Опыт 7. Осаждение белков спиртом
Принцип
метода. Продолжительный контакт белка
со спиртом ведет к необратимому осаждению,
денатурации, в результате этого выпадает
хлопьевидный осадок белка вследствие
дегидратации белковых молекул при
добавлении спирта.
Под
денатурацией понимают утрату трехмерной
конформации, присущей данной белковой
молекуле. Это изменение может носить
временный или постоянный характер, но
и в том, и в другом случае аминокислотная
последовательность белка остается
неизменной. При денатурации молекула
развертывается и теряет способность
выполнять свою обычную биологическую
функцию.
Реакция
осаждения белка
спиртом или кратковременным действием
спирта обратима при охлаждении. Если
осадок быстро отделить от спирта, то
белок может сохранить нативное состояние.
Порядок
выполнения работы.
В
пробирку наливают 1 мл. раствора белка,
добавляют немного кристаллического
хлорида натрия, приливают туда же
постепенно 3-4 мл. этилового спирта.
Оформление
опыта:
