Занятие №7 тема: бактериологический метод исследования. Выделение чистых культур аэробов.

Общая цель занятия.

Научить студентов разбираться в понятиях - культура микроорганизма, штамм, биовар; разъяснить этапы выделения чистой культуры аэробов; привить студентам навыки приготовления мазков из исследуемого материала и чистой культуры; отработать навыки посевов и пересевов на плотных питательных средах; ознакомить студентов с классическим методом лабораторной диагностики инфекционных заболеваний, идентификации и дифференцировки бактерий, применение которого необходимо будущим специалистам в рамках обязанности врача.

А. Обсуждение темы:

1. Понятия: культура микроорганизмов, смешенная культура, чистая культура, колония, штамм, биовар, аэробы.

2. Этапы идентификации выделенной чистой культуры микроорганизмов.

а) Короткий «пестрый» ряд: цель использования, состав питательных сред.

б) Методика посева на «пестрый» ряд.

в) Учет результатов роста микроорганизмов на средах «пестрого» ряда.

3. Значение полученных данных для определения вида выделенной чистой культуры бактерий.

4. Знакомство с термостатом.

Б. Практическая работа:

- Выделение чистой культуры аэробов:

1. й этап. Микроскопия исследуемого материала, окраска по Граму. Посев на МПА в чашку Петри для получения изолированных колоний.

2. й этап.Учет роста на агаре в чашках Петри: микроскопическое изучение колоний; приготовление мазка из изолированной колонии, пересев изолированной колонии на скошенный агар в пробирку для накопления чистой культуры выделенных бактерий.

3 – й этап.

а)Определение чистоты выделенной культуры: приготовление мазка со скошенного агара и окраска по Граму, микроскопия, заключение.

б) Пересев чистой культуры со скошенногоагара на среды короткого

«пестрого» ряда.

4 – й этап – учет ферментативной активности выделенной чистой культуры.

Определение вида (идентификация) выделенной чистой культуры по морфологическим, тинкториальным и биохимическим свойствам.

Программированный контроль: заполнение карты № 4 «Выделение чистых культур аэробов».

В. Вопросы для самоподготовки:

а) Р. Кох и его заслуги в создании метода выделения чистых культур микроорагнизмов.

б) Культура бактерий: чистая и смешанная, колония, штамм, биовар, серовар, фаговар.

в) Этапы выделения чистой культуры микроорганизмов.

г) Значение метода выделения чистых культур микроорганизмов в диагностике инфекционных заболеваний.

е) Какие ферменты микроорганизма ответственны за изменение цвета питательной среды и газообразование в «поплавках» при посеве на МПБ с моносахаридами?

з) Какие ферменты микроорганизмов ответственны за положительную пробу на индол и сероводород при выращивании бактерий на питательной среде?

Письменное задание:

а) Указать принципы выделения чистых культур аэробов.

б) Записать схему выделения чистых культур аэробов по этапам.

в) Записать состав сред Гисса.

г) Описатьметоды определения протеолитических ферментов (проба на индол и сероводород)

д) Описать методы определения сахаролитических ферментов.

Рекомендуемая литература

Обязательная:

1.Микробиология с вирусологией иммунологией / Под ред. Л.Б. Борисова, А.М.

Смирновой. – М., 1994.

2.Микробиология иммунология и вирусология / Под ред. А.А. Воробьева. – М.,

1999г., 2005 г.

3.Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии / Под ред. Л.Б. Борисова.

– М., 1984г.

4.Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. А.И. Коротяев, С.А.

Бабичев. – С - Петербург, 1998г., 2005 г.

5. Медицинская микробиология.акад. РАМН В.И. Покровский, проф.

О.К. Поздеев. – М., 1998г.

6.Общая микробиология с вирусологией и иммунологией. В.О. Пожарская,

Б.Н. Райкис, А.Х. Казиев. – М., 2004 г.

7. Медицинская и санитарная микробиология./ Под редакцией А.А. Воробьева, Ю.С.

Кривошеина, В.П. Широбокова – Москва 2006 г.

Дополнительная:

1.Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., Истамов Х.И. Экологическая иммунология. – М.: Изд-во

ВНИРО, 1995г.

2.Клиническая иммунология / Под ред. А.В. Караулова. – М.: Мед.инф. агентство,

1999г.

3.Галактионов В.Г. Иммунология. – М.: Изд-во Московского ун-та, 1998 г.

4.Ярилин А.А. Основы иммунологии. – М.: Медицина, 1999 г.

Зав. кафедрой микробиологии, профессор И.А.Базиков

ДЛЯ СТУДЕНТОВ ЛЕЧЕБНОГО И ПЕДИАТРИЧЕСКОГО ФАКУЛЬТЕТОВ ПО КУРСУ ОБЩЕЙ МИКРОБИОЛОГИИ.