Носителем неподвижной жидкой фазы является специальная хроматографическая бумага. Неподвижной фазой считается жидкость, находящаяся в порах хроматографической бумаги.				Сорбент нанесён в виде тонкого слоя (закреплённого или незакреплённого) на пластинку, изготовленную из стекла, алюминиевой фольги, различных полимеров и т.д.
с^бх^)						Стсх)
	бумажная			тонкослойная

| I

Плоскостная хроматография

Как в БХ, так и в ТСХ разделение может быть обусловлено раз­личными механизмами, например, адсорбционным, распределитель­ным, ионообменным, ион-парным, адсорбционно-комплексообразова- тельным.

Бумажная хроматография имеет ряд существенных недостатков и поэтому в настоящее время используется сравнительно редко:

• процесс разделения зависит от состава и свойств бумаги;

• содержание воды в порах бумаги может изменяться в зави­симости от условий хранения;

• очень низкая скорость хроматографирования(процесс полу­чения хроматограммы может занимать нескольких суток),

• низкая воспроизводимость результатов.

В тонкослойной хроматографии обычно используют хромато- графические пластины заводского изготовления с закреплённым сло­ем сорбента. Основа пластинки может быть изготовлена из алюми­ниевой фольги, полимера (например, полиэтиленгликольтерефталата), стекла. Для удерживания слоя сорбента на подложке применяется

гипс, крахмал, силиказоль и др. Толщина слоя сорбента может быть различной (0,1 мм и более), но обязательно одинаковой в любом месте хроматографической пластинки.

В качестве сорбентов в ТСХ используют силикагель, кизельгур, оксид алюминия, целлюлозу и др. В ионообменных хроматографиче- ских пластинках адсорбентами являются различные ионообменники (см. далее). В качестве подвижной фазы применяют либо индивиду­альные растворители, либо смеси веществ, взятых в определённом со­отношении.

хлорорганические пестициды

примеры подвижных фаз в ТСХ

хлороформ - ацетон 9:1

барбитурат ы

гексан - ацетон 4:1

неподвижная фаза силикагель

метанол - диэтиловый эфир - аммиак 98:1:1

4-

вещества основного характера

24.2.1. Методика получения плоскостной хроматограммы

Методика получения плоскостных хроматограмм включает в се­бя следующие этапы:

• предварительный этап- подготовка сорбента и исследуемой пробы, подготовка подвижной фазы, насыщение хроматографиче- ской камеры;

• нанесение исследуемой пробы на хроматографическую пла­стинку или бумагу;

• хроматографирование;

• высушивание хроматограммы;

• обнаружение пятен (зон) разделённых компонентов пробы.

Нанесение исследуемого раствора на хроматографическую пла­стинку или бумагу проводят градуированным капилляром, микро­шприцом или микропипеткой. Капля наносится касанием капилляра или иглы поверхности пластинки (но не надавливанием, так как при этом можно повредить слой сорбента!). Для предотвращения смыва­ния веществ с пластинки нанесение пятен проводят на линии, нахо­дящейся на расстоянии 1-2 см от нижнего края пластинки. Оптималь­ное количество исследуемого вещества (объём раствора), наносимого на пластинку, обычно определяется экспериментально. Если наноси­мое количество вещества слишком мало, то его можно не заметить при последующем проявлении. Нанесение на пластинку слишком

большого количества вещества приводит к перегрузке сорбента и, как следствие, размы­ванию пятна и уменьшению величины R_f (рис. 24.2).

После нанесения исследуемых веществ на хроматографическую пластинку или бу­магу, последние помещают в хроматографи- ческую камеру и проводят хроматографиро- вание. Обычно процесс хроматографирова- ния ведут до тех пор, пока растворитель не поднимется на расстояние ~10 см от линии старта.

Рис. 24.2.Изменение по­ложения и формы пятна при увеличении количества вещества, нанесённого на пластинку

Способы получения плоскостных хроматограмм

В зависимости от направления движе­ния подвижной фазы различают следующие варианты плоскостной хроматографии (табл. 24.1)

Табл. 24.1.

Способ							Сущность способа
восходящая хроматография							Фронт подвижной фазы перемещается снизу вверх под дейст­вием капиллярных сил. Для получения хроматограммы ис­пользуется наиболее простое оборудование - в качестве хро- матографической камеры можно использовать любую емкость с плоским дном и плотно закрывающейся крышкой, в кото­рую свободно помещается хроматографическая пластинка. Наиболее часто используемый способ получения хромато­грамм.
	1
нисходящая хроматография							Фронт подвижной фазы перемещается сверху вниз в основ­ном под действием сил тяжести. Для получения нисходящей хроматограммы в верхней части хроматографической камеры крепится кювета с хроматографической системой, из которой с помощью фитиля на хроматографическую пластинку посту­пает растворитель.
	1
радиальная хроматография							Исследуемое вещество наносится в центр пластинки. Фронт подвижной фазы перемещается от центра к краю пластинки
двухмерная хроматография							После получения хроматограммы проводится повторное раз­деление в направлении, перпендикулярном исходному, с ис­пользованием подвижной фазы другого состава. Часто ис­пользуется в бумажной хроматографии, например, в фар­макогнозии при изучении состава лекарственных расте­ний.

После завершения процесса хроматографирования пластинку извлекают из хроматографической камеры и сушат. Высушенная пла­стинка представляет собой хроматограмму исследуемых веществ.