Определение мочевины в сыворотке крови диацетилмонооксимным методом

Для проведения анализа используют 3 пробирки, соответственно опытная, стандартная и контрольная пробы.

В опытную пробирку вносят 0,1 мл сыворотки крови, в стандартную – 0,1 мл стандартного раствора мочевины, в контрольную – 0,1 мл дистиллированной воды. В каждую пробирку добавляют по 2,0 мл рабочего раствора и нагревают 5 мин в кипящей водяной бане. Затем пробы быстро охлаждают в токе холодной воды и фотометрируют. Измерение оптической плотности пробы проводят при длине волны 500-560 нм (зеленый светофильтр) в кювете толщиной 0,5 см против контрольной пробы.

Ввиду нестабильности окрашенного комплекса следует фотометрировать раствор не позже, чем через 15 мин после охлаждения пробы.

Расчет производят по формуле:

А₁

Х = -------  16,65

А₂

где Х - концентрация мочевины, ммоль/л;

А₁ - оптическая плотность опытной пробы;

А₂ - оптическая плотность стандартной пробы.

Содержание мочевины в норме у взрослых:

В сывортке крови __________________ 2,50 – 8,33 ммоль/л

В моче ____________________________ 333 – 583 ммоль/сут.

Содержание мочевины в норме у детей:

1 Месяц – 1 год 2 – 14 лет

В моче __________________ 33 – 67 200 – 333 ммоль/сут

Теоретический раздел

1. Декарбоксилирование аминокислот, типы, биологическое значение. Биогенные амины, синтез, их функции, реакции окисления.

2. Пути образования и обезвреживания аммиака в организме.

3. Тканевое обезвреживание аммиака (синтез глутамина и аспарагина).

4. Биосинтез мочевины. Нарушения синтеза и выведения мочевины.

5. Особенности обмена аминокислот в детском возрасте. Конечные продукты азотистого обмена и их экскреция в онтогенезе.

6. Метаболизм метионина: образование S-аденозилметионина, его участие в реакциях трансметилирования.

7. Синтез креатина, его биологическая роль. Образование цистеина. Наследственные нарушения обмена серусодержащих аминокислот.

8. Пути обмена фенилаланина и тирозина в норме и патологии. Наследственные нарушения обмена фенилаланина и тирозина (фенилкетонурия, тирозиноз, алкаптонурия, альбинизм).

Л И Т Е Р А Т У Р А:

1. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 3-е изд. – М.: Медицина, 1998. – С. 440-444, 446-451, 453-457, 466-468.

2. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. – 2-е изд. – М.: Медицина, 1990. – С. 345-354, 356-360, 365-368.

3. Николаев А. Я. Биологическая химия. – М.: Высш. шк., 1989. – С. 315-323, 325-327, 331-339.

4. Лелевич В. В., Масловская А. А., Лукашик Н. К. Биохимические особенности детского организма: Учебное пособие по биологической химии для студентов педиатрического факультета. – Гродно, 2001. - С. 76-80, 81-82.

5. Конспект лекций.

З А Н Я Т И Е № 31

ТЕМА: ОБМЕН И ФУНКЦИИ АМИНОКИСЛОТ – III.

ОБМЕН НУКЛЕОТИДОВ

ЦЕЛЬ: Сформировать знания об обмене нуклеотидов. Составить метаболическую карту обмена аминокислот.