептоспирозный
- •Стафилококковый бактериофаг жидкий
- •7.7.1. Антигенные препараты
- •Антиген аденовирусный для рск
- •Стрептолизин–о, сухой
- •6.7.3. Бактериофаги
- •Бактериофаги стафилококковые типовые диагностические сухие ( международный набор, Англия )
- •6.7.4. Бактериальные аллергены
- •6.7.5. Дополнительные диагностические препараты
- •7.2. Инфекция и иммунитет
- •7.3. Частная микробиология
- •1.4. Частная вирусология
- •7.5. Принцип и образец построения экзаменационного билета
- •Образец билета
- •7.6. Планы ответа студентов по некоторым разделам
- •7.6.1. Схема ответа по частной микробиологии
- •7.6.2. Схема ответа по биологически-активным препаратам
- •Заключение
3. Серологические реакции в диагностике инфекционных заболеваний
В настоящее время иммунологические методы исследования широко применяются для лабораторной диагностики инфекционных и неинфекционных заболеваний.
Реакции взаимодействия между антигенами и антителами называются серологическими (serum – сыворотка, logos – учение).
Суть всех серологических реакций состоит в специфическом соединении антигенов и соответствующих им антител с образованием комплекса. Серологическая реакция возможна, если имеется иммунологическое соответствие (гомологичность) – главных компонентов – антигенов и антител. В основе иммунологической специфичности лежит структурная комплементарность антигена и антитела.
Процесс взаимодействия антигенов и антител протекает в две фазы – специфическую и неспецифическую. Первая фаза развивается быстро. Она состоит из специфического соединения активного центра антитела с детерминантными группами соответствующего (гомологичного) антигена. Более медленно развивается последующая фаза, неспецифическая – это внешнее проявление реакции антиген-антитело (выпадение хлопьев, помутнение среды и т. д.)
Серологические реакции применяются с двумя целями:
1) для выявления антител в исследуемой сыворотке с помощью известных антигенов (серодиагностика);
2) для установления неизвестного антигена с помощью известных сывороток (сероидентификация).
Определение неизвестного антигена при микробиологических исследованиях проводится с целью установления родовой, видовой, типовой принадлежности возбудителей, выделенных у обследуемого. В таких случаях из двух основных компонентов реакции (антитело, антиген) неизвестным является антиген, реакция должна проводиться с заведомо известными антителами. При этом антигеном является чистая культура выделенных из исследуемого материала микроорганизмов. В качестве заведомо известных антител применяются иммунные диагностические сыворотки. Последние получают из крови животных (чаще всего кроликов), предварительно иммунизированных соответствующими бактериальными антигенами. Иммунные сыворотки должны содержать высокий уровень специфических антител.
Помимо этого, серологические реакции могут использоваться для определения различных небактериальных антигенов: для установления групп крови, тканевых антигенов, опухолей, для подбора пар донор – реципиент при трансплантации органов и тканей и т. д.
Серологические реакции могут применяться и для обнаружения антител в сыворотке крови. В таких случаях требуется заведомо известный антиген (диагностикум). В качестве антигенов могут быть использованы взвеси живых или убитых микробов, экстракты или изолированные химические фракции из них.
Многочисленные серологические реакции, применяемые в настоящее время в практике здравоохранения, различаются по феномену, выявляющему связь антигена и антитела. Видимое проявление реакции будет различным в зависимости от того, какая методика используется, в каком физическом состоянии применяется антиген или иммунная сыворотка, участвует ли в реакции комплемент. Например, если используется корпускулярный антиген, имеет место феномен агглютинации – склеивание частиц (реакция агглютинации). Поскольку корпускулярные антигены состоят из частиц относительно крупного размера, выпадает видимый хлопьевидный осадок. Если же в реакции применяется растворимый антиген, наблюдается выпадение мелко зернистого осадка – преципитата (реакция преципитации). В случае, если в реакцию взаимодействия бактериальных антигенов и иммунной сыворотки вводится и комплемент, происходит бактериолиз (растворении бактериальных антигенов) или лизис эритроцитов (когда они используются в качестве антигена). Применение в серологических реакциях иммунных сывороток, меченых флюорохромами, ферментами или радиоизотопами, позволяет установить специфическое связывание антигенов с антителами по соответствующему феномену (свечение, изменение цвета или активности радиоизотопной метки).
Для оценки серологических реакций применяются такие критерии, как специфичность и чувствительность. Специфичность – это способность антигенов реагировать только с гомологичными антителами. Чувствительность – способность к специфическому взаимодействию при минимальных количествах антигенов и антител.